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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
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58
- 英文名：
SDS-PAGE loading buffer,5×(with DTT)
- 保质期：
详见说明书
- 供应商：
上海谷研
- 保存条件：
低温冷藏
- 规格：
10ml
实验操作步骤：
是用于测定细胞增殖或毒性实验中活细胞数目的一种高灵敏度，无放射性的比色检测法。CCK法应用非常广泛，如药物筛选、细胞增殖测定、细胞毒性测定、肿瘤药敏试验以及生物因子的活性检测等。下面以engreen的CCK8试剂盒为例，简要说明细胞增殖-毒性检测的操作步骤
方法/步骤
在96孔板中配制100μl的细胞悬液。将培养板在培养箱预培养 24 小时 (在 37℃，5% CO2 的条件下)。
向培养板加入 10μl 不同浓度的待测物质。
将培养板在培养箱孵育一段适当的时间 (例如: 6,12, 24 或 48 小时)。
向每孔加入 10μl CCK8 溶液（engreen） (注意不要在孔中生成气泡，它们会影响 OD 值的读数)。
5. 将培养板在培养箱内孵育 1-4 小时。
用酶标仪测定在 450 nm 处的吸光度。
如果暂时不测定OD值，打算以后测定的话，可以向每孔中加10μl0.1 M HCl溶液或者1%wSDS 溶液，并遮盖培养板避光保存在室温条件下。在24小时内吸光度不会发生变化 。
特别提示：本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！
英文名称 SDS-PAGE loading buffer,5×(with DTT)
储存条件 建议分装冻存，避免反复冻融，-20℃，有效期1年
单位 支
5×蛋白上样缓冲液（含DTT）产品简介：
本产品适用于SDS-PAGE(SDS-变性聚丙胺凝胶电泳)时作蛋白质上样用。其主要成份为SDS，DTT，溴酚蓝，缓冲盐溶液等。SDS可与蛋白质结合使蛋白质-SDS复合物上带有大量的负电荷，这时蛋白质本身的电荷完全被SDS掩盖，消除了各种蛋白质本身电荷的差异；SDS还可以断开分子内和分子间的氢键，破坏蛋白质分子的二级和三级结构。DTT可以断开半胱氨酸残基之间的二硫键，破坏蛋白质结构，消除了蛋白结构之间的差异。最终无电荷及结构上差异的蛋白（亚单位），电泳速度只是与其分子量大小有关。溴酚蓝用作电泳时的指示剂，可大概指示电泳结束的时间。
5×蛋白上样缓冲液（含DTT）使用说明：
1、请按每40微升蛋白样品加入10微升上样缓冲液的比例(5倍稀释)来使用。如果蛋白样品浓度过高，可用双蒸水稀释。
2、混匀后，100℃水浴加热5-10分钟，使蛋白变性。
3、冷却至室温后，10000-14000rpm离心2-5分钟，取上清直接上样电泳即可。
5×蛋白上样缓冲液（含DTT）注意事项：
1、聚丙胺凝胶浓度为8%时溴酚蓝指示条带的位置大概在30kd左右， 胶浓度为12%时，约在20kd左右，胶浓度为15%时，大概在10kd。请根据自己目标条带来判断结果电泳时间。
2、本试剂因含DTT，有一定的毒性，为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
3、蛋白上样缓冲液含有溴酚蓝指示剂，PH值受保存温度影响，在低温冻存状态下，溶液可能会呈现深棕色，不影响产品使用。
蛋白质与免疫功能：
蛋白质是机体免疫防御功能的物质基础，当蛋白质营养不良时，其有关组织器官的结构和功能均受到不同程度的影响。
（一）免疫器官
蛋白质热能营养不良明显影响胸腺及外周淋巴器官的正常结构。且这种损伤是不可逆的，一旦受损其结构和功能恢复极为缓慢。
（二）细胞免疫
蛋白质营养不良时主要影响T淋巴细胞的数量和功能，医学教|育网搜集整理外周血中T淋巴细胞总数显著减少，对抗原诱导的增殖反应降低。
（三）体液免疫
蛋白质营养不良时，上皮及粘膜组织分泌液中SIgA显著减少，溶菌酶水平下降，使其组织抵抗力降低，甚至可导致感染扩散。
