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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
22
- 英文名:
Metal Enhanced DAB Substrate Kit,20×
- 保质期:
详见说明书
- 供应商:
上海谷研
- 保存条件:
低温冷藏
- 规格:
3ml
是用于测定细胞增殖或毒性实验中活细胞数目的一种高灵敏度,无放射性的比色检测法。CCK法应用非常广泛,如药物筛选、细胞增殖测定、细胞毒性测定、肿瘤药敏试验以及生物因子的活性检测等。下面以engreen的CCK8试剂盒为例,简要说明细胞增殖-毒性检测的操作步骤
方法/步骤
在96孔板中配制100μl的细胞悬液。将培养板在培养箱预培养 24 小时 (在 37℃,5% CO2 的条件下)。
向培养板加入 10μl 不同浓度的待测物质。
将培养板在培养箱孵育一段适当的时间 (例如: 6,12, 24 或 48 小时)。
向每孔加入 10μl CCK8 溶液(engreen) (注意不要在孔中生成气泡,它们会影响 OD 值的读数)。
5. 将培养板在培养箱内孵育 1-4 小时。
用酶标仪测定在 450 nm 处的吸光度。
如果暂时不测定OD值,打算以后测定的话,可以向每孔中加10μl0.1 M HCl溶液或者1%wSDS 溶液,并遮盖培养板避光保存在室温条件下。在24小时内吸光度不会发生变化 。
特别提示:本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
| 产品名称 | 增强型DAB显色试剂盒(20×) |
| 英文名称 | Metal Enhanced DAB Substrate Kit,20× |
| 规格 | 3ml |
别名 增强型DAB显色试剂盒(20×)
英文名称 Metal Enhanced DAB Substrate Kit,20×
储存条件 -20℃,避光,有效期1年
单位 瓶
产品简介:
增强型 DAB 显色试剂盒是一种借助辣根过氧化物酶(HRP) ,用于免疫组化显色、原位杂交显色或 Western、 Southern 、Northern、EMSA 等膜显色的试剂盒。 DAB(二氨基胺)是辣根过氧化物酶的常用底物。在 辣根过氧化物酶的催化下,DAB 会产生棕色沉淀。该棕色沉淀不溶于水和乙醇。 本产品采用特殊配方,灵敏度高,背景低,重复性好,储存稳定,使用方便,适合于蛋白印迹、免疫组织 化学和免疫细胞化学、斑点印迹和生物芯片等的染色和显色反应。
操作说明:
1. 对于组织切片或蛋白质印记膜,在与辣根过氧化物酶(HRP)标记的抗体或其它形式的探针孵育后,用适 当洗涤液洗涤 3-5 次,每次 3-5 分钟。
2. 向 5 ml 蒸馏水中加入 250 μl 溶液 A、250 μl 溶液 B、250 μl 溶液 C,并混合均匀,即为 DAB 工作液,1h 内使用。注意:溶液 A/B/C 必须完全融化后使用。
3. 向组织切片或膜上加入适量 DAB 工作液,确保能充分覆盖样品。
4. 室温避光孵育 1-30 分钟,显色时间过长可引起本底增高,故应密切观察显色过程(一般 3-10 分钟最理想), 并在本底较浅且达到适当显色强度时以流水漂洗终止显色反应。
5. 对于组织切片或细胞样品,显色反应终止后可对其进行其他染料复染。对于膜,显色反应终止后,可以室 温晾干避光保存。
蛋白质与免疫功能:
蛋白质是机体免疫防御功能的物质基础,当蛋白质营养不良时,其有关组织器官的结构和功能均受到不同程度的影响。
(一)免疫器官
蛋白质热能营养不良明显影响胸腺及外周淋巴器官的正常结构。且这种损伤是不可逆的,一旦受损其结构和功能恢复极为缓慢。
(二)细胞免疫
蛋白质营养不良时主要影响T淋巴细胞的数量和功能,医学教|育网搜集整理外周血中T淋巴细胞总数显著减少,对抗原诱导的增殖反应降低。
(三)体液免疫
蛋白质营养不良时,上皮及粘膜组织分泌液中SIgA显著减少,溶菌酶水平下降,使其组织抵抗力降低,甚至可导致感染扩散。
以下是增强型DAB显色试剂盒(20×) 的相关产品:
氨肽酶A抗体
英文名称 Anti-Aminopeptidase A/BP1/CD249
别 名 Aminopeptidase A; AMPE_HUMAN; AP-A; APA; CD249; Differentiation antigen gp160; EAP; EC 3.4.11.7; ENPEP; Glutamyl aminopeptidase; Gp160; Ly51; Ly51/6C3 antigen.
规 格 0.2ml/200μg
ATP结合蛋白家族7抗体
英文名称 Anti-ABCB7
别 名 ABC transporter 7 protein; ABC7; Abcb7; ABCB7_HUMAN; ASAT; Atm1p; ATP binding cassette 7; ATP binding cassette sub family B (MDR/TAP) member 7; ATP binding cassette sub family B member 7; ATP binding cassette sub family B member 7 mitochondrial; ATP binding cassette transporter 7; ATP-binding cassette sub-family B member 7; ATP-binding cassette transporter 7; EST140535; MDR7; mitochondrial; Multidrug resistance protein 7; P-glycoprotein 7; PGP7.
