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详见说明书
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上海谷研
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-20℃
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详见说明书
原则:不与DNA反应,对其无影响。
1.纯乙醇(二倍体积比);效率高,需要放置的时间短,在公司用Kit提取的时候,没有放置直接进行下一步;确定是价格相对昂贵。
2.95%乙醇,价格相对于纯乙醇便宜,但是会损失DNA;
3.异丙醇(0.6倍体积);
(1)普通细胞上清液体,静止15-30min即可沉淀;
(2)对于含量低,或者组织(比如我现在经常提取的小鼠的肝脏中的Total和cccDNA),则最好在-20℃放置2h或者以上,
本人提取肝脏组织DNA时候,最长时间放置了三天,对结果并无影响;上周提取细胞中cccDNA的时候,室温放置了15min,结果提出的DNA含量也挺高的,而且之后的Southern结果也很成功。我猜测可能是含量高,所以时间短点也可以,但是如果时间不是很着急,还是按照规定的时间来做比较保险。
产品名称:Alw26I (BsmAI) (10 U/µL)
Enzyme:Alw26I
保存温度:-20℃
货期:2-3天
CompatibleBuffer:10xBufferO
OptimalReactionTemperature:37°C
SensitivetoHeatInactivation::Yes
MethylationSensitivity:NotCpGmethylation-sensitive, Notdammethylation-sensitive, Notdcmmethylation-sensitive
Alw26I限制性内切酶能够识别GTCTC(1/5)^位点,在Tango缓冲体系中于37°C达到最佳切割效果(同裂酶:BsmAI、BstMAI)。ThermoScientific传统限制性内切酶产品包含了大量的高品质内切酶,这些酶经过优化,可在五种缓冲液体系中的其中一种中进行酶切,此外,还随酶提供通用Tango缓冲液,以便进行双酶切。所有内切酶在推荐的缓冲液和反应条件下都具有100%的活性。为保证内切酶的性能稳定,ThermoScientific限制性内切酶反应缓冲液还预先混入了BSA,以增强酶的稳定性并结合可能存在于DNA制备产物中的污染物。 特点: •优异的质量—严格的质量控制和业内领先的生产流程 •使用颜色标记的五大便捷缓冲系统 •包含适于双酶切的通用型Tango缓冲液 •反应缓冲液中预先混入BSA •种类齐全,特异性限制性内切酶的广泛选择 应用 •分子克隆 •限制性酶切位点作图(Restrictionsitemapping) •基因分型 •Southernblotting •限制性片段长度多态性(RFLP) •SNP 注意事项: 关于甲基化敏感度,请参见产品说明。
作用及原理:
⒈溶液I—溶菌液:
溶菌酶:它是糖苷水解酶,能水解菌体细胞壁的主要化学成分肽聚糖中的β-1,4糖苷键,因而具有溶菌的作用。当溶液中pH小于8时,溶菌酶作用受到抑制。
葡萄糖:增加溶液的粘度,维持渗透压,防止DNA受机械剪切力作用而降解。
EDTA:(1)螯合Mg2+、Ca2+等金属离子,抑制脱氧核糖核酸酶对DNA的降解作用(DNase作用时需要一定的金属离子作辅基);(2)EDTA的存在,有利于溶菌酶的作用,因为溶菌酶的反应要求有较低的离子强度的环境。
⒉溶液II-NaOH-SDS液:
NaOH:核酸在pH大于5,小于9的溶液中,是稳定的。
但当pH>12或pH<3时,就会引起双链之间氢键的解离而变性。
Alw26I (BsmAI) (10 U/µL)在溶液II中的NaOH浓度为0.2mo1/L,加抽提液时,该系统的pH就高达12.6,因而促使染色体DNA与质粒DNA的变性。
SDS:SDS是离子型表面活性剂。它主要功能有:
(1)溶解细胞膜上的脂质与蛋白,因而溶解膜蛋白而破坏细胞膜。
(2)解聚细胞中的核蛋白。
(3)SDS能与蛋白质结合成为R-O-SO3-…R+-蛋白质的复合物,使蛋白质变性而沉淀下来。但是SDS能抑制核糖核酸酶的作用,所以在以后的提取过程中,必须把它去除干净,防止在下一步操作中(用RNase去除RNA时)受到干扰。
根据不同浓度的氯化钠溶液对DNA和蛋白质的溶解度不同原理,可以在提取不同类型DNA使用中加以利用。
1.Nacl是常用的盐析材料之一,盐析即在高浓度Nacl溶液中,蛋白质析出的现象。原理如下
(1)Nacl溶液与蛋白质争夺水分子,破坏蛋白质胶体颗粒表面的水膜;
(2)Nacl溶液大量中和蛋白质颗粒上的电荷,从而使水中蛋白质颗粒积聚而沉淀析出;
2.不同浓度下DNA分子构象(三维结构)不同,不同的构象溶解度也不同。
(1)当NaCl溶液的浓度为0.14mol/L时,DNA溶解度最小,因此改变NaCl溶液的浓度既能使DNA溶解也能使其析出;
(2)DNA在不同浓度的氯化钠溶液中随着氯化钠的浓度不断升高;
3.所以可以使用适当的高浓度Nacl溶液,使得蛋白质析出,而DNA溶解度较大,通过高速离心,取上清并去除沉淀,进而去除蛋白质。
