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- 2025年12月19日
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上海谷研
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-20℃
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详见说明书
1.根据要保存的各样本的体积，计算出所需RNAwait用量。RNAwait的用量应当是组织体积的10倍（如100mg组织约用1ml RNAwait）；离心收集2×106细胞RNAwait的用量是1ml。
2. 将RNAwait按需要量分装入自备保存管中；
3. 快速将较大的组织切成厚度<0.5 cm的任意片状，立即完全浸入RNAwait中。组织的厚度一定要<0.5 cm。组织过厚则RNAwait不能有效渗入，组织中间部位的RNA不能受到保护。较小的组织（如大鼠的肾脏、脾脏，小鼠的大部分器官）取下后可以直接浸入RNAwait。
4. 保存时先将样本浸入RNAwait后置4℃冰箱过夜（4℃过夜是必需的，这样可使RNAwait完全渗入到组织中），然后转移到-20℃冰箱（RNAwait在-20℃时仍为液态，有结晶析出，是正常情况）；或者在4℃冰箱过夜后，从RNAwait中取出组织块，转移到-80℃冰箱。在RNAwait中保存的标本，反复冻融至室温20次不影响RNA的质量。
产品名称：BpiI (BbsI) (10 U/µL)
Enzyme:BpiI(BbsI)
保存温度:-20℃
货期:2-3天
CompatibleBuffer:10xBufferG
OptimalReactionTemperature:37°C
SensitivetoHeatInactivation::Yes
MethylationSensitivity:NotCpGmethylation-sensitive, Notdammethylation-sensitive, Notdcmmethylation-sensitive
BpiI(BbsI)限制性内切酶能够识别GAAGAC(2/6)^位点，在Tango缓冲体系（+DTT）中于37°C达到最佳切割效果（同裂酶：BbsI、BpuAI、BstV2I）。ThermoScientific传统限制性内切酶产品包含了大量的高品质内切酶，这些酶经过优化，可在五种缓冲液体系中的其中一种中进行酶切，此外，还随酶提供通用Tango缓冲液，以便进行双酶切。所有内切酶在推荐的缓冲液和反应条件下都具有100%的活性。为保证内切酶的性能稳定，ThermoScientific限制性内切酶反应缓冲液还预先混入了BSA，以增强酶的稳定性并结合可能存在于DNA制备产物中的污染物。 特点： •优异的质量—严格的质量控制和业内领先的生产流程 •使用颜色标记的五大便捷缓冲系统 •包含适于双酶切的通用型Tango缓冲液 •反应缓冲液中预先混入BSA •种类齐全，特异性限制性内切酶的广泛选择 应用 •分子克隆 •限制性酶切位点作图（Restrictionsitemapping） •基因分型 •Southernblotting •限制性片段长度多态性（RFLP） •SNP 注意事项：Bpil能够在其识别位点的下游进行切割，并生成所需的5'端4碱基粘性末端。这一特性适合应用于PCR产物的直接克隆操作。关于甲基化敏感度，请参见产品说明。
注意事项：
● 溶液PE 第一次使用前请按瓶上标签加入4 倍体积的无水乙醇，即15 ml 溶液PE 中加入60 ml 无水乙醇，20 ml 溶液PE 中加入80 ml 无水乙醇，使用后立即盖紧盖子。
● 本产品对电泳使用的Agarose 种类没有严格限制，可以使用普通Agarose 。为了保证回收DNA 的质量和DNA 回收效率，希望使用高纯度的Agarose ，但没有必要一定要使用低熔点的Agarose 等。
● 电泳时请使用新鲜配制的TAE 电泳缓冲液，以免影响电泳及回收效果。
● 请适当延长电泳时间，在条带分离清晰后进行切胶回收，以免回收到多余杂带。
● 为提高DNA 回收收率，切胶时应尽量除去多余的胶块。
● 本试剂盒纯化柱的DNA 吸附能力强。但如果DNA 浓度小，或DNA 初始量少，回收率将会偏低。
● 溶液Eluent（10 mM Tris-HCl, pH 8.5）中不含EDTA，其收集的DNA 片段可直接用于各种酶促反应等，不会影响后续试验。
● 为了保证回收效率，请不要使用未调整pH 值的超纯水洗脱目的片段。
● 请严格按照操作步骤操作。
使用方法：
一：用新鲜组织样品
1. 估计完全浸没样品所需要本产品的体积（1g组织需10mL）。
2. 标记收集管并加入估计所需量的本产品。
3. 以zui快速度将样品剪切成厚度小于0.5cm的碎块。
注: 鼠肝、肾和脾等小器官样品和没有蜡质保护层的植物样品可不需剪切而直接放入本产品中保存，有蜡质保护层的植物样品需要先将蜡表皮破坏。
4. 将组织碎块完全浸没于收集管的本产品中。
5. 将收集管存放于温度适当的地方，存放时间不能超过该温度下的zui长存放时间，如果要存放在-20℃或-80℃，需先将样品在 4℃放置过夜后再转移到zui后的温度。注：将样品转移到-20℃或-80℃前，需要倒弃保护液。常见存放温度与其zui长存放时间关系为如下：
6. 从存放处取出样品 (-20℃或-80℃保存的样品需先在室温下融化)，用消过毒的镊子将组织碎块从保护液中取出。
