- ￥900
- SHBio
- 进口
- SHC3439
- 2025年07月15日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 英文名：
SHCC
- 库存：
100
- 供应商：
赛泓瑞生物
- 细胞类型：
人结肠癌细胞-荧光素酶标记
- 运输方式：
干冰/常温
- 年限：
10年
- 生长状态：
贴壁/悬浮
- 规格：
1*10^6cell/T25
| 产品名称： | SW620-luc |
|---|---|
| 商品货号： | SHC-2866 |
| 中文名称： | 人结肠癌细胞-荧光素酶标记 |
| 组织来源： | 结直肠腺癌，来自转移淋巴结 |
| 形态特征： | 上皮细胞样 |
| 特征特性： | SW620是从一个51岁男性白人组织中分离得到。 由A.Leibovitz等从一个淋巴结建株。 细胞系主要由无绒毛的小园球细胞和双极细胞组成。 它仅合成少量癌胚抗原（CEA）且在裸鼠中有高度的致瘤性。 |
| 细胞污染： | HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌检测阴性。 |
| 培养条件： | 90%RPMI-1640+10%FBS+1%双抗 |
| 细胞冻存步骤： | 待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面T25瓶为例； 1．细胞冻存时，弃去培养基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml胰酶，细胞变圆脱落后，加入2ml完全培养基终止消化，可使用血球计数板计数。 2．1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮，加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀，按每1ml的数量分配到冻存管中，注意冻存管做好标识。明舟生物按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。3．将冻存管置于程序降温盒中，放入-80度冰箱，至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 |
| 复苏细胞步骤： | 将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。 |
| 细胞传代步骤： | 如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 |
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文献和实验【求助】用于检测双荧光素酶报告基因的细胞究竟是应该同时转染两种质粒呢还是只需一个质粒上面同时含两种荧光素酶报告基因？谢谢
lsdcfhyj 向大家请教关于双荧光素酶报告基因检测系统与单荧光素酶报告基因检测系统的问题，两者的区别我基本清楚了，只是我没弄清楚用于检测的细胞究竟是应该同时转染两种质粒（分别含虫荧光素酶报告基因和海肾荧光素酶报告基因）呢还是只需一个质粒上面同时含两种荧光素酶报告基因？还有一个问题是如果是要转染两种质粒的话，是只需在含虫荧光素酶基因质粒中插入所要检测的调控元件基因，还是两种质粒中的荧光素酶基因前都要插入调控元件？谢谢 msniu
(6)终止反应：移去盖玻片，将玻片置于盛有终止/洗涤液的染色缸内，37℃下洗涤30min(置摇床上振摇)。然后将玻片置于洗涤缓冲液内，洗2次，每次5min。 (7)地高辛抗体反应：用吸水纸吸干细胞或组织周围液体，滴加70μl过氧化物酶标记的地高辛抗体，均匀覆盖，加上塑料盖玻片，室温下置湿盒中孵育30min； (8)洗涤：置于洗涤缓冲液内，洗2次，每次5min； (9)用吸水纸吸干细胞或组织四周液体，滴加新鲜配制的DAB显色液，均匀覆盖，加盖塑料
1． ATP 反应液（ Bio-Orbit ）是粉末状混合物，含有荧光素、荧光素酶、 0.5mmol 醋酸镁、 50mg BSA 和 0.1 μ mol 无机焦磷酸。在 4 ℃可以保存 1 个月。用前用 10ml 含 2mmol/L EDTA 的 0.1mol/L pH7.75 Tris- 醋酸缓冲液稀释。稀释液分装后可在－ 20 ℃长期保存。 2． 在已经完成促增殖或抑生长试验后的 96 孔细胞培养板中（每孔含 100 μ l 细胞培养液），每孔加 0.1ml
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