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- 英文名:
SHCC
- 库存:
100
- 供应商:
赛泓瑞生物
- 细胞类型:
HPaSteC(HPSC)细胞
- 运输方式:
干冰/常温
- 年限:
10年
- 生长状态:
贴壁/悬浮
- 规格:
1*10^6cell/T25
| 产品名称: | HPaSteC(HPSC) |
|---|---|
| 商品货号: | SHC-1716 |
| 中文名称: | 人胰腺星状细胞 |
| 细胞数量: | 1*10^6 |
| 组织来源: | 胰腺星状细胞 |
| 细胞种属: | 人 |
| 生长特性: | 贴壁 |
| 培养基: | 1640,90%;FBS,10%;双抗。 |
| 传代方法: | 1:2-1:4 |
| 培养条件: | Atmosphere: Air, 95%; CO2, 5%。Temperature: 37℃ |
| 细胞传代步骤: | 如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 |
| 复苏细胞步骤: | 将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。 |
| 细胞冻存步骤: | 待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面T25瓶为例; 1.细胞冻存时,弃去培养基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml胰酶,细胞变圆脱落后,加入2ml完全培养基终止消化,可使用血球计数板计数。 2.1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮,加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀,按每1ml的数量分配到冻存管中,注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。3.将冻存管置于程序降温盒中,放入-80度冰箱,至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 |
| 细胞冻存: | Freeze medium: FBS/NBS, 92%;DMSO, 8%(for reference)Storage temperature: liquid nitrogen vapor phase |
| 细胞运输: | 干冰运输(2ml冻存管)或活细胞运输(T25细胞瓶) |








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文献和实验多能性进行检测 [13](如在免疫缺陷小鼠中畸胎瘤的形成或胚状体分化为三胚层),但这些方法费力、昂贵和耗时,并且具有技术挑战性。另外,对多能性标志物的检测(如 Oct-3/4, Nanog, SSEA和Tra)现在也是广泛接受的多能状态的间接证据 [7]。事实上,到目前为止,还没有技术最终能验证现有 HPSC 的多能性确切存在。 在 PSC 起初的研究中,胚胎干细胞通常培养在滋养层细胞上,主要是小鼠胚胎成纤维细胞(MEF),用的是含 FCS 的培养基[8]。后来,FCS 能够被成分明确的血清
Communications【4-5】和 Cells【6】发表的三篇文章,整理了人多能干细胞(hPSC)来源的胰岛样类器官培养方案。该培养过程遵循发育原理,由 hPSC 依次分化为定型内胚层 (DE)、胰腺祖细胞 (PP)、内分泌前体 (EP), 最终诱导发育为人胰岛样类器官(human Islet-like Organoid, hILO)。 图 1. hPSC 来源细胞诱导成为胰岛样类器官的培养方案示意图【7】 细胞来源 hPSC 培养试剂配方 包被液 hPSC培养基 Day1 Day
Nature Methods-让胚胎干细胞茁壮成长,一个神奇的小分子配方介绍
在科学的海洋里,阻碍科研工作者们前进的往往不是他们天马星空的想象力,而是严苛的实验条件。 诱导多功能干细胞(iPSC)可以无限的迭代更新并分化为所有细胞类型。iPSC为新药的发现、疾病建模和细胞疗法开创了全新的思路。人源多功能干细胞(hPSCs)对体外的环境扰动及其敏感,存活率及单细胞克隆效率较低。这一问题严重制约了对hPSC的广泛研究和使用。 图片来源:siimland.com 加州理工大学的Kiichi Watanabe在先前的研究
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