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- Corning(康宁)
- America
- 430182-50包/箱
- 2025年07月13日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
见包装
- 保质期：
见包装
- 英文名：
CYLINDER,100ML,1ML GRAD,S,IND, 量筒 100ml 1ml刻度 灭菌 单个包装（独立包装或单独包装）
- 库存：
999
- 供应商：
博奥派克
- 规格：
50包/箱
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文献和实验3. 将10* PEI 剧烈振荡后加入到360ul 1* HBS( PH 7.4)灭菌管混匀 4. 将混匀的PEI加入到装有DNA的灭菌管中，用枪头吹吸15次混匀，室温30分钟 5．吸去待转染细胞的培养液换成5ml无血清DMEM培养，待DNA静置时间到达，将DNA混合液逐滴均匀加入到 细胞培养 皿中，用手轻摇混匀平皿 6．6-8小时后，将无血清DMEM移去，换成13ml 10％血清的正常DMEM于37培养包装病毒 7．在随后的三天，每天收集细胞上清于一个灭菌
一、技术背景： Adeasy 系统利用了腺病毒具有的高感染能力，可高度浓缩等优点，并破坏了腺病毒基因组中的早期基因E1，使之成为较为安全、高效的病毒载体。利用带有E1 基因的293 细胞作为包装细胞，通过倍比扩增，富集病毒颗粒，并通过CsCl 梯度离心，透析进行分离纯化。对绝大多数的细胞株可以达到近乎100％的感染效率。但需要指出的是Adeasy 同样具有所有病毒载体或转染试剂都不可避免的细胞毒性问题。 二、所需试剂：1. 293 细胞； 2. 重组好的腺
以六孔板中的1孔为例，每个样品需要1×106个293T细胞。 1、取1.5ml灭菌EP管，加入1.5μg包装混合质粒和0.5μg表达质粒以及250μl的无血清培养基。轻柔混匀，室温孵育5min。 2、取1.5ml灭菌EP管，取9μl 脂质体2000l溶于250μl无血清培养基中。轻柔混匀，室温孵育5min。 3、将DNA溶液和脂质体溶液轻柔混匀。室温孵育20min 4、用胰酶消化并记数293T细胞。用含血清的培养基重悬细胞。 5、在六孔板中每孔
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