以下是5×蛋白上样缓冲液（含DTT） 的相关产品：
PLC/PRF/5(人肝癌亚力山大细胞) 5×106cells/瓶×2 293T/17 [HEK 293T/17] (人胚肾细胞)
CL-0239U-937(人组织细胞淋巴瘤细胞)5×106cells/瓶×2
NRG1 Others Human 人 NRG1-alpha (ECD) 人细胞裂解液 (阳性对照)
B16-F10小鼠皮肤黑色素瘤细胞 B16-F10 mouse melanoma cell DMEM培养基+10%FBS
IL1RN Protein Human 重组人 IL-1RA / IL1RN 蛋白
小鼠淋巴管内皮细胞完全培养基 100mL
phospho-BAD(Ser75/99/118) 磷酸化相关死亡促进因子抗体规格： 0.1ml
Bag1/RAP46 抑凋亡基因bag1抗体规格： 0.1ml
Bak Bcl-2同源拮抗剂抗体规格： 0.1ml
BADH2 BADH2抗体(水稻)规格： 0.2ml
Bassoon 锌指蛋白231抗体规格： 0.2ml
紫菀英文名称：Aster规格：1g保存：20℃，避光
黄芩英文名称：Baikal Skullcap规格：0.5g保存：20℃，避光
饿蚂蝗英文名称：Manyflower tickclove herb规格：1g保存：20℃，避光
桃仁英文名称：Peach kernel规格：1g保存：20℃，避光
降香英文名称：Dalbergia odorifera规格：1g保存：20℃，避光
前胡（白花前胡）英文名称：(Peucedanum praeruptorum)规格：1g保存：20℃，避光
茵陈(滨蒿)英文名称：Yin Chen (Artemisia scoparia)规格：1.5g保存：20℃，避光
郁金（温郁金）英文名称：Turmeric (Wen Yujin)规格：1g保存：20℃，避光
返魂草(麻叶千里光)英文名称：Soul grass (Maba Chisatohikaru)规格：5g保存：20℃，避光
防风英文名称：Wind规格：1g保存：20℃，避光
西青果英文名称：West olive规格：2g保存：20℃，避光
白芷英文名称：Angelica dahurica规格：1g保存：20℃，避光
5×蛋白上样缓冲液（含DTT） α2-微球蛋白样蛋白1(α2ML1)酶联免疫试剂盒英文名称：α2ML1 ELISA Kit，英文缩写：α2ML1，产品别名：α2-微球蛋白样蛋白1(α2ML1)酶联免疫试剂盒，α2-微球蛋白样蛋白1(α2ML1)酶联免疫试剂盒产品保存：2~8℃、
Tescalcin蛋白(TSC)酶联免疫试剂盒英文名称：TSC ELISA Kit，英文缩写：TSC，产品别名：Tescalcin蛋白(TSC)酶联免疫试剂盒，Tescalcin蛋白(TSC)酶联免疫试剂盒产品保存：2~8℃、
VEGF共调节趋化因子1(VCC1)酶联免疫试剂盒英文名称：VCC1 ELISA Kit，英文缩写：VCC1，产品别名：VEGF共调节趋化因子1(VCC1)酶联免疫试剂盒，VEGF共调节趋化因子1(VCC1)酶联免疫试剂盒产品保存：2~8℃、
Smad同源物1(Smad1)酶联免疫试剂盒英文名称：Smad1 ELISA Kit，英文缩写：Smad1，产品别名：Smad同源物1(Smad1)酶联免疫试剂盒，Smad同源物1(Smad1)酶联免疫试剂盒产品保存：2~8℃、
R-脊椎蛋白3(RSPO3)酶联免疫试剂盒英文名称：RSPO3 ELISA Kit，英文缩写：RSPO3，产品别名：R-脊椎蛋白3(RSPO3)酶联免疫试剂盒，R-脊椎蛋白3(RSPO3)酶联免疫试剂盒产品保存：2~8℃、
PTB结合核蛋白2(RAVER2)酶联免疫试剂盒英文名称：RAVER2 ELISA Kit，英文缩写：RAVER2，产品别名：PTB结合核蛋白2(RAVER2)酶联免疫试剂盒，PTB结合核蛋白2(RAVER2)酶联免疫试剂盒产品保存：2~8℃、
