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- SHBio
- 进口
- SHC3833
- 2025年06月30日
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100
- 供应商：
SHCC
- 运输方式：
干冰/常温
- 年限：
10年
- 生长状态：
贴壁/悬浮
- 规格：
1*10^6cell/T25
| 产品名称： | VERO C1008 [Vero E6] |
|---|---|
| 商品货号： | SHC-2236 |
| 中文名称： | 非洲绿猴肾细胞悬浮适应株 |
| 形态特征： | 淋巴母细胞样 |
| 生长特性： | 悬浮生长 |
| 细胞污染： | HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌检测阴性。 |
| 培养条件： | MEM +10%FBS |
| 传代方法： | 1:3传代，3-4天传1次 |
| 细胞冻存步骤： | 待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面T25瓶为例； 1．细胞冻存时，弃去培养基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml胰酶，细胞变圆脱落后，加入2ml完全培养基终止消化，可使用血球计数板计数。 2．1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮，加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀，按每1ml的数量分配到冻存管中，注意冻存管做好标识。明舟生物按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。3．将冻存管置于程序降温盒中，放入-80度冰箱，至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 |
| 复苏细胞步骤： | 将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。 |
| 细胞传代步骤： | 如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 |
| 冻存条件： | 基础培养基+5%DMSO+20%FBS |
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文献和实验更换 1 次）冻存：95% 培养液 + 5% DMSO 冻存于液氮。3. vero 细胞Vero 细胞被成功的用来培养狂犬病疫苗、乙脑疫苗等多种疫苗，在非典期间又为研究冠状病毒做出贡献，在医药研究种广泛应用。来源： 非洲绿猴肾细胞形态：上皮细胞生长特性：贴壁注释：该细胞是日本千叶大学的 Y. Yasumura 和 Y. Kawakita 于 1962 年 3 月 27 日从一只正常的成年非洲绿猴肾组织培养出来的。培养液：MEM（含 2 mM L - 谷氨酰胺和 Earle's BSS，1.5 g
续的节段组成。在轮状病毒外衣壳上具有型特异性抗原，在内衣壳上共同抗原。根据病毒 rna 各节段在聚丙烯酰胺凝胶电泳中移动距离的差别，可将人轮状病毒到少分为四个血清型，引起人类腹泻的主要是 a 型和 b 型。 轮状病毒在一般组织培养中不适应，需选用特殊的细胞株培养（如恒河猴胚肾细胞 ma104 株和非洲绿猴肾传代细胞 cv-1 株）。培养前应先用胰酶处理病毒，以降解病毒多肽 vp3 ，该多肽能限制病毒在细胞中的增殖，在培养时细胞维持液中也应含有一定浓度的胰蛋白
培养（如恒河猴胚肾细胞MA104株和非洲绿猴肾传代细胞CV-1株）。培养前应先用胰酶处理病毒，以降解病毒多肽VP3，该多肽能限制病毒在细胞中的增殖，在培养时细胞维持液中也应含有一定浓度的胰蛋白酶。 （四）抵抗力 轮状病毒对理化因子的作用有较强的抵抗力。病毒经乙醚、氯仿、反复冻融、超声、37℃1小时或室温（25℃）24小时等处理，仍具有感染性。该病毒耐酸、碱、在pH3.5～10.0之间都具有感染性。95%的乙醇是最有效的病毒灭活剂，56℃加热30分钟也可灭活病毒。
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