- ￥900
- SHBio
- 进口
- SHC1019
- 2025年07月12日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 英文名：
SHCC
- 库存：
100
- 供应商：
赛泓瑞生物
- 细胞类型：
A549/GFP细胞
- 运输方式：
干冰/常温
- 年限：
10年
- 生长状态：
贴壁/悬浮
- 规格：
1*10^6cell/T25
| 产品名称： | A549/GFP |
|---|---|
| 商品货号： | SHC-2201 |
| 中文名称： | 人肺癌细胞带绿色荧光 |
| 规格： | T25 |
| 组织来源： | 人 |
| 形态特征： | 上皮样 |
| 生长特性： | 贴壁生长 |
| 细胞污染： | HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌检测阴性。 |
| 培养条件： | DMEM+10%FBS |
| 传代方法： | 1:2传代 |
| 冻存条件： | 无血清细胞冻存液 |
| 细胞传代步骤： | 如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 |
| 细胞复苏步骤： | 将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。 |
| 细胞冻存步骤： | 待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面T25瓶为例；1．细胞冻存时，弃去培养基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml胰酶，细胞变圆脱落后，加入2ml完全培养基终止消化，可使用血球计数板计数。2．1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮，加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀，按每1ml的数量分配到冻存管中，注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。3．将冻存管置于程序降温盒中，放入-80度冰箱，至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 |
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文献和实验炎性 IL -6 样细胞因子 Unpaired 2 和 3 (Upd2 和 Upd3)，后者能够刺激肠干细胞增殖和上皮细胞再生。此外，Upd 家族蛋白也可通过受体 Dome 激活 JAK-STAT 信号通路。后续的实验也证明了这一点：他们使用 2xSTAT::GFP 报告系统来检测 JAK-STAT 通路的活性，结果发现，在 Ecc15 感染 4 小时后，肠道上皮被破坏，大脑中 GFP 表达上调。在神经胶质标记阳性的大脑稀疏细胞群中观察到 JAK-STAT 活性。进一步的研究发现，在果蝇胶质细胞
、灵敏、快速、准确，适合各种细胞系的细胞增殖检测，尤其适用于各种细胞系的高通量筛选实验，如在药物筛选中检测加药后细胞增殖变化。 图7 EdU增殖检测方法对各种细胞系均适用，简单、灵敏、快速、准确 EdU方法无需DNA变性，完全适用于各种显微成像技术，在10X，20X，40X都能得到很好的成像效果。 图8 A549细胞系孵育2h后的细胞增殖检测（10X, 20X, 40X）
孔培养体积缩小为 384 孔和 1536 孔形式的建议体积。由于接种体积和密度可能因细胞类型和下游应用而异，因此建议针对检测方案优化条件。 方法和材料 实验可以是贴壁生长癌细胞系的肿瘤干细胞，亦可是McCoy's 5a 培养基中培养的 T-29 人结肠癌细胞、F-12K (Kaighn's Mod.) 培养基中培养的 A549 人肺癌细胞，MCF7 人乳腺癌细胞。 另外，HTB-22™ 和 DU 145 人前列腺癌细胞均在杜氏改良 Eagle 培养基 (DMEM) 中培养。所有生长培养基均含有
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