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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 英文名:
SHCC
- 库存:
100
- 供应商:
赛泓瑞生物
- 细胞类型:
杂交瘤细胞CD25
- 运输方式:
干冰/常温
- 年限:
10年
- 生长状态:
贴壁/悬浮
- 规格:
1*10^6cell/T25
| 产品名称: | PC 61 5.3[PC 61; PC 61.5.3] |
|---|---|
| 商品货号: | SHC-2906 |
| 中文名称: | 杂交瘤细胞CD25 |
| 组织来源: | 大鼠B细胞,小鼠骨髓瘤 |
| 形态特征: | 淋巴母细胞 |
| 特征特性: | 动物经B6.1小鼠的细胞毒性T细胞株进行免疫。 脾细胞与P3X63Ag8.653骨髓瘤细胞融合。 该抗体阻断IL-2的结合及IL-2依赖的生长刺激,与IL-2受体形成免疫共沉淀。 检测表明肢骨发育畸形病毒(鼠痘)阴性。 |
| 细胞污染: | HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌检测阴性。 |
| 培养条件: | 90%DMEM高糖+10%FBS+1%PS |
| 细胞冻存步骤: | 待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面T25瓶为例; 1.细胞冻存时,弃去培养基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml胰酶,细胞变圆脱落后,加入2ml完全培养基终止消化,可使用血球计数板计数。 2.1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮,加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀,按每1ml的数量分配到冻存管中,注意冻存管做好标识。明舟生物按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。3.将冻存管置于程序降温盒中,放入-80度冰箱,至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 |
| 复苏细胞步骤: | 将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。 |
| 细胞传代步骤: | 如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 |








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文献和实验CD25 分子 CD25 常用单克隆抗体或代号: TAC,7G7/B6;(IL- 2Ra ) 主要表达细胞: Pre- T,Ta,Ba,Ma [CR] 分子质量(kDa)和结构: gp55(含2个CCP结构域) 功 能: 组成高亲力IL- 2受体,T细胞生长 CD25 Aka IL-2 receptor alpha chain, exists in at least 3 forms
Expanding Hybridoma(杂交瘤细胞) Clones
Borrowed from David Bowtell (bowtell@ariel.ucs.unimelb.edu.au) Transfer the srongest positive clones to a 24 well plate by scraping the adhering cells with a truncated yellow tip. Bring the volume to 1 ml using
(一)保存 当获得产生所需的单克隆 抗体的杂交瘤细胞 后,必须将一部分杂交瘤细胞 保存,否则在连续传代的过程中,可能产生突变或染色体的漂移以至丧失固有特性或丢失产生抗体的特性。另外在长期的培养过程中,难免不发生污染以至于毁灭。所以必须冷藏保存一部分。保存方法如下: 1.材料 (1) 细胞 :取对数生长期的细胞 。 (2) 10%二甲基亚砜保护液(二甲基亚砜能损坏滤器,而又被高压所破坏
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