大肠杆菌&大肠菌群显色培养基/BR

酵母双杂交实验项目操作及心得体会

。 6.阳性克隆质粒的提取和保存 提取阳性克隆酵母菌的质粒，转化至大肠杆菌E.coli DH5α中，因pGADT7质粒含Amp+ 抗性基因，在Amp+抗性平板上筛选阳性克隆AD- X(X代表阳性克隆中携带的龙须菜cDNA，即为初步筛选得到的相互作用蛋白质的cDNA)。 7.阳性克隆的再验证 pGBKT7 –CaM 与AD–X质粒共转化酵母菌Y2HGold，重新验证相互作用消除假阳性。按表1组合，转化后的酵母菌涂布于SD–Trp/-Leu

燕麦转基因及其在提高渗透胁迫耐受中的应用

7.0 ) ，1~5 mmol/L  X-Gluc(X- Gluc 可以用二甲基亚砜溶解，Sigma)。3. 注释 注 1 : 种子还可用 70% 乙醇消毒 2 min；用无菌蒸馏水洗一次，然后在 50%  Clorox 漂白剂中浸泡 15 min，期间以 0.5 g 持续振荡。 注 2 : 用灭菌的滤纸汲取种子上的水分（3 mm；VWR) ，再将消毒后的种子放置于 MS1 培养基上。 注 3 : 芽尖包含有顶端分生组织、2~3 个叶原基和叶基。芽尖是靠近叶基的膨大部分。 注 4 : 每一品种放置

分子克隆的常用载体

产物-β-半乳糖苷酶的氨基端片段，用pUC质粒转化LacZ基因有突变的大肠杆菌株（M15）时，因为由质粒表达的α－肽补充了大肠杆菌却失的α－肽，所以恢复了分解半乳糖的能力。在加入IPTG和X-gal的培养基上，长出蓝色克隆。如果在多克隆位点内插入外源DNA，由于它破坏了α－肽的表达，因而在加入IPTG和X－gal的培养基，不能长出蓝色克隆，这就是所谓的蓝白筛选。二、单链丝状噬菌体和噬粒（一）大肠杆菌丝状噬菌体包括M13噬菌体f噬菌体等，其基因组 均是单链闭环DNA分子，其中M13mp系列克隆载体是对野生型M13