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- SHBio
- 进口
- SHC3759
- 2025年07月12日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
100
- 供应商：
SHCC
- 运输方式：
干冰/常温
- 年限：
10年
- 生长状态：
贴壁/悬浮
- 规格：
1*10^6cell/T25
| 产品名称： | CNLMG-B5538LC |
|---|---|
| 商品货号： | SHC-2314 |
| 中文名称： | 人永生化淋巴细胞 |
| 种属来源： | 人 |
| 组织来源： | 淋巴 |
| 细胞形态： | 淋巴母细胞样 |
| 生长特性： | 悬浮生长 |
| 培养条件： | 1640 |
| 细胞传代步骤： | 如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 |
| 细胞复苏步骤： | 将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。 |
| 细胞冻存步骤： | 待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面T25瓶为例；1．细胞冻存时，弃去培养基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml胰酶，细胞变圆脱落后，加入2ml完全培养基终止消化，可使用血球计数板计数。 2．1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮，加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀，按每1ml的数量分配到冻存管中，注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。3．将冻存管置于程序降温盒中，放入-80度冰箱，至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 |
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文献和实验一、试剂 1. 淋巴细胞分离液：避光4度保存，用前在37度水浴中加温。整个分离过程中，温度应控制在8-28度，温度过高或过低均影响分离质量。 2. 全培养基（用前配置）：RPM1640培养基，内含20%胎牛血清（Gibco）{56 ℃灭活30分钟}，1.6-1.8% 1M的HEPES，1.2% 0.2 mol/L谷氨酰胺，1%青霉素和链霉素。 3. 环胞酶素A（CyA）：5 ml(250 mg)/瓶，用1640培养基稀释成0.2 mg/ml，使用时
管采集恢复期病人外周血10ml，尽量在24h内进行分离 平衡盐(BSS, balanced salt solution)溶液配制(请具体参见淋巴细胞分离液使用说明)： Solution A Anhydrous D-glucose 0.1 percent 1.0 g/l CaCl2 × 2H2O 5.0 × 10-5 M 0.0074 g/l MgCl2 × 6H2O 9.8 × 10-4 M 0.1992 g/l KCl 5.4 × 10-3 M
人类组织正常及永生化细胞293E E转化人胚肾293细胞(B类)293ET ET转化人胚肾293细胞(B类)293KB KB转化人胚肾293细胞(B类)293T 人胚肾T细胞A7d 野生型人C-KIT受体细胞株(B类)AMS3(SCF3) 人干细胞因子单克隆抗体细胞株(B类)APP-PS1 人APP-PS1双基因转染细胞株(HEK293)(B类)FC33 ASP2 人胚胎肾细胞转化细胞(B类)FIP293 FIP293(来源于HEK293)(B类)HEK-293 人胚
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