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- 技术资料
- 英文名:
SHCC
- 库存:
100
- 供应商:
赛泓瑞生物
- 细胞类型:
HepaRG细胞
- 运输方式:
干冰/常温
- 年限:
10年
- 生长状态:
贴壁/悬浮
- 规格:
1*10^6cell/T25
| 产品名称: | HepaRG |
|---|---|
| 商品货号: | SHC-1009 |
| 中文名称: | 人肝癌细胞 |
| 细胞数量: | 1*10^6 |
| 组织来源: | 肝癌;女性 |
| 细胞种属: | 人 |
| 生长特性: | 贴壁 |
| 细胞污染: | HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌检测阴性。 |
| 培养基: | 1640,90%;FBS,10%;双抗。 |
| 传代方法: | 1:2-1:4 |
| 培养条件: | Atmosphere: Air, 95%; CO2, 5%。Temperature: 37℃ |
| 细胞传代步骤: | 如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 |
| 复苏细胞步骤: | 将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。 |
| 细胞冻存步骤: | 待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面T25瓶为例; 1.细胞冻存时,弃去培养基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml胰酶,细胞变圆脱落后,加入2ml完全培养基终止消化,可使用血球计数板计数。 2.1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮,加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀,按每1ml的数量分配到冻存管中,注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。3.将冻存管置于程序降温盒中,放入-80度冰箱,至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 |
| 细胞冻存: | Freeze medium: FBS/NBS, 92%;DMSO, 8%(for reference)Storage temperature: liquid nitrogen vapor phase |
| 细胞运输: | 干冰运输(2ml冻存管)或活细胞运输(T25细胞瓶) |








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文献和实验虽可长期冻存,但冻存复苏后的肝标志性的生物学活性会受到影响。HepaG2 缺乏肝标志性的生物学活性,CYP 相关酶系诱导表达量少,即使采取质粒转染 CYP 酶或肝特异性转录因子的方式,转染的细胞株也不适合研究正常肝细胞的基因表达调控。尽管原代人肝细胞在运用中受限颇多,但它仍然是体外研究化合物代谢和药物毒性的细胞模型的金标准。人肝细胞株——HepaRG 细胞,是从慢性丙型肝炎病毒感染的肝癌患者体内非瘤组织分离而得的细胞株,能表现人肝细胞的大多数功能,包括药物代谢所涉及的主要 CYP 酶系。本文
1. Medium preparation 1) Base Medium consists of 99mL of Williams’ Medium E combined with 1 mL of GlutaMAX™ I 2) Thaw the HepaRG™ Supplement by placing the bottle in a 37°C water bath until completely thawed. 3) Prepare the HepaRG
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