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1000
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10% Guinea Pig Erythrocyte
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100mL
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文献和实验流式课堂 | 裂红 or 分离液?外周血不同制备方法应用场景
外周血样本采集完毕后,我们需要对其中的待测单细胞进行提取。针对外周血样本,最常使用的样本制备方法有两种: 一. 裂红法 利用红细胞裂解液,去除红细胞 二. Ficoll 法 利用不同细胞的沉降系数差异,进行梯度密度离心,提取 PBMC 两种方法分别在什么场景下应用?接着往下看。 裂红法 裂红法,即裂解样本中的红细胞。血液中的红细胞比白细胞多 10-100 倍,红细胞数量过多,会影响细胞群体的分析。因此,我们在做血液样本检测时,经常需要裂解红细胞。 裂红前 裂红后 01
3. 注射器,平皿,漏斗,纱布,研钵 4. 20%绵羊红细胞悬液 5. 洁净脱脂载玻片(75ⅹ25毫米),盖玻片(22ⅹ22毫米)。 6. Ph7.2的Hanks液,凡士林油。 7. 微量加样器 8. 指示细胞悬液,配制方法如下: 10%绵羊红细胞 0.5毫升 补体(新鲜豚鼠血清)0.5毫升 含5%小牛血清的Hanks液 2毫升 混合后水浴备用 方法: 1.免疫
科镊子提起腹膜,用 5mL 注射器往小鼠腹腔注射 2.5mL 预冷 PBS(勿扎到脏器),轻揉小鼠腹部1~2 min。注射器回抽腹腔灌洗液,收集于15mL 离心管中。 重复第 5 步 5 次,冲洗腹腔,可观察到冲洗液逐渐澄清。 将收集的腹腔灌洗液 300 g 离心 5 min,弃上清。 用细胞染色缓冲液或者含 10% 胎牛血清的 1640 培养液重悬细胞。 进行细胞计数,并调整细胞浓度至 1×107/mL。 注意事项: 若第 7 步离心弃上清后发现细胞沉淀中有较多红细胞,且检测目的细胞非红细胞,先
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