农杆菌侵染拟南芥花序的转化

农杆菌侵染拟南芥花序的转化方法

制备转化用的农杆菌菌液 1．灭菌 试管 400毫升细长烧杯2瓶，离心瓶4-6个（250ml）。 2．试剂：YEP 1200ml（每瓶300ml 共4瓶）+Kan 1;1000，Rif1:500。 1/2MS+2%蔗糖（灭菌115度20分钟），Silwet在-20℃贮存。 3．步骤： 共转化农杆菌：于中午12点接菌于有YEP培养液的试管中10ul：10ml接种。28℃，3000rpm摇过夜，约30小时，次日下午6点将已摇活的菌按（1：400）及750

植物基因转化常用方法

E.coli中筛选重组分子，然后将重组质粒转化到农杆菌中，质粒与Ti质粒上的同源序列发生同源重组，将外源基因整合到Ti质粒上，用于侵染植物细胞。T-DNA 重组分子整合到植物细胞染色体DNA 上，Kmr筛选转化细胞。 3 . 植物细胞转化的双元系统 目前T-DNA 转化植物细胞的标准方法是双元系统，即穿梭质粒。插入外源基因的重组穿梭质粒直接转化含有Ti质粒的根瘤农杆菌，经筛选后直接感染植物细胞。与共整合系统所不同的是，含外源基因的质粒可在农杆菌内自主复制并保留下来。农杆菌侵染植物细胞后，植物的创伤

第一视角带你了解单细胞测序技术对植物领域模式生物的剖析

方法，将上述 16 个细胞簇鉴定为小穗、分生组织、叶和花序轴四大细胞类群。为了获得不同类群的准确功能偏好，烈冰团队整合了包括 TAIR、IRGSP 等多个植物学注释数据库，构建了水稻和拟南芥的本地 GO、pathway 数据库，并以此进行了全面准确的基因富集分析。结果显示：与“细胞分裂”相关的基因在分生组织细胞中富集、与“花发育”相关的基因在小穗组织细胞中富集，这些结果表明了水稻花序早期发育中存在高度的细胞异质性。 （图 1c） （图 1e） （2）花细胞亚群的发育轨迹