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- BJ-P10623
- 2025年07月12日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
负20度
- 保质期：
详见说明书
- 英文名：
Radix aconiti preparata
- 供应商：
上海邦景
- 规格：
50次
特异性强
PCR反应的特异性决定因素为：
①引物与模板DNA特异正确的结合；
②碱基配对原则；
③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性；
? ④靶基因的特异性与保守性。
参数规格：
产品规格：50T
产品运输：低温运输
产品保存：-20℃保存
产品有效期：一年
实验步骤：
典型的PCR由
（1）高温变性模板；
（2）引物与模板退火；
（3）引物沿模板延伸三步反应组成一个循环，通过多次循环反应，使目的DNA得以迅速扩增。其主要步骤是：
将待扩增的模板DNA置高温下（通常为93℃-94℃）使其变性解成单链；
人工合成的两个寡核苷酸引物在其合适的复性温度下分别与目的基因两侧的两条单链互补结合，两个引物在模板上结合的位置决定了扩增片段的长短；
耐热的DNA聚合酶（Taq酶）在72℃将单核苷酸从引物的3’端开始掺入，以目的基因为模板从5’→3’方向延伸，合成DNA的新互补链。
制川乌LAMP鉴定试剂盒具有下列特点：
1.根据 指标的保守序列设计的专一性引物，与相关病毒无交叉反应。
2.灵敏度比常规 PCR 高 2-3 个数量级，可以达到几百拷贝/反应。
3.即开即用，用户只需要提供样品模板，操作简单，定量准确快速。
4.一管式荧光定量 PCR 检测，避免后续污染。
5.本试剂盒足够 50 次 20μL 反应体系的荧光定量 PCR。
6.本产品只适用于科研，不能用于临床诊断。
注意事项：
1. 建议使用新鲜采取的动物组织，若为长期冷冻组织，应尽量避免反复冻融，否则会导致模板的降解，影响PCR效率。
2. 试剂Buffer AL若低温保存，易产生沉淀。在使用前务必将其在室温中放置一段时间，也可在37℃水浴中预热10 min，以溶解沉淀，混匀后再使用。
3. 电泳检测时，切勿使用含有SDS的Loading Buffer。否则，电泳时会在泳道中出现一大团拖尾亮带，影响实验结果。
4. 建议扩增片段长度1 kb以内，以便扩增效率佳。
5. 为了您的安全和健康，请穿实验服并佩戴一次性手套操作。
使用方法：
一、稀释PCR阳性对照（以10E2-10E7拷贝/μL这6个10倍稀释度为例）
1. 注意：由于标准品浓度非常高，因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行，千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分）。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原，本产品不提供活体样品做阳性对照，只提供可以直接使用的DNA片段作为阳性对照。
2. 标记6个离心管，分别为7，6，5，4，3，2。
3. 用带芯枪头分别加入45 μL荧光PCR专用模板稀释液（用带芯枪头，下同）。
4. 在7号管中加入5 μL 1×10E8拷贝/μL 的阳性对照，充分震荡1分钟，得1×10E7拷贝/μL的阳性对照。放冰上待用。
5. 换枪头，在6号管中加入5 μL 1×10E7拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得)，充分震荡1分钟，得1×10E6拷贝/μL的阳性对照。放冰上待用。
6. 换枪头，在5号管中加入5 μL 1×10E6拷贝/μL的阳性对照到5号管中，充分震荡1分钟，得1×10E5拷贝/μL的阳性对照。放冰上待用。
7. 重复上面的操作直到得到6个稀释度的阳性对照。放冰上待用。
二、样品DNA的制备
8. 如果有N个样品，必须设置N+2个提取，多出的一个是PC（样品制备阳性对照），一个是NC（样品制备阴性对照）。可以用10μL上步制备的PCR阳性对照的第4号（浓度为1×10E4 拷贝/μL，10μL相当于1万拷贝）或第5号（浓度为1×10E5 拷贝/μL，10μL相当于10万拷贝）再加上一定量的水使总体积跟每次制备要求的体积一样，以此作为PC。另外用水作为NC。如果每次制备需要200μL样品，则PC和NC的体积也必须是200μL。