N-乙酰转移酶5(NAT5)酶联免疫试剂盒英文名称：NAT5 ELISA Kit，英文缩写：NAT5，产品别名：N-乙酰转移酶5(NAT5)酶联免疫试剂盒，N-乙酰转移酶5(NAT5)酶联免疫试剂盒产品保存：2~8℃、
Nischarin蛋白(NISCH)酶联免疫试剂盒英文名称：NISCH ELISA Kit，英文缩写：NISCH，产品别名：Nischarin蛋白(NISCH)酶联免疫试剂盒，Nischarin蛋白(NISCH)酶联免疫试剂盒产品保存：2~8℃、
Misato同源物1(MSTO1)酶联免疫试剂盒英文名称：MSTO1 ELISA Kit，英文缩写：MSTO1，产品别名：Misato同源物1(MSTO1)酶联免疫试剂盒，Misato同源物1(MSTO1)酶联免疫试剂盒产品保存：2~8℃、
Kintoun蛋白(KTU)酶联免疫试剂盒英文名称：KTU ELISA Kit，英文缩写：KTU，产品别名：Kintoun蛋白(KTU)酶联免疫试剂盒，Kintoun蛋白(KTU)酶联免疫试剂盒产品保存：2~8℃、
G抗原10(GAGE10)酶联免疫试剂盒英文名称：GAGE10 ELISA Kit，英文缩写：GAGE10，产品别名：G抗原10(GAGE10)酶联免疫试剂盒，G抗原10(GAGE10)酶联免疫试剂盒产品保存：2~8℃、
是用于测定细胞增殖或毒性实验中活细胞数目的一种高灵敏度，无放射性的比色检测法。CCK法应用非常广泛，如药物筛选、细胞增殖测定、细胞毒性测定、肿瘤药敏试验以及生物因子的活性检测等。下面以engreen的CCK8试剂盒为例，简要说明细胞增殖-毒性检测的操作步骤
方法/步骤
在96孔板中配制100μl的细胞悬液。将培养板在培养箱预培养 24 小时 (在 37℃，5% CO2 的条件下)。
向培养板加入 10μl 不同浓度的待测物质。
将培养板在培养箱孵育一段适当的时间 (例如: 6,12, 24 或 48 小时)。
向每孔加入 10μl CCK8 溶液（engreen） (注意不要在孔中生成气泡，它们会影响 OD 值的读数)。
5. 将培养板在培养箱内孵育 1-4 小时。
用酶标仪测定在 450 nm 处的吸光度。
如果暂时不测定OD值，打算以后测定的话，可以向每孔中加10μl0.1 M HCl溶液或者1%wSDS 溶液，并遮盖培养板避光保存在室温条件下。在24小时内吸光度不会发生变化 。
特别提示：本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！
| 产品名称 | 5×蛋白上样缓冲液（含DTT） |
| 英文名称 | SDS-PAGE loading buffer,5×(with DTT) |
| 规格 | 10ml |
英文名称 SDS-PAGE loading buffer,5×(with DTT)
储存条件 建议分装冻存，避免反复冻融，-20℃，有效期1年
单位 支
5×蛋白上样缓冲液（含DTT）产品简介：
本产品适用于SDS-PAGE(SDS-变性聚丙胺凝胶电泳)时作蛋白质上样用。其主要成份为SDS，DTT，溴酚蓝，缓冲盐溶液等。SDS可与蛋白质结合使蛋白质-SDS复合物上带有大量的负电荷，这时蛋白质本身的电荷完全被SDS掩盖，消除了各种蛋白质本身电荷的差异；SDS还可以断开分子内和分子间的氢键，破坏蛋白质分子的二级和三级结构。DTT可以断开半胱氨酸残基之间的二硫键，破坏蛋白质结构，消除了蛋白结构之间的差异。最终无电荷及结构上差异的蛋白（亚单位），电泳速度只是与其分子量大小有关。溴酚蓝用作电泳时的指示剂，可大概指示电泳结束的时间。
5×蛋白上样缓冲液（含DTT）使用说明：
1、请按每40微升蛋白样品加入10微升上样缓冲液的比例(5倍稀释)来使用。如果蛋白样品浓度过高，可用双蒸水稀释。
2、混匀后，100℃水浴加热5-10分钟，使蛋白变性。
3、冷却至室温后，10000-14000rpm离心2-5分钟，取上清直接上样电泳即可。
5×蛋白上样缓冲液（含DTT）注意事项：
1、聚丙胺凝胶浓度为8%时溴酚蓝指示条带的位置大概在30kd左右， 胶浓度为12%时，约在20kd左右，胶浓度为15%时，大概在10kd。请根据自己目标条带来判断结果电泳时间。