规 格 0.2ml/200μg
ASCL2蛋白抗体
英文名称 Anti-ASCL2
别 名 Achaete scute complex like 2; Achaete scute homolog 2; achaete-scute complex-like 2; Achaete-scute homolog 2; ASCL2; ASCL2_HUMAN; ASH-2; Ash2; bHLHa45; Class A basic helix-loop-helix protein 45; HASH2; Mash2.
规 格 0.2ml/200μg
肌动蛋白相关蛋白M1抗体
英文名称 Anti-ARPM1
别 名 Actin related protein M1; Actin-related protein T3; ARP-T3; ACTT3_HUMAN.
规 格 0.2ml/200μg
γ2肌动蛋白抗体
英文名称 Anti-ACTG2/Gamma 2 actin
别 名 ACT; ACTA3; ACTE; Actin gamma 2 smooth muscle enteric; Actin gamma enteric smooth muscle; Actin like protein; ACTL3; ACTSG; Alpha actin 3; Gamma 2 actin; Smooth muscle gamma actin; ACTH_HUMAN.
规 格 0.2ml/200μg
增强型DAB显色试剂盒(20×) 白介素18受体1(IL18R1)酶联免疫试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISAKitforInterleukin18Receptor1(IL18R1) 规格:48T/96T 进口、国产
神经蛋白聚糖(NCAN)酶联免疫试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISAKitforNeurocan(NCAN) 规格:48T/96T 进口、国产
NADH脱氢酶1(ND1)酶联免疫试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISAKitforNADHDehydrogenase1(ND1) 规格:48T/96T 进口、国产
脂酰肌蛋白聚糖4(GPC4)酶联免疫试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISAKitforGlypican4(GPC4) 规格:48T/96T 进口、国产
密封蛋白(OCLN)酶联免疫试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISAKitforOccludin(OCLN) 规格:48T/96T 进口、国产
Ⅱ型胶原交联羧基端肽(CTXⅡ)酶联免疫试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISAKitforCrossLinkedC-TelopeptideOfTypeIICollagen(CTXII) 规格:48T/96T 进口、国产
痉挛性截瘫蛋白11(SPG11)酶联免疫试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISAKitforSpasticParaplegia11(SPG11) 规格:48T/96T 进口、国产
伊默菌素(EMD)酶联免疫试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISAKitforEmerin(EMD) 规格:48T/96T 进口、国产
胰岛素样生长因子1(IGF1)酶联免疫试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISAKitforInsulinLikeGrowthFactor1(IGF1) 规格:48T/96T 进口、国产
血管生成素2(ANGPT2)酶联免疫试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISAKitforAngiopoietin2(ANGPT2) 规格:48T/96T 进口、国产
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文献和实验。6)滴加正常山羊血清封闭液,室温20分钟。甩去多余液体。7)滴加 Ⅰ 抗,室温1小时或者4℃过夜或者37℃1小时(4℃过夜后在37℃复温45分钟)。8)PBS洗三次每次2分钟。9)滴加生物素化二抗,20℃~37℃ 20 分钟。10)PBC 洗 3 次每次 2 分钟。11)滴加试剂SABC,20℃~37℃ 20 分钟。12)PBS 洗 4 次每次 5 分钟。13)DAB 显色:DAB 显色试剂盒或者自配显色剂显色(镜下掌握显色程度)。14)蒸馏水洗。苏木素复染 2 分钟、盐酸酒精分化。15)脱水、透明
的细胞几乎没有DNA的断裂,因而没有3'-OH形成,很少能够被染色。由此,TUNEL成为了检测DNA片段化(细胞凋亡)的最常用方法。(以TUNEL法细胞凋亡检测试剂盒(增强型,绿色荧光)为例) TUNEL检测:使用20 U/ml Dnase处理Hela细胞10分钟。 二、TUNEL实验中关键步骤 1. 充分脱蜡和水化。脱蜡前可先将切片在 60ºC烤片 20 min,再使用二甲苯脱蜡2次,每次 5-10 min;而水化一般建议用梯度乙醇从高浓度到低浓度浸洗,便于后期试剂能充分、均匀的结合反应
梯度(两个孔)取其平均值减去空白后制作标准曲线得到曲线公式。测得的样品的 OD 值(三个孔)取其平均值按标准曲线的公式运算得到蛋白浓度,按 50 μg/上样孔的标准来计算上样量,算法为:上样量= 50/蛋白浓度。注:所有得到的 OD 值必须减去背景(标曲中空白孔的 OD 值)后再计算。 样品处理: 蛋白样品:5×SDS 上样缓冲液按照 4:1 比例混合沸水浴 10 min 左右。浓度过高的样品可用 PBS 稀释后再煮样。样品煮好后 -20 ℃ 保存待用(可保存半年),样品长期保存须置于 -70
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