以下是公司正在热销的产品:
EPHB3 Polyclonal Antibody资源名称大鼠肺微血管内皮细胞英文: EPHB3 Polyclonal Antibody 种属 :PMVEC
IRF7 Polyclonal Antibody资源名称猪肺泡巨噬细胞英文: IRF7 Polyclonal Antibody 种属 :3D4/21
ADAR Polyclonal Antibody资源名称人角质形成细胞英文: ADAR Polyclonal Antibody 种属 :COLO-1
CSTF1 Polyclonal Antibody资源名称猫肾细胞英文: CSTF1 Polyclonal Antibody 种属 :F81
SRGN Polyclonal Antibody资源名称鸡胚成纤维细胞英文: SRGN Polyclonal Antibody 种属 :CEF
INHA Polyclonal Antibody资源名称人急性T淋巴细胞白血病细胞英文: INHA Polyclonal Antibody 种属 :Jurkat
KCNK17 Polyclonal Antibody资源名称小鼠的星形胶质细胞英文: KCNK17 Polyclonal Antibody 种属 :MA-c
PFDN1 Polyclonal Antibody资源名称大鼠肺泡Ⅱ型细胞英文: PFDN1 Polyclonal Antibody 种属 :RLE-6TN
UMPS Polyclonal Antibody资源名称小鼠结缔组织L细胞株929克隆英文: UMPS Polyclonal Antibody 种属 :L-929[L929]
MIF Polyclonal Antibody资源名称人正常乳腺细胞英文: MIF Polyclonal Antibody 种属 :Hs 578Bst
GLRX Polyclonal Antibody资源名称仓鼠卵巢细胞,二氢叶酸还原酶缺陷英文: GLRX Polyclonal Antibody 种属 :CHO/dhFr-
KIF11 Polyclonal Antibody资源名称人视网膜上皮细胞英文: KIF11 Polyclonal Antibody 种属 :ARPE-19
TSSK4 Polyclonal Antibody资源名称小鼠心房肌细胞英文: TSSK4 Polyclonal Antibody 种属 :HL-1
CPLX2 Polyclonal Antibody资源名称中国仓鼠卵巢细胞英文: CPLX2 Polyclonal Antibody 种属 :CHO
SSX5 Polyclonal Antibody资源名称涎腺腺样囊性癌细胞英文: SSX5 Polyclonal Antibody 种属 :SACC-83
CACNB1 Polyclonal Antibody资源名称小鼠颅顶前骨细胞亚克隆14英文: CACNB1 Polyclonal Antibody 种属 :MC3T3-E1 Subclone 14
Alw26I (BsmAI) (10 U/µL)人核心蛋白聚糖elisa检测试剂盒
英文名称:Human Decorin ELISA KIT
反应性:Human
样品类型:Serum, plasma, Cell culture supernatant
灵敏度:15 pg/ml
检测目标:Decorin
应用:Sandwich ELISA
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文献和实验Cleavage Efficiency Close to the&nbs
in the DNA Extraction Kit (#K0513) followed by ethanol precipitation. DNA (0.5µg) and 10u of restriction endonuclease were incubated for 1 hour at the recommended incubation temperature and optimal buffer for each enzyme in a total volume of 40µl. Reaction
Cleavage Efficiency Close to the Termini of PCR Fragments
in the DNA Extraction Kit (#K0513) followed by ethanol precipitation. DNA (0.5µg) and 10u of restriction endonuclease were incubated for 1 hour at the recommended incubation temperature and optimal buffer for each enzyme in a total volume of 40µl. Reaction
内切酶列表:Enzymes Generating 5‘-protruding Ends
CTAG CCTCAGC(-5/-2)^* BbvCI TCA CCTNAGC(-5/-2)^* Bpu10I
技术资料暂无技术资料 索取技术资料








