中性树胶封片剂

免疫荧光双标技术中操作要点和注意事项

一、免疫荧光技术中标本制作的基本程序近似于酶免疫组化，不同点如下： 1、免疫荧光不需要使用双氧水处理，封闭和一抗孵育与其相同。 2、免疫荧光的二抗使用不同荧光标记的二抗孵育，孵育时间根据抗体的工作浓度确定。 3、二抗孵育之后充分洗片后即可贴片、封片和观察。 4、免疫荧光在封片时常使用专用封片剂或甘油：0.01M PBS （1：1）。条件许可，建议购买抗淬灭的封片液，使标本可以保存更久。 5、荧光抗体的孵育以及后续处理需要避光。 6、荧光抗体染色假阳性可能会多，需要分别设定阳性和阴性

细胞凋亡检测：形态学特征的检测方法

苯（ 1 ： 1 ）稍洗。8、 二甲苯透明 2 ～ 3 次。9、 中性树胶封固。 （三） Giemsa 染色 1、收集细胞（ 1 × 106 ）， PBS 洗 1 次。2、用细胞涂片离心机制成细胞涂片。3、甲醇固定 3 ～ 5min 。4、入 Giemsa 稀释染色液 15 ～ 30min ，冬天在 37 ℃温箱中染色。5、用磷酸盐缓冲液分色，以镜下控制为准。6、涂片晾干后用中性树胶封片。（四）瑞氏（ Wright ）染色 1、收集细胞（ 1 × 106 ）， PBS 洗 1 次。2、用细胞涂片离心机制成细胞

TSA多重免疫荧光染色的实验步骤

DAPI工作液，室温保湿孵育5min。2）1×TBST buffer浸洗玻片，室温浸片3min。3）用灭菌水洗片2min。4）待玻片微干，用移液器在玻片上滴加超强抗淬灭封片剂，浸没样本区域。5）加盖玻片，指甲油封片。6）阅片。本试剂盒仅供科研使用。