PerCP抗体标记试剂盒 标记25ug抗体

Buccutite PerCP抗体标记试剂盒 标记25ug抗体

简要概述

 

产品优势  

高效偶联：采用优化的偶联方法，确保染料和抗体的高效结合，减少未标记抗体和过度标记的情况

产品介绍

PerCP（多甲藻黄素-叶绿素蛋白复合物）是从甲藻中分离获得的一种荧光标记物,主要用于标记抗体 。该复合物具有极高的消光系数、高量子产率和大斯托克斯位移特性，可被488 nm氩离子激光有效激发，最大发射峰位于677 nm。AAT Bioquest推出的Buccutite™快速标记试剂盒，能够高效实现PerCP与抗体及链霉亲和素等蛋白试剂的偶联。

Buccutite™ PerCP偶联试剂盒提供了一种稳定便捷的抗体-PerCP偶联方案。试剂盒包含预活化PerCP和反应缓冲液，仅需两步简单混合即可完成标记，无需额外纯化步骤。所得偶联抗体可广泛应用于流式细胞术、Western blot、ELISA及免疫组化（IHC）等实验。每个试剂盒可完成2次标记反应，每次最多可标记25 μg抗体。针对不同抗体需通过实验确定最佳标记比例。

相较于传统SMCC偶联方法，本试剂盒具有显著优势：1. 采用预活化PerCP，可直接与蛋白氨基高效偶联，获得更高产率； 2.靶向蛋白中含量丰富的氨基基团，而SMCC方法需还原抗体再生巯基才能偶联； 3.操作流程大幅简化，省去了传统方法繁琐的活化步骤；Buccutite PerCP抗体标记试剂盒是美国AAT Bioquest 研发的产品。

 

注：本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其它非科研用途！

百萤生物公司简介

美国AAT Bioquest公司长年以来与百萤生物互补优势，为国内外广大用户提供光谱检测，底物显色，荧光发光技术等全系列解决方案。近年来，百萤生物已与多家药企、CRO公司、众多高校及科研单位建立了长期稳定的合作关系；我们的服务宗旨：为广大科研用户提供更好的服务.
1.更高品质保障的AAT Bioquest产品（AAT Bioquest作为专业的光谱学检测产品生产商，能提供 高性价比的产品）。
2.更低的价格和高性价比的选择，我们将一如既往的为客户和代理商提供全面的售后保障。作为全国代理，百萤生物给您优惠的折扣和专业的技术支持。

产品说明书

实验方案

操作步骤

1.运行Antibody-Buccutite MTA反应

1.1将抗体溶液直接加入到Buccutite MTA（组分B）的小瓶中，并通过反复移液几次将其充分混合或将小瓶涡旋几秒钟。

1.2将抗体-Buccutite MTA反应混合物在室温下保持30-60分钟。 注意：如果需要，抗体-Buccutite MTA反应混合物可以旋转或摇动更长时间。

 

2.准备旋转柱用于抗体-Buccutite MTA纯化

2.1将提供的旋转柱（组分D）反转几次以重新悬浮沉降的凝胶并除去任何气泡。

2.2取下尖端并将色谱柱放入洗涤管（2 mL，未提供）中。取下盖子，让多余的填料缓冲液通过重力排放到凝胶床的顶部。如果色谱柱没有开始流动，请将盖子推回色谱柱并再次将其取出以开始流动。丢弃排出的缓冲液，然后将色谱柱放回洗涤管中。但是，如果将色谱柱放入12 x 75 mm试管（未提供）中，请立即离心。

2.3在摇动式离心机中以1,000×g离心2分钟（参见“离心注意事项”部分）以除去包装缓冲液。丢弃缓冲液。

2.4向柱中加入1-2 mL 1X PBS（pH 7.2-7.4）。每次施用PBS后，让缓冲液通过重力排出，或将柱离心2分钟以除去缓冲液。丢弃收集管中的缓冲液。重复此过程3-4次。

2.5在摇动式离心机中以1,000×g离心2分钟（参见“离心注意事项”部分）以除去包装缓冲液。丢弃缓冲液。

 

3.纯化抗体-Buccutite MTA溶液

3.1将柱（来自步骤准备旋转柱用于抗体-Buccutite MTA纯化）置于干净的收集管（1.5mL，未提供）中。 小心地将样品（~105μL，来自Step Antibody-Buccutite MTA反应）直接加载到色谱柱中心。

3.2加载样品后，加入5μL1XPBS（pH 7.2-7.4），使总体积为110μL。 将柱以1,000xg离心5-6分钟，并收集含有所需抗体-Buccutite MTA溶液的溶液。

 

4.制备抗体-PE缀合物

4.1通过向Buccutite FOL活化的PE（组分A）的小瓶中加入50μLddH2O制备Buccutite FOL活化的PE溶液，通过反复移液几次充分混合或将小瓶涡旋几秒钟。

4.2将整瓶Buccutite FOL活化的PE溶液混合到纯化的抗体-Buccutite MTA溶液（来自步骤纯化抗体-Buccutite MTA溶液）中，充分混合并在室温下旋转混合物1小时。

4.3抗体-PE结合物现在可以使用了。 注意：立即使用时，抗体-PE结合物需要用您选择的缓冲液稀释。 注意：对于长期储存，需要浓缩或冷冻干燥抗体-PE结合物溶液。

 

5.抗体-PE共轭物的储存

抗体缀合物应在载体抗体（例如0.1％牛血清白蛋白）存在下以> 0.5mg / mL储存。 

 

6.离心注意事项

6.1旋转柱（组分D）可以装入2mL微量离心管或12×75mm试管中，用于在离心过程中收集样品。 使用2 mL微管和色谱柱进行初始色谱柱平衡步骤。

6.2能够产生1,000 x g的最小力的摆动式离心机适用于Bio-Spin柱。 在特定转速下产生的重力是微量离心机转子半径的函数。 有关从每分钟转数（RPM）到离心力或g力的转换信息，请参阅摆动式离心机说明手册。 或者，使用以下等式计算达到1,000 x g重力所需的RPM速度。

6.3RCF（xg）=（1.12 x 10-5）×（RPM）×2×r（RCF是相对离心力，r是从转子中心到Bio-Spin柱中间测量的以厘米为单位的半径 ，RPM是转子的速度）。