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- 英文名:
SHCC
- 库存:
100
- 供应商:
赛泓瑞生物
- 细胞类型:
C28/I2细胞
- 运输方式:
干冰/常温
- 年限:
10年
- 生长状态:
贴壁/悬浮
- 规格:
1*10^6cell/T25
| 产品名称: | C28/I2 |
|---|---|
| 商品货号: | SHC-1143 |
| 中文名称: | 人正常软骨细胞 |
| 细胞数量: | 1*10^6 |
| 组织来源: | 软骨;SV40转化;女性 |
| 细胞种属: | 人 |
| 生长特性: | 贴壁 |
| 细胞污染: | HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌检测阴性。 |
| 培养基: | H-DMEM,90%;FBS,10%;双抗。 |
| 传代方法: | 1:2-1:4 |
| 培养条件: | Atmosphere: Air, 95%; CO2, 5%。Temperature: 37℃ |
| 细胞传代步骤: | 如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 |
| 复苏细胞步骤: | 将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。 |
| 细胞冻存步骤: | 待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面T25瓶为例; 1.细胞冻存时,弃去培养基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml胰酶,细胞变圆脱落后,加入2ml完全培养基终止消化,可使用血球计数板计数。 2.1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮,加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀,按每1ml的数量分配到冻存管中,注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。3.将冻存管置于程序降温盒中,放入-80度冰箱,至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 |
| 细胞冻存: | Freeze medium: FBS/NBS, 92%;DMSO, 8%(for reference)Storage temperature: liquid nitrogen vapor phase |
| 细胞运输: | 干冰运输(2ml冻存管)或活细胞运输(T25细胞瓶) |








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症免疫治疗中发挥作用。作者通过免疫组化评估了 167 例胰腺导管癌(Pancreatic ductal adenocarcinoma, PDAC)患者肿瘤组织中 Pin1 的表达情况,结果发现 Pin1 在癌细胞中显著高表达,并与肿瘤进展正相关。此外,在肿瘤间质的癌症相关成纤维细胞(cancer-associated fibroblasts, CAFs)中,Pin1 也显著高表达。同时,Pin1 的高表达与免疫抑制型的肿瘤微环境,以及胰腺癌患者的低生存率密切相关。图片来源:Cell那么,癌细胞
条件,则必须经常摇动小瓶)。 3. 淀粉酶活性分析:从每个小瓶中吸取培养液0.1mL,分别置于事先盛有1.9mL淀粉磷酸盐的溶液中,摇匀,在30℃温箱或水浴中精确保温10min,然后加I2-KI溶液2mL,蒸馏水5mL,充分摇匀,于波长580nm下测定吸光度,以蒸馏水为空白校正仪器零点。读数,从标准曲线查得淀粉含量,以被分解的淀粉量作为淀粉酶的活性。 4. 以不同淀粉浓度(0~7μg/L)或淀粉量(0~100μg)及其吸光度绘制标准曲线。 四、结果计算 1. 第1瓶为淀粉的原始量(X
真爱满行囊 我最近在体外细胞做的关于gsk3-beta功能问题,发现药物处理以后,gsk-3-beta的总表达量下调,如果是这样的话 1、我是否能够得出gsk-3-beta的活性下调的结论? 2、是否还有必要做非活性形式的表达量?我的理解是,基础状态下,gsk-3beta维持的是低活性状态,如果总量都下调了,那应该能够得出活性降低的结论了吧? 3、另外,在这种情况下我是否有必要去做gsk-3-beta的216位点的活性形式的表达
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