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深圳子科生物
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10ml
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文献和实验4.溴酚蓝指示剂点样缓冲液 5.1mg/ml溴化乙锭溶液 6.电泳缓冲液(TAE) 7.0.7% 琼脂糖凝胶(用TAE电泳缓冲液配制) (三)器材 1.5ml Eppendorf管 200ml吸头 (四)仪器 微量移液器 离心机 恒温水浴锅 电泳仪 水平电泳槽 透射紫外观察仪 实验步骤 1. 取一个灭菌的Eppendorf管,依次加入下列试剂: 双蒸馏无菌
液(pH8.3) 取三羟甲基氨基甲烷6g、甘氨酸28.8g,加水溶解并稀释至1000ml,置冰箱中保存,用前稀释10倍。 (4)溴酚蓝指示液 取溴酚蓝0.1g,加0.05mol/L氢氧化钠溶液3.0ml与90%乙醇5ml,微热使溶解,加20%乙醇制成250ml。 (5)染色液 取0.25%(W/V)考马斯亮蓝G溶液2.5ml,加12.5%(W/V)三氯醋酸溶液至10ml。 (6)稀染色液 取上述染色液2ml,加12.5%(W/V)三氯醋酸溶液至10ml。 (7)脱色液 7%醋
酶组织化学酶显示方法 1.偶联偶氮色素法 此法又称偶氮色素法(couplingazo dyemethod),是指用某种人工合成底物在酶作用下产生分解产物,分解产物与重氮盐结合,引起偶联偶氮反应,形成不溶性偶氮色素,以此对酶定位。常用的底物是萘酚系列化合物,如l―萘酚、2―萘酚、6―溴―2―萘酚、萘酚AS、萘酚AS衍生物等。由于重氮盐的种类不同,偶氮色素的颜色也不同,可显示出紫色、蓝色、红色、褐色、棕色和黑色等各种颜色。 重氮盐有不同程度的抑制酶活性作用,因此必须选择抑制作用最弱
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