- ￥1000
- SHBio
- 进口
- SHC3739
- 2025年07月07日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
100
- 供应商：
SHCC
- 运输方式：
干冰/常温
- 年限：
10年
- 生长状态：
贴壁/悬浮
- 规格：
1*10^6cell/T25
| 产品名称： | NCTC 2544 |
|---|---|
| 商品货号： | SHC-2335 |
| 中文名称： | 人角质细胞 |
| 细胞污染： | HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌检测阴性。 |
| 细胞传代步骤： | 如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 |
| 细胞复苏步骤： | 将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。 |
| 细胞冻存步骤： | 待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面T25瓶为例；1．细胞冻存时，弃去培养基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml胰酶，细胞变圆脱落后，加入2ml完全培养基终止消化，可使用血球计数板计数。 2．1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮，加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀，按每1ml的数量分配到冻存管中，注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。3．将冻存管置于程序降温盒中，放入-80度冰箱，至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 |
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文献和实验，Martin提供）过滤液体。当其他细胞通过时角质层细胞留在纱布的表面。 9. 用培养瓶将细胞洗下，培养基的用量约为一块皮肤10ml，将细胞接种于塑料细胞培养瓶中或玻璃盖玻片上，37o C培养4~12h。 10. 4~12h后观察培养皿表面的细胞群。 11. 将细胞转移至低钙培养液，角质细胞将开始繁殖。这种转移防止细胞的分层。低钙液由MEM（无钙）和10%螯合的FCS（同样含有正常水平的青霉素、链霉素）组成。螯合的血清按下法准备：每50ml血清需20g树脂，Chelex 100（Bio
（TGF-β）的刺激。其中角质细胞（Keratinocyte）的迁移和上皮形成对伤口愈合至关重要。 新加坡国立大学Prabha Sampath等人研究发现[3]，microRNA-198 (miR-198)表达后会通过靶向和抑制DIAPH1, PLAU 以及LAMC2来抑制角质细胞迁移，而FSTLI恰好相反，能够促进角质细胞迁移。TGF-β1作为关键的转录调节开关，能够通过降低KSRP(KH型剪接调节蛋白)的产生来抑制miR-198的生成，并间接促进FSTL1的表达。这一发现为改善病人伤口愈合疗法
基因治疗中的其他靶细胞 在基因治疗研究中，血管内皮细胞、骨髓基质细胞、角质细胞和胶质细胞等也常被用作靶细胞。理论上，每种细胞具有各自的特性，均有成为基因治疗靶细胞的可能性，在不同系统疾病的基因治疗中发挥不同的作用。 血管内皮细胞直接参与血液循环，可使外源基因的表达产物更快地传递出去。骨髓基质细胞可以从骨髓中获取，实现体外长期培养，并可通过静脉输注返回骨髓，支持造血长达1年。但是骨髓基质细胞在体外传代及扩增能力远不如其他细胞。角质细胞也比较易于获取，移植技术
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