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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 英文名:
SHCC
- 库存:
100
- 供应商:
赛泓瑞生物
- 细胞类型:
SMMC7721/GFP细胞
- 运输方式:
干冰/常温
- 年限:
10年
- 生长状态:
贴壁/悬浮
- 规格:
1*10^6cell/T25
| 产品名称: | SMMC7721/GFP |
|---|---|
| 商品货号: | SHC-2205 |
| 中文名称: | 人肝癌细胞带绿色荧光 |
| 规格: | T25 |
| 组织来源: | 人 |
| 形态特征: | 上皮样 |
| 生长特性: | 贴壁生长 |
| 细胞污染: | HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌检测阴性。 |
| 培养条件: | DMEM+10%FBS |
| 传代方法: | 1:2传代 |
| 冻存条件: | 无血清细胞冻存液 |
| 细胞传代步骤: | 如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 |
| 细胞复苏步骤: | 将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。 |
| 细胞冻存步骤: | 待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面T25瓶为例;1.细胞冻存时,弃去培养基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml胰酶,细胞变圆脱落后,加入2ml完全培养基终止消化,可使用血球计数板计数。2.1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮,加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀,按每1ml的数量分配到冻存管中,注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。3.将冻存管置于程序降温盒中,放入-80度冰箱,至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 |








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文献和实验-4,rhIL-6,TNF-α和PGE-2均购自PEPRO Tech公司,MTT购自R&D Systems公司)。正常人外周血取于4名健康供者。肝癌细胞株SMMC-7721为本实验室液氮保存株。流式细胞仪为美国Becton Dickinson公司产品,透射电镜为HITACHI公司产品。 CIK细胞的体外诱导和扩增 通过血细胞分离机从健康供者采集外周血单个核细胞(MNC),用淋巴细胞
炎性 IL -6 样细胞因子 Unpaired 2 和 3 (Upd2 和 Upd3),后者能够刺激肠干细胞增殖和上皮细胞再生。此外,Upd 家族蛋白也可通过受体 Dome 激活 JAK-STAT 信号通路。后续的实验也证明了这一点:他们使用 2xSTAT::GFP 报告系统来检测 JAK-STAT 通路的活性,结果发现,在 Ecc15 感染 4 小时后,肠道上皮被破坏,大脑中 GFP 表达上调。在神经胶质标记阳性的大脑稀疏细胞群中观察到 JAK-STAT 活性。进一步的研究发现,在果蝇胶质细胞
-Pn)/4) Xm:lg 最大剂量 I:lg(最大剂量/相临剂量) P:阳性反应率之和 Pm:最大阳性反应率 Pn:最小阳性反应率 抑制率=1-加药组OD值/对照组OD值 公式中的最大最小阳性反应率就是最大最小抑制率例:用96孔板培养SMMC-7721肝癌做MTT测细胞活力,应该加多少1640培养基,多少MTT和DMSO合适?根据书上说的加200ul1640,20ulMTT,150ulDMSO加DMSO之前要尽量去掉培养液,便于DMSO溶解甲臜颗粒进行比色
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