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深圳子科生物
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100ml
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文献和实验4.溴酚蓝指示剂点样缓冲液 5.1mg/ml溴化乙锭溶液 6.电泳缓冲液(TAE) 7.0.7% 琼脂糖凝胶(用TAE电泳缓冲液配制) (三)器材 1.5ml Eppendorf管 200ml吸头 (四)仪器 微量移液器 离心机 恒温水浴锅 电泳仪 水平电泳槽 透射紫外观察仪 实验步骤 1. 取一个灭菌的Eppendorf管,依次加入下列试剂: 双蒸馏无菌
真空转移 2. 固相支持物的种类及选择: 硝酸纤维素膜:非共价结合,易脆,易丢失DNA , 尼龙膜(带正电荷的)高强度,不易破损,具有较大的DNA 结合容量,它能够吸附变性DNA ,核酸以共价结合方式不可逆的结合在尼龙膜上。尼龙膜两边均有吸附DNA 的功能,无论用哪边均可以经久耐用,可反复利用 10 次以上( 10-20 次),经毛细管(毛细吸附)作用,把DNA 从凝胶上转到膜上。DNA 转到膜上是复制胶上的带型,在 80-100 ℃真空干燥 2-4 hrs
pUC118 (二)试剂 1.l DNA/HindIII分子量标准 2.溴酚蓝指示剂点样缓冲液 0.2% 溴酚蓝 50% 蔗糖 3.1mg/ml溴化乙锭溶液 4.电泳缓冲液(TAE) 40 mmol/L Tris-乙酸 1 mol/L EDTA (配制方法:24.2克Tris碱,5.71ml冰乙酸,10ml 0.5mol/L EDTA(pH8.0),定容至5000ml) 5.0.7% 琼脂糖凝胶 (配制方法:称取琼脂糖0.35克
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