9. 用自选方法纯化样品的DNA，本试剂盒跟市场上大多数病毒DNA提取试剂盒兼容。
三、设置qPCR反应（20 μL体系，在样品制备室进行）
10. 如果只做1次重复，则标记N+9个PCR管，其中N+2个用于上步得到的N+2个样品，1个用于PCR阴性对照，6个用于PCR阳性对照。如果做2-3次重复，则反应设置数量相应增加2或3倍。
11. 产品仅用于科研在标记管中按下表加入各成分（本表只列出一次重复。样品管和阴性对照设置完毕后才设置阳性对照，并且阳性对照样品要等所有管子盖上盖子储存好后加）。间隙连接蛋白40抗体 Anti-Cx40 0.1ml -0265
间隙连接蛋白43抗体 Anti-Cx43 0.1ml -0266
间隙连接蛋白45抗体 Anti-CX45 0.1ml -0267
细胞表面趋化因子受体1抗体 Anti-CXC-R1 0.2ml -0268
细胞表面趋化因子受体3抗体 Anti-CXC-R3/CD183 0.2ml -0269
趋化因子配体1抗体 anti-cx3cl1 0.1ml -0270
制川乌LAMP鉴定试剂盒脱羧酶蛋白体36抗体 Anti-CXorf36 0.2ml -0271
周期素A抗体 Anti-Cyclin A 0.1ml -0272
周期素B1抗体 Anti-Cyclin B1 0.1ml -0273
周期素C抗体 Anti-Cyclin C 0.1ml -0274
周期素D1抗体 Anti-Cyclin D1 0.1ml -0275
周期素D2抗体 Anti-Cyclin D2 0.1ml -0276
周期素E/原癌基因抗体 Anti-Cyclin E 0.1ml -0277
周期素H抗体 Anti-Cyclin H 0.2ml -0278
细胞球蛋白抗体 Anti-Cygb 0.1ml -0279
细胞色素P450单氧化酶抗体 Anti-CYP450 0.2ml -0280
富半胱氨酸肝素结合蛋白61 anti-Cyr61 0.2ml -0281
细胞色素P450 19抗体 anti-CYP19 0.2ml -0282
细胞色素 C抗体 Anti-Cytochrome C 0.1ml -0283
细胞角蛋白抗体 Anti-Cytokeratin 0.1ml -0284
人巨细胞病毒PP65/CMV低基质磷脂蛋白抗体 Anti-anti-HCMV PP65/HHV5 PP65 0.1ml -0285
人巨细胞病毒UL49抗体 anti-HCMV UL49 0.2ml -0286
人巨细胞病毒UL23抗体 anti-HCMV UL23/HHV5 UL23 0.1ml -0287
多巴胺受体-D1抗体 Anti-DAD1 0.1ml -0288
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文献和实验长度可达 20kb，适合于各种 GC 含量的扩增，可用于多种样本的直接 PCR 如植物叶片、全血等。且扩增仅需 30s/kb，甚至于 2kb/s。如此卓越，爱不释手了吧？ 4. 选择直接扩增试剂盒对粗品扩增 vazyme 生产的各种直扩试剂盒，直接对粗品进行扩增，大大减少了实验的工作周期。如小鼠基因型鉴定可以直接使用 One Step Mouse Genotyping Kit，全血扩增可以直接使用 Blood Direct PCR Kit V2。
组织WHO、各国学者和相关政府部门的关注，短短几年，该技术已成功地应用于SARS、禽流感、HIV等疾病的检测中，在这次甲型H1N1流感事件中，日本荣研化学公司接受WHO的邀请进行H1N1 LAMP试剂盒的研制。通过荣研公司近十年的推广，LAMP技术已广泛应用于日本国内各种病毒、细菌、寄生虫等引起的疾病检测、食品化妆品安全检查及进出口快速诊断中，并得到了欧美国家的认同。LAMP方法的优势除了高特异性、高灵敏度外，操作十分简单，对仪器设备要求低，一台水浴锅或恒温箱就能实现反应，结果的检测也很简单，不需要像PCR
。 外泌体分离方法有很多种，包括超速离心、过滤离心、密度梯度离心、免疫磁珠和商用试剂盒。但是这么多方法中，我们通常推荐选用超速离心法进行提取和分离，因为超速离心方法得到的外泌体不管是从得率还是纯度上都比较好。其他方法的特点如下： 过滤离心：得率比较低 密度梯度离心：步骤繁琐，得率较低 免疫磁珠：特异性比较高，得率较低 商用试剂盒：价格高，效果一般 综合以上，超速离心法是目前价格适中、得率和纯度都能兼得的一种方法。 四、如何鉴定外泌
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