- ¥1490
- 信裕生物
- XY-1462P
- 国产/进口
- 2025年07月11日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
20
- 英文名：
Fusarium solani
- 保质期：
一年
- 供应商：
上海信裕生物科技有限公司
- 保存条件：
-20℃
Fusarium solani. PCR Kit
本产品包含Taq DNA聚合酶、dNTPs、MgCl2、反应缓冲液，浓度为2×。具有快速简便、灵敏度高、特异性强、稳定性好等优点，可最大限度的减少人为误差。使用时只需加入DNA模板和引物既可。使用方便快捷，能避免PCR操作过程中的污染，使用时只需取适量2×TaqPCR MasterMix溶液，加入模板和引物，并加入去离子水补足体积，使MasterMix溶液浓度为1×即可进行反应。使用前请保证充分溶解并混匀，操作需在冰上进行。
Taq：扩增效率最高的耐热 DNA 聚合酶，其扩增速度约为 1-2kb/min。扩增碱基出错率为 10-5 左右。其产物未端带有 A，可直接用于 TA 克隆。
Pfu：目前保真度最高的耐热 DNA 聚合酶，碱基出错率为 10-6，但扩增效率低于 Taq 酶， 一般能很好的扩增 2kb 以下的片段。其扩增速度约为 500bp/min 左右。其产物为平未端，须加 A后才可用于 TA 克隆。
Taq Plus：Taq 和 Pfu 的等比混合物。集扩增效率高和保真度好于一身。扩增效率比 Pfu 高， 保真度比 Taq 好。其扩增速度约为 1000bp/min 左右。其产物未端带有 A，可直接用于 TA 克 隆。 含染料 PCR MasterMix 反应完后可以直接电泳检测。不含染料的 PCR MasterMix 反应完后 加入上样缓冲液后电泳检测。
| 产品名称 | 方法 | 规格 | 价格 |
| 茄病镰刀菌LAMP试剂盒 | LAMP | 50次 | 2490元 |
| 茄病镰刀菌PCR试剂盒 | PCR | 50次 | 1490元 |
| 茄病镰刀菌染料法荧光定量PCR试剂盒 | 染料法 | 50次 | 2490元 |
| 茄病镰刀菌探针法荧光定量PCR试剂盒 | 探针法 | 50次 | 3490元 |
1. 即开即用，用户只需要提供 DNA 模板。
2. 引物经过精心优化，专一性强，只扩增茄病镰刀菌，与其他微生物没有交叉反应。
3. 提供阳性对照，便于区分假阴性样品。
4. PCR mix 中含上样染料，PCR 后可以直接上样电泳。
5. 本试剂盒足够做 40μL 体系的 PCR 50 次，但只能用于科研。
规格及成分
| 成分 | 编号 | 十孔盒包装 |
| PCR MagicMix 3.0 | 试剂一 | 1 mL（红盖） |
| 超纯水 | 试剂二 | 1 mL（亮黄色） |
| 茄病镰刀菌PCR引物混合液 | 试剂三 | 100 μL（白盖） |
| 茄病镰刀菌PCR 阳性对照 （1×10E8 拷贝/μL） |
试剂四 | 50 μL（黄盖） |
| 核酸释放剂（试用装） | 试剂五 | 20 次（1 mL，绿盖） |
| 使用手册 | 试剂六 | 1 份 |
自备试剂：样品 DNA。
使用方法：
一、样品 DNA 的制备
1. 用自选方法纯化 N+2 个样品的 DNA，本试剂盒跟市场上大多数核酸提取试剂盒兼容。本试剂盒免费赠送20 次核酸释放剂试用装，其使用手册可以从本公司网站订购核酸释放剂。
2. 如果有 N 个样品，则需要做 N+2 个提取，包括一个样品制备阳性对照和一个样品制备阴性对照。样品制备阳性对照是在适量水（取决于试剂盒要求的样品起始量）中加 10μL 补骨脂 PCR 阳性对照的 1000 倍稀释液而得，样品制备阴性对照是直接用水。提取结束后最后得到模板 DNA 放冰上待用。
二、设置 PCR 反应（40μL 体系）
3. 对 N+2 个样品，在 PCR 时需要增加一个 PCR 阳性对照和一个 PCR 阴性对照，故需要设置 N+4 个反应。在 N+4 个 PCR 管中分别加入下列成分：
| 成分 | N+2 个样品管 | PCR 阴性对照 | PCR 阳性对照 |
| PCR MagicMix 3.0 | 各 20 μL | 20 μL | 20 μL |
| 茄病镰刀菌PCR引物混合液 | 各 2 μL | 2 μL | 2 μL |
| N+2 个样品 DNA 模板 | 各 18 μL | -- | -- |
| PCR 阴性对照（水） | -- | 18 μL | -- |
| PCR 阳性对照（茄病镰刀菌PCR阳性对照的 1000 倍稀释液） |
-- | -- | 18 μL |
- 按下表设置 PCR 反应：