7. 立即开始RNA 提取或进行其他处理 (如将样品分割成更小的碎块再重新保存等)。注:样品可以反复冻融二十次而其 RNA 质量不会受到影响。
以下是BpiI (BbsI) (10 U/µL)的相关产品：
XRCC1 Polyclonal Antibody小鼠肝癌英文: XRCC1 Polyclonal Antibody规格：T25
SDHB Polyclonal Antibody大鼠脑星形胶质细胞英文: SDHB Polyclonal Antibody细胞数量：1*10^6
CD31 Monoclonal Antibody人正常乳腺细胞英文: CD31 Monoclonal Antibody规格：T25
SOCS3 Polyclonal Antibody大鼠脑I型星形胶质细胞宿主: Rabbit细胞数量：1*10^6
ZNF307 Polyclonal Antibody大鼠脑间质细胞英文: ZNF307 Polyclonal Antibody细胞数量：1*10^6
PROM1 Monoclonal Antibody人甲状腺乳头状细胞宿主: Mouse规格：T25
STAT3 Polyclonal Antibody人胶质瘤细胞英文: STAT3 Polyclonal Antibody规格：T25
TNFRSF10B Polyclonal Antibody人甲状腺癌乳头状细胞英文: TNFRSF10B Polyclonal Antibody规格：T25
ATIC Monoclonal Antibody大鼠心肌成纤维细胞英文: ATIC Monoclonal Antibody细胞数量：1*10^6
SIGLEC5 Polyclonal Antibody人急性淋巴细胞白血病T淋巴细胞英文: SIGLEC5 Polyclonal Antibody细胞数量：1*10^6
FGFR1OP Polyclonal Antibody人胚成纤维细胞英文: FGFR1OP Polyclonal Antibody细胞数量：1*10^6
KCNK13 Polyclonal Antibody人子宫颈内膜细胞英文: KCNK13 Polyclonal Antibody细胞数量：1*10^6
DSG2 Polyclonal Antibody人非小细胞肺腺癌细胞英文: DSG2 Polyclonal Antibody细胞数量：1*10^6
HIST1H2AH Polyclonal Antibody人脉络从上皮细胞英文: HIST1H2AH Polyclonal Antibody细胞数量：1*10^6
NOX5 Polyclonal Antibody小鼠白血病细胞英文: NOX5 Polyclonal Antibody细胞数量：1*10^6
PAGE2 Polyclonal Antibody人视网膜色素上皮细胞英文: PAGE2 Polyclonal Antibody细胞数量：1*10^6
BpiI (BbsI) (10 U/µL)人免疫球蛋白Melisa检测试剂盒
英文名称:Human IgM ELISA KIT
反应性:Human
样品类型:Serum, plasma, Cell culture supernatant
灵敏度:0.15 ng/ml
检测目标:IgM
应用:Sandwich ELISA
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文献和实验手把手教你利用 CRISPR-Cas9 系统精准敲除靶标基因
puromycin 抗性筛选标记。图 3 PX458M 图谱图 4 PX459M 图谱图 5 EZ-GuideXH 图谱PX458M 和 PX459M 载体是从张峰实验室 PX458 and PX459 载体改造过来的。主要是引入了第二个向导性 RNA 插入的多克隆位点。EZ-GuideXH 来源于 EZ-T 克隆载体。四、Guide RNA 的插入根据张峰实验的实验操作方法， guide RNA 插入方法很简单。如图 6 所示，可以用 BbsI 消化 PX458 载体, Guide RNA 是通过引物退火方法
transcription. Nat Biotechnol29(2):149–153. doi: 10.1038/nbt.1775 9. Miller JC, Tan S, Qiao G, Barlow KA, Wang J,Xia DF, Meng X, Paschon DE, Leung E,Hinkley SJ, Dulay GP, Hua KL, Ankoudinova I, Cost GJ, Urnov FD, Zhang HS, Holmes MC, Zhang L, Gregory PD
CRISPR-Cas9 全程实操教程：从 gRNA 设计到挑单克隆全程指导
2：5'- aaac CACGAACTGGTACTTGAACGc。标红部分与经 BsmBI 酶切后的载体互补配对。BsmBI 又名 BbsI。oligoDNA 序列的第一个碱基必须是 G，如选取的 Guide 序列的第一个碱基不是 G，需自行添加一个额外的 G。2. Oligo 退火形成 duplexPCR 仪 95℃ 5 min，缓慢降温至室温 1 h，1：200 稀释 duplex。3. 质粒酶切4. 胶回收大片段约 11kb 回收；小片段约 2kb 为切下来的 filler，不要。5. 连接室温连接
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