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文献和实验.3.5)。截切-优化-延长的方法(图 16.1 A ) 优越于其他方法之处在于它的简单性,因为它不依赖于结构信息,也不需要知道同源蛋白。然而,如果目前的数据能够提供这样的信息,截切设计的过程将会更直接,在某些情况下甚至更有效。最后,本章所描述的方法还有一个优点,那就是用该方法得到的热稳定突变体能够在生理温度下筛选而得。 2. 材料 2.1 质粒构建、DNA 混编和随机突变 ( 1 ) Pr_sfi_pelB_DG_blawt 的正向
Analys of Genomic DNA by Southern Hybridization
(total volume 18 µl). Ⅱ. Agarose gel electrophoresis (6-16 hours) 1.Pour a 0.8% agarose gel. (Mix 1.6 grams ultra pure agarose in 200 ml 1X TAE (0.8%). Add 2 µl 1% ethidium bromide solution . Pour into long (20 cm) gel rig) 2.Prepare DNA size
Analys of Genomic DNA by Southe
DNA-loading buffer (total volume 18 µl). (6-16 hours) 1.Pour a 0.8% agarose gel. (Mix 1.6 grams ultra pure agarose in 200 ml 1X TAE (0.8%). Add 2 µl 1% ethidium bromide solution . Pour into long (20 cm) gel rig) 2.Prepare DNA size markers. (2µl
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