2、本试剂因含DTT，有一定的毒性，为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
3、蛋白上样缓冲液含有溴酚蓝指示剂，PH值受保存温度影响，在低温冻存状态下，溶液可能会呈现深棕色，不影响产品使用。
蛋白质与免疫功能：
蛋白质是机体免疫防御功能的物质基础，当蛋白质营养不良时，其有关组织器官的结构和功能均受到不同程度的影响。
（一）免疫器官
蛋白质热能营养不良明显影响胸腺及外周淋巴器官的正常结构。且这种损伤是不可逆的，一旦受损其结构和功能恢复极为缓慢。
（二）细胞免疫
蛋白质营养不良时主要影响T淋巴细胞的数量和功能，医学教|育网搜集整理外周血中T淋巴细胞总数显著减少，对抗原诱导的增殖反应降低。
（三）体液免疫
蛋白质营养不良时，上皮及粘膜组织分泌液中SIgA显著减少，溶菌酶水平下降，使其组织抵抗力降低，甚至可导致感染扩散。
以下是5×蛋白上样缓冲液（含DTT） 的相关产品：
PLC/PRF/5(人肝癌亚力山大细胞) 5×106cells/瓶×2 293T/17 [HEK 293T/17] (人胚肾细胞)
CL-0239U-937(人组织细胞淋巴瘤细胞)5×106cells/瓶×2
NRG1 Others Human 人 NRG1-alpha (ECD) 人细胞裂解液 (阳性对照)
B16-F10小鼠皮肤黑色素瘤细胞 B16-F10 mouse melanoma cell DMEM培养基+10%FBS
IL1RN Protein Human 重组人 IL-1RA / IL1RN 蛋白
小鼠淋巴管内皮细胞完全培养基 100mL
phospho-BAD(Ser75/99/118) 磷酸化相关死亡促进因子抗体规格： 0.1ml
Bag1/RAP46 抑凋亡基因bag1抗体规格： 0.1ml
Bak Bcl-2同源拮抗剂抗体规格： 0.1ml
BADH2 BADH2抗体(水稻)规格： 0.2ml
Bassoon 锌指蛋白231抗体规格： 0.2ml
紫菀英文名称：Aster规格：1g保存：20℃，避光
黄芩英文名称：Baikal Skullcap规格：0.5g保存：20℃，避光
饿蚂蝗英文名称：Manyflower tickclove herb规格：1g保存：20℃，避光
桃仁英文名称：Peach kernel规格：1g保存：20℃，避光
降香英文名称：Dalbergia odorifera规格：1g保存：20℃，避光
前胡（白花前胡）英文名称：(Peucedanum praeruptorum)规格：1g保存：20℃，避光
茵陈(滨蒿)英文名称：Yin Chen (Artemisia scoparia)规格：1.5g保存：20℃，避光
郁金（温郁金）英文名称：Turmeric (Wen Yujin)规格：1g保存：20℃，避光
返魂草(麻叶千里光)英文名称：Soul grass (Maba Chisatohikaru)规格：5g保存：20℃，避光
防风英文名称：Wind规格：1g保存：20℃，避光
西青果英文名称：West olive规格：2g保存：20℃，避光
白芷英文名称：Angelica dahurica规格：1g保存：20℃，避光
5×蛋白上样缓冲液（含DTT） α2-微球蛋白样蛋白1(α2ML1)酶联免疫试剂盒英文名称：α2ML1 ELISA Kit，英文缩写：α2ML1，产品别名：α2-微球蛋白样蛋白1(α2ML1)酶联免疫试剂盒，α2-微球蛋白样蛋白1(α2ML1)酶联免疫试剂盒产品保存：2~8℃、
Tescalcin蛋白(TSC)酶联免疫试剂盒英文名称：TSC ELISA Kit，英文缩写：TSC，产品别名：Tescalcin蛋白(TSC)酶联免疫试剂盒，Tescalcin蛋白(TSC)酶联免疫试剂盒产品保存：2~8℃、
VEGF共调节趋化因子1(VCC1)酶联免疫试剂盒英文名称：VCC1 ELISA Kit，英文缩写：VCC1，产品别名：VEGF共调节趋化因子1(VCC1)酶联免疫试剂盒，VEGF共调节趋化因子1(VCC1)酶联免疫试剂盒产品保存：2~8℃、