| 过程 | 温度 | 时间 |
| 预变性 | 95℃ | 5 min |
| PCR 反应（35 个循环） | 95℃ | 15 sec |
| 57℃ | 15 sec | |
| 72℃ | 40 sec | |
| 最后延伸 | 72℃ | 10 min |
5. 取 10-20 μL PCR 产物。电泳检测 PCR 产物。本产品提供的 PCR Mix在扩增结束后可以直接上样，不需要另外再加 loading buffer。PCR 产物阳性对照必须有预期条带出现，阴性对照必须无任何扩增，否则实验无效。对没有扩增产物的样品，可以稀释 10 倍后重复 PCR 扩增以排除 PCR 抑制剂的感染。
茄病镰刀菌PCR试剂盒常见问题与解决方法:
| 常见问题 | 可能原因 | 解决方法 |
阳性对照、待测样本均无条带。 |
PCR反应体系或反应条件不合适。 | 使用梯度PCR摸索PCR反应条件。 |
| PCR试剂保存不当失去活性。 | 2× PCR Mix应保存于-20℃，使用时避免反复冻融。若使用频繁，可在4℃短时间存放。 | |
| 引物设计问题。 | 尝试重新设计引物进行检查。 | |
阳性对照有目的条带，待测样本无条带或条带弱。 |
不当储存或长期储存引起试剂活性丧失。 | 使用新鲜的试剂。 |
| 加入组织裂解液过量。 | 增大反应体系，或减少裂解液的用量。 | |
| 样本裂解混合液保存不当或保存时间过久，DNA基因组已经降解。 | 裂解混合液液可在4℃保存2-3天，尽量使用新制备的裂解液混合液进行PCR。 | |
| 模板加入量不适合。 | 在反应体系10-20%范围内优化模板加入量。反应效性能较差时，可以降模板浓度调节到低于10%的范围。 | |
| PCR循环数不足。 | 适当增加PCR的循环数，推荐在35-40循环为佳。因为模板复杂，一般PCR反应要比用纯化的 DNA模板多5-10个循环为佳。 | |
非特异性扩增 |
PCR退火温度太低，循环数、引物浓度或模板浓度太高。 | 增加PCR退火温度，降低PCR循环数、引物浓度或模板浓度。 |
| PCR引物错配。 | 重新设计PCR引物。 | |
| 配制PCR反应体系时温度太高或配制完成后放置时间太久。 | PCR反应体系的配制在低温下进行，配制完成后尽快进行PCR扩增反应。 | |
阴性对照出现目的条带 |
操作工具或试剂污染。 | 实验所有试剂或器材均应高压灭菌。操作时应小心轻柔，防止将靶序列吸入加样枪内或溅出离心管外。 |
| 样本间交叉污染。 | 每个取样器只对一个样本使用；或取完一个样本后，将取样器刃口浸入2%的次中，反复涮洗，然后用干净的纸巾擦干残液。 |
特别提示：本公司的所有产品仅用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！
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文献和实验，初呈乳白色胶状物，后变成放射状白色物，最后呈黄色绵毛状物，俗称“水杨梅”；立枯病是由镰刀菌侵染后最初以根、芽基部为中心长出白色菌丝体，很快变褐导致幼芽和幼根变褐、扭曲、腐烂、又称“芽腐”，后期病基部长出粉红色霉状物。烂种主要是由于种子贮藏时受潮或种子消毒方法不善或催芽时温度和水分控制不当等原因所致。生理性烂秧主要有秧田操作质量差，催芽、播种及水浆管理不当，或不利环境及土壤中未腐熟有机物多而产生的还原性有毒物质所致。 [防治]水稻烂秧的防治以农业防治为根本措施。狠抓种子浸种、催芽、播种
较一致的胶原纤维（原纤维显现）。病变如进一步发展则液化溶解形成空泡或裂隙。随着基质的变性，软骨细胞发生空泡变性，严重时，胞浆变为蜂窝状，胞核常被挤到一侧。有时可见软骨基质中水分增多，液化而淡染，其中游离的软骨细胞由正常的圆形变为星芒状，似粘液细胞，称为软骨粘液变性。变性严重时可发生坏死，软骨细胞核固缩消失，最后只剩下细胞轮廓。 软骨的坏死首先出现于关节软骨的深层与骨质交界处，早期为灶性或片状，以后相邻病灶互相融合而形成明显的坏死带（图17-13），有人认为这种带状坏死对本病有诊断
，以后相邻病灶互相融合而形成明显的坏死带（图17-13），有人认为这种带状坏死对本病有诊断意义。 图17-13 大骨节病 关节软骨深层的带状坏死 在软骨的坏死区边缘或带状坏死的一侧健存的软骨细胞活跃增生，通过细胞直接分裂而形成大小不等的软骨细胞团（图17-14），一般呈圆形或椭圆形，由数个或数十个细胞构成。这些软骨细胞体积较小，其间的软骨基质也很少。 图17-14 大骨节病
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