AG 11 A8, 50-100, 500 g

人可溶性白细胞抗原G(sHLA-G)酶联免疫分析（ELISA）

2-8℃ 的温度。加入一定量的 PBS （ PH7.4 ），用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心 20 分钟左右（ 2000-3000 转 / 分）。仔细收集上清。分装后一份待检测，其余冷冻备用。 操作步骤 1.         标准品的稀释与加样：在酶标包被板上设标准品孔 10 孔，在第一、第二孔中分别加标准品 100μl ，然后在第一、第二孔中加标准品稀释液 50μl ，混匀；然后从第一孔、第二孔中各取 100μl 分别加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分别加

11条PCR引物设计原则

长度（primer length）常用的是18-27bp，但不应大于38bp，因为过长会导致其延伸温度大于74℃，不适于Taq DNA 聚合酶进行反应。 　　3、引物GC含量在40%~60%之间，Tm值最好接近72℃。 　　GC含量（composition）过高或过低都不利于引发反应。上下游引物的GC含量不能相差太大。另外，上下游引物的Tm值（melting temperature）是寡核苷酸的解链温度，即在一定盐浓度条件下，50%寡核苷酸双链解链的温度。有效

SYBR G的一些心得

上来讲，虽然那张融解曲线图虽然很美，但是未免有凑结果的感觉。 言归正传，引物浓度ABgene是推荐70nM，我现在一般50-100nM都有做。 然后说temp的浓度，temp的浓度显然不是越浓越好的，我曾经做过的一个实验是要检测基因在genomic DNA上的copy数，直接加了20ngDNA来做，做出来结果很差。后来就把DNA做了稀释梯度来做，发现奇了怪了，怎么越稀释，Ct反而越靠前了。想了很久，想明白了如果模板太多，在复性的时候铁定模板先吃到SYBR，等差不多产物快复性了，SYBR