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细胞增殖

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  • 上海
  • 2025年11月11日
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      Hanbio汉恒生物

    • 服务名称

      整体实验服务

    简介

     

           细胞增殖是生物体的重要生命特征,细胞以分裂的方式进行增殖。细胞增殖是生物体生长、发育、繁殖、遗传的基础,是细胞最基本的生理活动。方法有流式PI检测、Ki67法等。汉恒生物为您提供全方位的细胞增殖实验服务。

     

    Cellcycle 流式细胞检测实验

     

           通常利用通常用PI染细胞核,PI在一定波长的光下发出荧光,其强度与DNA含量成正比。绿色荧光蛋白、红色荧光蛋白及其它发光基团也可作为标记物,分选细胞。

     

    实验步骤:

    (1)将细胞以1×106接种于60mm培养板,80%汇合后转染。

    (2)24小时后在新鲜培养液中加入适当的抗生素(真核表达载体上的抗性标记)进行培养(该步可选)。

    (3)48-72小时后用胰酶消化收集细胞,PBS洗两遍,弃上清,加入1ml 70%预冷乙醇中,吹打均匀,4℃固定12小时以上。

    (4)PBS洗涤去乙醇,1000rpm, 5min,洗两遍。

    (5)0.5 mlPBS重悬细胞,加入PI和 RNaseA至终浓度50µg/ml,37℃ 温浴30 min。

    (6)用流式细胞仪测定周期。

    PI:碘化丙啶,以PBS配成1mg/ml,4℃保存。

    RNaseA:10mg/ml

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