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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 英文名:
SHCC
- 库存:
100
- 供应商:
赛泓瑞生物
- 细胞类型:
A549/mCherry细胞
- 运输方式:
干冰/常温
- 年限:
10年
- 生长状态:
贴壁/悬浮
- 规格:
1*10^6cell/T25
| 产品名称: | A549/mCherry |
|---|---|
| 商品货号: | SHC-3249 |
| 中文名称: | 人非小细胞肺癌细胞mCherry荧光稳转株 |
| 细胞污染: | HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌检测阴性。 |
| 培养条件: | F12 NUTRIENT MIX- KAIGHNS MOD(Invitrogen,货号21127022)+ 10%FBS |
| 细胞冻存步骤: | 待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面T25瓶为例; 1.细胞冻存时,弃去培养基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml胰酶,细胞变圆脱落后,加入2ml完全培养基终止消化,可使用血球计数板计数。 2.1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮,加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀,按每1ml的数量分配到冻存管中,注意冻存管做好标识。明舟生物按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。3.将冻存管置于程序降温盒中,放入-80度冰箱,至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 |
| 复苏细胞步骤: | 将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。 |
| 细胞传代步骤: | 如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 |








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文献和实验光显微镜下几乎无信号的低丰度表达基因 Sox2、Tet1、Sall4、Tbx3 等(图 2b)。 图 2:(a)示意图显示 P2A-mcherry 和 SPH-OminiCMV-Ents 两种标记基因的策略。 (b)在 mESC 细胞中用 SPH-OminiCMV-Ents 策略(红色三角形)和 P2A- mCherry 策略(绿色菱形)标记不同的基因,统计其 mCherry 荧光信号强度以及用 qPCR 分析这些基因的表达水平(紫色圆圈,紫色 y 轴)。 为探讨增加 sgRNA 拷贝数是否会
学轨迹)仅使用 scanR 软件就可完成。 实验设置 用 50 ng/ml 的骨形态发生蛋白 4 (BMP4) 处理表达 FUCCI(CA) 探针的 H1 人类胚胎干细胞 (hESC),以促进其向中内胚层谱系分化。 然后使用 10 X UPLANSAPO 物镜的 scanR 显微镜在 mCherry 和 YFP 通道中每隔 15 分钟对这些 H1 细胞进行一次成像,一共持续 6 天。 图 3. 在成像之初,先用 BMP4 刺激已经表达 FUCCI(CA) 探针的 hESC H1 细胞
及中红外仍有较强光谱强度3)能量较强更易到达物镜后孔径此类产品:XBO75W,100W氙灯;寿命一般400小时,1200小时3、金属卤素灯目前各大显微镜品牌广泛使用的一种光源,它和汞灯的激发光谱很像,但它和显微镜以光纤相连,能散热,寿命更长。光纤从光源连到显微镜上,可以大量减少光产生的热能。金属卤素灯对活细胞成像的另一个优势是内置强度设计装置,可以容易调节激发光。也可以通过选择直接连接获得更好的激发效果。例如:EXCELITAS公司X-cite光源,120W,适用于各大厂家高端荧光显微镜;寿命2000
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