- ￥900
- SHBio
- 进口
- SHC3432
- 2025年07月10日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 英文名：
SHCC
- 库存：
100
- 供应商：
赛泓瑞生物
- 细胞类型：
小鼠肝癌细胞-荧光素梅标记
- 运输方式：
干冰/常温
- 年限：
10年
- 生长状态：
贴壁/悬浮
- 规格：
1*10^6cell/T25
| 产品名称： | Hepa1-6-luc |
|---|---|
| 商品货号： | SHC-2873 |
| 中文名称： | 小鼠肝癌细胞-荧光素梅标记 |
| 组织来源： | 器官：肝品系：C57L 疾病：肝癌 |
| 形态特征： | 上皮细胞 C57/L小鼠中产生的BW7756小鼠肝癌的衍生株。 检测表明肢骨发育畸形病毒(鼠痘)阴性 |
| 细胞污染： | HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌检测阴性。 |
| 培养条件： | 90%DMEM高糖+10%胎牛血清+1%P/S |
| 细胞冻存步骤： | 待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面T25瓶为例； 1．细胞冻存时，弃去培养基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml胰酶，细胞变圆脱落后，加入2ml完全培养基终止消化，可使用血球计数板计数。 2．1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮，加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀，按每1ml的数量分配到冻存管中，注意冻存管做好标识。明舟生物按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。3．将冻存管置于程序降温盒中，放入-80度冰箱，至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 |
| 复苏细胞步骤： | 将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。 |
| 细胞传代步骤： | 如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 |
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文献和实验免疫荧光组织（细胞）化学技术系列四：荧光素及其标记抗体的方法
制备荧光抗体是免疫荧光组织化学的重要技术之一，制备特异性强和高效价的荧光抗体必须选用高质量的荧光素和高效价的抗体。一、荧光素荧光是指一个分子或原子吸收了给予的能量后即刻引起发光，停止能量供给，发光也瞬时停止。可以产生明亮荧光的染料物质，称荧光素。目前主要常用于标记抗体的荧光素如下：1、异硫氰酸荧光素（fluorescein isothiocyanate，FITC）FITC是一种呈黄色粉末状，性质稳定，在室温下能保存2年以上，在低温中可保存多年，易溶于水和酒精。最大吸收光谱为490~495nm
酶在生物体内得到持续表达，注射底物后与表达的荧光素酶反应发光。（自发光，其信号的发射不需要外部光源激发）。目前，比较常用的是萤火虫荧光素酶和海肾荧光素酶。 优势： 低背景，避免了小鼠自发荧光的干扰和减少了外界激发光源的干扰 高灵敏度，皮下少量的发光标记肿瘤细胞也可被检测到。如，AniView 100 在实际应用中，可检测到皮下至少 100 个发光标记的肿瘤细胞，但检测到的最少细胞数量与单个细胞的发光强度有关。 不足之处： 标记手段单一，只能通过转基因形式标记细胞、基因 标记物单一，目前主要
流式抗体的选择和配色原则由于在流式细胞实验过程中，荧光抗体对单细胞悬液的标记效果直接影响实验的数据质量。因此，需要考虑各种影响流式抗体品质及检测效果的因素，例如抗体特异性、荧光素信号强弱、荧光素标记方式、同型对照等。本文介绍如何选择合适的流式抗体： 1、需要满足抗体选择的最基本条件：目标蛋白特异性，反应种属以及应用实验等。 靶标特异性：确定标记物名称，确定是细胞表面表达，还是细胞内表达。细胞内表达需要进行透膜。 物种来源：确定待测样本的种属来源。例如，抗小鼠的抗体，不能用于人的样本的检测
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