- ￥260 - 850
- 普诺赛
- PB180438/PB180436
- 武汉
- 2025年07月16日
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充足
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/
- CAS号：
/
- 保质期：
2年
- 供应商：
武汉益普生物科技有限公司
- 保存条件：
-20℃
- 规格：
50mL（PB180438）/100mL（PB180438）/10mL×5（PB180436）/10mL×10（PB180436）
| 规格： | 50mL（PB180438） | 产品价格： | ￥260.0 |
|---|---|---|---|
| 规格： | 100mL（PB180438） | 产品价格： | ￥360.0 |
| 规格： | 10mL×5（PB180436） | 产品价格： | ￥500.0 |
| 规格： | 10mL×10（PB180436） | 产品价格： | ￥850.0 |
| 产品编号 | 产品名称 | 储存条件 | 产品编号 | 产品名称 | 储存条件 | ||
| PB180438 | 无血清非程序冻存液 | 2-8℃，12个月 | PB180436 | 通用血清型程序冻存液 | 4℃，3个月 | ||
| -20℃，36个月 | -20℃，24个月 | ||||||
| 产品简介 | 即用型无血清非程序冻存液是在长期的细胞研究过程中针对细胞的冻存和复苏不断优化实验条件，面向数百种细胞研发出的专用冻存液产品。 该产品添加了细胞沉降稳定剂，可延缓细胞在冻存过程中的沉降速率，防止细胞互相挤压，影响细胞冻存效果。另外，添加了细胞膜保护剂、渗透性细胞膜内保护剂、非渗透性细胞保护剂等多种冷冻保护剂，这些成分在溶液中同水分子结合，发生水合作用，弱化水的结晶过程使溶液的粘性增加从而少冰晶的形成，能大大降低细胞在冻存过程中冰晶对于细胞的损伤，有效提高细胞复苏存活率。该产品配方成分明确，不含血清、不含动物源性蛋白，可减少各类细菌、病毒和支原体等污染，保证冻存细胞的安全；不仅适用于常规细胞系、原代细胞，同时亦适合于无血清培养细胞和蛋白表达细胞。 与传统冻存液相比，无需繁琐费时的程序冻存步骤或价格高昂的程序降温仪，可直接重悬细胞后置于-80℃，次日转移到液氮完成整个冻存过程，节省大量的时间和精力。 |
冷冻保存是保存细胞的主要方法，对细胞的保种、引种、培养以及实验研究等具有重要意义。在冻存细胞时，为使细胞免受冷冻损伤，常常加入冷冻保护剂，目前使用最为广泛的是渗透型保护剂DMSO（二甲基亚砜），其保护机制是在细胞冷冻悬液完全凝固之前渗透到细胞内，在细胞内外产生一定的摩尔浓度，降低细胞内外的未结冰溶液中电解质的浓度，从而保护细胞免受高浓度电解质的损伤，同时细胞内的水分也不会过分外渗，避免了细胞过分脱水皱缩。但DMSO在常温下对细胞毒副作用较大，浓度较大时对细胞毒害作用较大，尤其是敏感的细胞，如杂交瘤细胞；一般情况下，DMSO使用终浓度在5%～15%时具有较好的效果。 通用血清型程序冻存液，由DMSO、进口胎牛血清（FBS）和DMEM/F12基础培养基组成，经过数百种细胞的验证，适用于各种哺乳动物原代细胞，传代细胞系和杂交瘤细胞等细胞的冻存，细胞存活率高，储存稳定，使用方便。 |
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| 细胞冻存 | 1、选择对数生长期的细胞（90%左右），并保证在冻存前24h 内换液一次，收集细胞，并将细胞制备成单细胞悬液（贴壁细胞可能需要用胰酶消化），计数； 2、将细胞悬液1000r/min 离心5min，弃上清； 3、向细胞沉淀物中加入细胞冻存液，轻轻吹打，重悬细胞，使细胞密度达到5×10⁵～1×10⁷个/mL； 4、将上述细胞悬液按1ml～1.5ml 的量，分装于无菌细胞冻存管内，拧紧管盖，并做好标记； 5、将冻存管直接置于-80℃冰箱中，24 h后移入液氮长期保存。 |
1、选择对数生长期的细胞（90%左右），并保证在收货前24h内换液一次，收集细胞，并将细胞制备成单细胞悬液（贴壁细胞可能需要用胰酶消化），计数； 2、将细胞悬液1000r/min离心5min，弃上清； 3、向细胞沉淀物中加入冷冻液，轻轻吹打，使细胞密度达到105～106个/ml； 4、将上述细胞悬液按1ml～1.5ml的量，分装于无菌细胞冻存小管内，拧紧管盖，并做好标记； 5、按细胞冻存程序性降温步骤冻存细胞（2℃～8℃，40min；-20℃，30min～60min；-80℃，过夜；液氮保存）或使用程序降温盒降温后，再转移至液氮中保存。 |
