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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 英文名:
SHCC
- 库存:
100
- 供应商:
赛泓瑞生物
- 细胞类型:
RIN-m5f细胞
- 运输方式:
干冰/常温
- 年限:
10年
- 生长状态:
贴壁/悬浮
- 规格:
1*10^6cell/T25
| 产品名称: | RIN-m5f |
|---|---|
| 商品货号: | SHC-1527 |
| 中文名称: | 大鼠胰岛β细胞瘤细胞 |
| 组织来源: | 胰岛瘤;雄性;NEDH |
| 形态特征: | 上皮细胞样 |
| 生长特性: | 贴壁生长 |
| 特征特性: | 该细胞是大鼠胰岛细胞RIN-m的克隆,分泌胰岛素及L型多巴脱羧酶,不产生生长激素抑制激素。 |
| 细胞污染: | HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌检测阴性。 |
| 培养条件: | RPMI-1640 +10%FBS |
| 传代方法: | 1:3~1:6传代,每周换液2~3次 |
| 细胞冻存步骤: | 待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面T25瓶为例; 1.细胞冻存时,弃去培养基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml胰酶,细胞变圆脱落后,加入2ml完全培养基终止消化,可使用血球计数板计数。 2.1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮,加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀,按每1ml的数量分配到冻存管中,注意冻存管做好标识。明舟生物按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。3.将冻存管置于程序降温盒中,放入-80度冰箱,至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 |
| 复苏细胞步骤: | 将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。 |
| 细胞传代步骤: | 如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 |
| 冻存条件: | 基础培养基+8%DMSO+20%FBS |








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文献和实验酸酶的实验室器具和试剂以及对实验区域进行去污处理。 根据来源材料(如血液、组织、细胞、植物)的类型和实验目标,有多种 RNA 分离和纯化方法可供选择。分离纯化过程的主要目标是稳定 RNA 分子、抑制 RNA 酶,并通过适当的储存和提取方法最大程度提高产量。最佳的纯化方法可以去除干扰酶活性的内源性化合物,如植物组织中的复合多糖和腐殖酸,以及反转录酶的常见抑制剂,如盐、金属离子、乙醇和苯酚。纯化的 RNA 应保存在 -80°C,尽量减少反复冻融。 纯化后评估 RNA 质量和数量的方法有许多种。常用
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[1]将某一器官从机体中摘出,或原样在机体中裸露进行研究时,连续注入适当的灌流液( Perfusa- te),或者通过与血管所连结的套管( cannula)向血管内流注灌流液,称为灌流。为了使离体的组织、器官能长时间保持生活状态,灌流液必须能代替血液。为此都使用 Na 、 K 、 Ca 组成的而与该动物血液的主要离子相近且具有近似 pH的生理盐溶液。生理盐溶液作为观察微量物质作用的溶媒也是很重要的。通常对于脊椎动物,使用适当处方的任氏( Rin- ger)液。对海产无脊椎
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