支原体常规PCR检测试剂盒（经典法）（含Taq酶）

常规PCR Kit （经典法）(含Taq酶）
Venor® Gem Classic

 

品名	货号	规格	价格
常规PCR Kit （经典法）(含Taq酶） Venor® Gem Classic	11-1025G	25次/盒	询价
	11-1050G	50次/盒	询价
	11-1100G	100次/盒	询价
	11-1250G	250次/盒	询价

特点
1.内控对照为独立包装，遵循欧洲药典和日本药典操作流程。
2.高特异性，仅一条阳性对照条带，即可涵盖所有可能感染细胞的支原体物种。操作简单，
易于观察。
3. 高灵敏度，若PCR反应体系加入10μl样本，支原体检测限度为≤5或≤10CFU。
(详见下文“(2)Venor® Gem Classic Kit 10种常见支原体检测限“)
4.欧洲药典要求的26种支原体均可检出。该试剂盒可检测出1种脲原体、7种无胆甾原体和85种支原体，与细菌和真核DNA无交叉反应。
5.试剂盒内包含Taq酶，无需另外购买。
 
Venor® Gem Classic Kit
10种常见支原体检测限
 

物种	检测限 [CFU/ml]	物种	检测限 [CFU/ml]
莱氏无胆甾原体	≤5	肺炎支原体	≤10
猪鼻支原体	≤10	精氨酸支原体	≤10
发酵支原体	≤10	鸡败血支原体	≤10
口腔支原体	≤10	螺原体	≤10
关节液支原体	≤10	唾液支原体	≤10

 
操作步骤
第1步：样本处理
a. 细胞培养上清
 
b. 生物药或需遵循药典的样本
说明：①样品基质可能会影响检测的灵敏度。收集和筛选更高的样品量可提高测定灵敏度。
   ②细胞培养物样本含丰富的DNA酶，在低温下也能降解支原DNA，影响检测灵敏度。
建议：样本做DNA抽提处理，实现最高灵敏度。
推荐：德国MB公司生产的专用支原体DNA提取试剂盒Venor® Gem Sample Preparation Kit该DNA抽提试剂盒已经过广泛验证。
第2步：试剂制备
 
第3步：PCR体系建立
a. 细胞培养上清
 
b. 生物药或需遵循药典的样本
 
第4步：启动PCR反应
 
第5步：电泳结果分析
 
 191bp为内控对照条带，表明PCR反应正常。

当样本存在支原体污染时，由于内控对照与支原体DNA存在竞争，内控对照条带变弱（例如支原体DNA＞103拷贝）。
阳性对照中支原体DNA＞104拷贝，内控对照条带会完全消失。
可能在80-90bp存在引物自退火形成的条带，此条带不影响检测结果。
如果待测样本对PCR产生抑制，则内控对照条带变弱（和阴性对照相比），此时应先进行DNA抽提（推荐使用：Venor® Gem Sample Preparation Kit 支原体DNA抽提试剂盒，详见第25页），然后再检测。


储存条件
2~8℃至少6个月。复溶后在-18℃保存。