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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 英文名:
SHCC
- 库存:
100
- 供应商:
赛泓瑞生物
- 细胞类型:
B16-F10-RED细胞
- 运输方式:
干冰/常温
- 年限:
10年
- 生长状态:
贴壁/悬浮
- 规格:
1*10^6cell/T25
| 产品名称: | B16-F10-RED |
|---|---|
| 商品货号: | SHC-2852 |
| 中文名称: | 小鼠皮肤黑色素瘤细胞-红色标记 |
| 形态特征: | 上皮细胞样 |
| 生长特性: | 贴壁 |
| 培养条件: | RPMI-1640+10% FBS+1% P/S |
| 细胞冻存步骤: | 待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面T25瓶为例; 1.细胞冻存时,弃去培养基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml胰酶,细胞变圆脱落后,加入2ml完全培养基终止消化,可使用血球计数板计数。 2.1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮,加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀,按每1ml的数量分配到冻存管中,注意冻存管做好标识。明舟生物按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。3.将冻存管置于程序降温盒中,放入-80度冰箱,至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 |
| 复苏细胞步骤: | 将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。 |
| 细胞传代步骤: | 如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 |








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文献和实验红细胞膜 erythrocyte membrance,red cellmembrance
人的红细胞在细胞膜外无其他膜状结构,由于通过溶血作用很容易得到细胞膜的空壳( ghost),所以常用来作为活体膜的模型而进行研究。其主成分为蛋白质(约 49%,重量比)和脂类(约 44%),还含有糖。脂类由磷脂(约 73%、重量比)、胆固醇(约 22%)和糖脂(约 5%)组成。磷脂由卵磷脂、磷脂酰乙醇胺、磷脂酰丝氨酸和鞘磷脂组成。这些磷脂并非在膜内均匀分布,在表层多含有具胆碱基的中性磷质,内层含有具负电荷的磷酯酰丝氨酸和可变结构的磷脂酰乙醇胺。蛋白的组成如表所示,用低张液处理细胞
模型建立方法:将体外原代培养处于对数生长期的B16-F10黑色素瘤细胞,胰酶消化,用RPMI-1640培养液洗2遍,调至1×106/ml悬浮于RPMI-1640培养液中(台盼兰染色检测活性95%以上)。经眼球后静脉丛每鼠注射0.1ml含0.1ml 1×105个B16-F10黑色素瘤细胞悬液。模型特点及功用:可用于研究黑素瘤肺转移的治疗研究。模型建立和使用注意事项:1、本课题组选用两种肿瘤细胞株建立了实验性肺转移及自发肺转移模型,发现:眼球后静脉注入2.5×104以上B16黑色素瘤活细胞/鼠
Nature 三连发:竞争消除,有你没我,论癌细胞的「霸道行为」
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