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| 细胞复苏 | 1、从液氮罐中取出冻存的细胞，立即放入37℃水浴锅中快速解冻(操作时切勿使水浸没冻存管口，以免造成细胞污染)； 2、待细胞冻存管中冻存液完全融化后，立即逐滴加入少量细胞完全培养基于该冷冻管中与细胞进行混合，再将细胞混合液从冻存管中移入含有8～10mL该细胞完全培养基的试管中，轻轻混合均匀；1000r/min离心5min，弃上清； 3、加入1～2mL完全培养基重悬细胞，按照合适的接种密度将细胞接种到细胞培养容器中，加入适量的已预热的新鲜的细胞完全培养基； 4、轻轻摇晃培养器皿，使细胞分布均匀，静置于37℃、饱和湿度细胞培养箱中培养。 |
1、细胞复苏时，液氮中取出冻存管后，直接于37℃水浴中完全解冻（勿使水浸没冻存管口，而造成污染）； 2、从37℃水浴中取出冻存管，酒精消毒后，吸出细胞悬液于10倍体积的培养液中，1000r/min离心5min，弃上清； 3、加入含血清的培养液重悬细胞，计数，调整细胞密度，接种培养瓶，37℃培养箱静置培养，次日更换一次培养液，继续培养。 |
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| 注意事项 | 1、冻存细胞分装至冻存管后，应减少在室温/4℃存放时间，尽快移入到-80℃超低温冰箱； 2、对于原代胚胎干细胞/iPS细胞/其它珍贵细胞样本等冻存时，我们建议您在使用前，事先对所冻存的细胞进行至少为期1周的细胞冻存测试实验，确认没问题后再进行正式冻存； 3、本产品经3次0.22μm过滤除菌，使用本产品时应注意无菌操作，避免污染； 4、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作； 5、本产品仅用于科研用途，不可用于诊断、治疗、临床及其他用途。 |
1、使用本产品时应注意无菌操作，避免污染； 2、2℃～8℃中解冻，摇匀后使用，请勿反复冻融，用量较少时建议分装冻存； 3、不宜长时间放置于室温环境中，初次融化后可在2℃～8℃避光保存至少一个月； 4、使用时如有少量蛋白析出，可以直接使用，不会影响冻存效果，也可离心去沉淀后使用； 5、冻存后的细胞请勿在-80℃保存超过一个月，长期保存应放置于液氮中； 6、冻存细胞时，请将细胞冻存管管盖拧紧，以免液氮內渗，而导致细胞复苏时发生冻存管炸裂危险； 7、因本品中含有DMSO，使用时请做好防护措施，避免与皮肤直接接触； 8、本产品仅用于科研或进一步研究使用，不用于诊断和治疗。 |
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文献和实验原代细胞冻存技术：1、选用生长情况好，数量较多的原代细胞，冻存前一天换液一次。2、贴壁细胞需用0.25％胰酶常规消化将细胞消化下来，将细胞悬液收集至离心管中。3、1000rpm离心5分钟，弃上清液。4、沉淀加含DMSO的培养液，计数，调整至（1-10）×106 /ml。5、将悬液分至冻存管中，每管1 ml。6、密封冻存管，封口一定要严，否则复苏时易出现爆裂。7、用记号笔标明细胞种类，冻存日期。8、按下列顺序降温：室温→4℃（20分钟〕→冰箱冷冻室（30分钟）→超低温冰箱（－80℃过夜）→液氮。
液界 liquid junction 指二种浓度或不同组成的电解质的接触面。液界可简单地把比重轻的溶液由重叠在重液之上而形成，但随着时间的进行，由于扩散或对流等可多少出现液体的混合。为防止混合可采取放置多孔质的膜以延缓扩散，或不断流动液体更新液界等方法。在液界上可产生液界电位（ liquid junction potential， EL ）。比较简单的是在浓度不同的同一种一价的电解质溶液间或浓度相同并且具有共同的离子的不同的电解质溶液间的情况下，液界电位的大小与液界的混合
在园子里经常看到询问冻存、复苏细胞的方法和注意事项。故介绍一些致命的 “败笔”，和解决方法。 希望对大家有帮助。 （ 以 Raji 为例） 一、细胞冻存： 1. 错误的时机： 细胞状态不好（长的太过了，培养液已经很黄；细胞可疑污染；细胞已 经开始凋亡或崩解；连续培养超过二个月，细胞性状已有改变改变）。 解决： 最佳时机：细胞增殖旺盛，情况稳定，试验效果良好，复苏后两周内。 2. 细胞太少： 冻存时细胞浓度低于 1-5×1000,000/ml。（复苏很难成功）。 解决： 离心后调整细胞
