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- SHBio
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- SHC850
- 2025年07月12日
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- 文献和实验
- 技术资料
- 英文名：
SHCC
- 库存：
100
- 供应商：
赛泓瑞生物
- 细胞类型：
DMS153细胞
- 运输方式：
干冰/常温
- 年限：
10年
- 生长状态：
贴壁/悬浮
- 规格：
1*10^6cell/T25
| 产品名称： | DMS153 |
|---|---|
| 商品货号： | SHC-2379 |
| 中文名称： | 人小细胞肺癌细胞 |
| 种属来源： | 人 |
| 组织来源： | 肺腺 |
| 细胞形态： | 上皮样 |
| 培养条件： | MEM |
| 细胞污染： | HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌检测阴性。 |
| 特征特性： | DMS153细胞株由O.S.Pettengill和G.D.Sorenson分离于一名患有小细胞肺癌44岁白人男性的肝脏组织，于1976年建系。DMS153细能分泌降血钙素，人降钙素基因相关肽，及促肾上腺皮质激素等。该细胞在裸鼠及无胸腺小鼠中成瘤 |
| 细胞传代步骤： | 如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 |
| 细胞复苏步骤： | 将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。 |
| 细胞冻存步骤： | 待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面T25瓶为例；1．细胞冻存时，弃去培养基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml胰酶，细胞变圆脱落后，加入2ml完全培养基终止消化，可使用血球计数板计数。 2．1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮，加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀，按每1ml的数量分配到冻存管中，注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。3．将冻存管置于程序降温盒中，放入-80度冰箱，至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 |
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文献和实验方法。 应用这种技术可以检测靶 DNA 中 G 残基的优先甲基化，对尔后的蛋白质结合作用究竟会有什么效应，从而更加详细的揭示出 DNA 与蛋白质相互作用的模式。 2. 实验步骤： 用 DMS 处理靶 DNA 使之局部甲基化（平均每条 DNA 只发生一个 G 碱基甲基化作用）同细胞蛋白质提取物一起进行温育，促进使 DNA 与蛋白质的结合 进行凝胶电泳形成两种靶 DNA 条带： （1）其一没有同蛋白质结合的 DNA 正常电泳条带 （2）其二同特异蛋白质结合而呈现滞后的 DNA 电泳条带 将这两种 DNA 电泳
说来，不论稀释与否，将细胞从一个培养瓶转移或移植到另一个培养瓶即称为传代或传代培养。可以理解，在任何时候，细胞从一个瓶子接种到另一个瓶子时总会丢失一部分，因此，在客观上细胞必定有所稀释。传代代数这一概念常常容易同「增殖代数」相混淆。细胞「一代」一词仅指从细胞接种到分离再培养时的一段时间。如某一细胞系为第 153 代，即指该细胞系已传代 153 次。它与细胞「增殖代数」（细胞世代或倍增）不同，在细胞一代中，细胞约能倍增 3～6 次。由此可见，细胞代数与增殖代数相关，确切的代数则依赖于细胞株和培养条件的不同而异
对甲基化的G残基作特异性的化学切割这一原理设计的另一种研究蛋白质同DNA相互作用的实验方法。 应用这种技术可以检测靶DNA中G残基的优先甲基化，对尔后的蛋白质结合作用究竟会有什么效应，从而更加详细的揭示出DNA与蛋白质相互作用的模式。 2. 实验步骤： 用DMS处理靶DNA使之局部甲基化（平均每条DNA只发生一个G碱基甲基化作用）同细胞蛋白质提取物一起进行温育，促进使DNA与蛋白质的结合 进行凝胶电泳形成两种靶DNA条带： （1）其一没有同蛋白质结合的DNA正常电泳条带
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