Smad同源物1(Smad1)酶联免疫试剂盒英文名称：Smad1 ELISA Kit，英文缩写：Smad1，产品别名：Smad同源物1(Smad1)酶联免疫试剂盒，Smad同源物1(Smad1)酶联免疫试剂盒产品保存：2~8℃、
R-脊椎蛋白3(RSPO3)酶联免疫试剂盒英文名称：RSPO3 ELISA Kit，英文缩写：RSPO3，产品别名：R-脊椎蛋白3(RSPO3)酶联免疫试剂盒，R-脊椎蛋白3(RSPO3)酶联免疫试剂盒产品保存：2~8℃、
PTB结合核蛋白2(RAVER2)酶联免疫试剂盒英文名称：RAVER2 ELISA Kit，英文缩写：RAVER2，产品别名：PTB结合核蛋白2(RAVER2)酶联免疫试剂盒，PTB结合核蛋白2(RAVER2)酶联免疫试剂盒产品保存：2~8℃、
N-乙酰转移酶5(NAT5)酶联免疫试剂盒英文名称：NAT5 ELISA Kit，英文缩写：NAT5，产品别名：N-乙酰转移酶5(NAT5)酶联免疫试剂盒，N-乙酰转移酶5(NAT5)酶联免疫试剂盒产品保存：2~8℃、
Nischarin蛋白(NISCH)酶联免疫试剂盒英文名称：NISCH ELISA Kit，英文缩写：NISCH，产品别名：Nischarin蛋白(NISCH)酶联免疫试剂盒，Nischarin蛋白(NISCH)酶联免疫试剂盒产品保存：2~8℃、
Misato同源物1(MSTO1)酶联免疫试剂盒英文名称：MSTO1 ELISA Kit，英文缩写：MSTO1，产品别名：Misato同源物1(MSTO1)酶联免疫试剂盒，Misato同源物1(MSTO1)酶联免疫试剂盒产品保存：2~8℃、
Kintoun蛋白(KTU)酶联免疫试剂盒英文名称：KTU ELISA Kit，英文缩写：KTU，产品别名：Kintoun蛋白(KTU)酶联免疫试剂盒，Kintoun蛋白(KTU)酶联免疫试剂盒产品保存：2~8℃、
G抗原10(GAGE10)酶联免疫试剂盒英文名称：GAGE10 ELISA Kit，英文缩写：GAGE10，产品别名：G抗原10(GAGE10)酶联免疫试剂盒，G抗原10(GAGE10)酶联免疫试剂盒产品保存：2~8℃、
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文献和实验相关实验
-PAGE 电泳分析检测结果。这种方法得到的目的蛋白 N是在细胞内与蛋白 M 天然结合的，符合体内实际情况，得到的结果可信度高。这种方法常用于测定两种目标蛋白是否在体内结合；也可用于确定一种特定蛋白质的新的作用搭档。 步骤 用预冷的 PBS 溶液洗涤贴壁细胞两次（对于悬浮细胞则用台式离心机以 800-1000 rpm 转速通过离心洗涤）。 加入预冷的 RIPA 液（含蛋白酶抑制剂和磷酸酶抑制剂），RIPA 液的用量：按照 0.5 mL 每 5×106 细胞计算。 注：悬浮细胞，收集
我做NF-kB的EMSA实验方法和结果，条带不好，请大家指点！
核蛋白提取： （1）5 millions个离心收集 （2）弃上清，细胞沉淀重悬于1.5ml冰预冷的PBS缓冲液，4℃下2000 rpm离心5min。 （3）弃上清，沉淀重悬于500μl冰预冷的Buffer A离心收集，再悬于0.5 ml Buffer A。 （4）冰上放置10分钟，加入NP40使终浓度为0.5%，混匀后，轻摇20秒。 （5）4℃下1330×g离心15分钟得到细胞核。 （6）重悬于50µl Buffer B，于冰上强烈振荡15分钟，4℃下16300×g离心10分钟
tris-Cl, PH 7.4, 0.25 mM DTT, 10 mM CaCl2；PAD 缓冲液：推荐配方为 0.1M tris-Cl, PH 7.4, 5 mM DTT, 10 mM CaCl2, 10 µg/µl aprotonin, 10 µg/µl leupeptin, 10 µg/µl pepstatin；4×Laemelli 样品缓冲液：推荐配方为 8% SDS，40% Glycerol，250 mM tris-Cl, PH 6.8，0.02% Bromophenol Blue
技术资料暂无技术资料 索取技术资料
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