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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
24
- 英文名:
AlamaBlue Cell Viability Assay Kit
- 保质期:
有效期一年
- 供应商:
上海莼试
- 保存条件:
-20℃避光保存
- 规格:
详见说明书
Alarma Blue细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒尽管经测试Annexin V-FITC反复冻融5次对于其检测效果无显著影响,但为取得良好的使用效果,3-6个月内推荐4℃保存,并适当注意避免反复冻融。
如果有细菌或真菌污染,会严重影响检测效果。
染色后宜尽快检测,时间过长可能会导致凋亡或坏死细胞的数量增加。
如果细胞收集过程中使用了胰酶,需注意设法去除残留的胰酶。残留的胰酶会消化并降解Annexin V-FITC,导致染色失败。
荧光物质均易发生淬灭,在进行荧光观察时,尽量缩短观察时间,同时在操作和存放过程中也尽量注意避光保存。
用于流式细胞仪检测时,如果发现Annexin V-FITC单独染色时出现了过多的PI假阳性细胞,并且通过调整相关设置和参数也无法改善,可以用PBS将Annexin V-FITC稀释3-10倍后再进行检测,这样通常可以有效减少假阳性的坏死细胞。
需自备PBS。
本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
中文名称:Alarma Blue细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒
英文名称:AlamaBlue Cell Viability Assay Kit
产品规格:500T
发货周期:1~3天
AlamaBlue 细胞活力检测试剂盒提供了一种可靠、灵敏、安全和低成本的快速有效检测细胞活力与毒性的方法。AlamaBlue 通过在细胞生长的培养基中所产生的化学还原反应,将非荧光信号的染料转换成为一红色荧光物质,试卤灵(9羟基3异吩恶嗪酮7羟基3H吩恶嗪3酮),从而检测细胞的存活率。维持细胞需要还原性环境而抑制生长则表现为氧化型环境。细胞生长率相关的降低可表现为氧化还原指示剂从氧化型(非荧光素、紫色)转为还原型(荧光素、红色)。该荧光信号可以用530~560nm 的激发波激发,在590nm 处可以获发射波,检测570 和600nm 的的吸光度值,校正监测值,可以减去相应的570nm 和600nm 的背景吸光度值。检测所产生的荧光信号是与样品中的活细胞数成正比的。
AlamaBlue 细胞活性检测试剂盒的灵敏度相似于[3H]胸苷法检测细胞增殖法。根据不同类型的细胞,AlamaBlue 可以检测到至少40个细胞,同时保证很好的重现性和灵敏度。作为试卤灵(紫红、红色荧光)可以进一步被还原为水解化的试卤灵(无色、无荧光),当细胞数量增多,所有的刃天青(7羟基3羰基10氧化三氢吩恶嗪)被转换为试卤灵(9羟基3异吩恶嗪酮7羟基3H吩恶嗪3酮),试剂盒的信号反而会发生衰减。因此,对于您所用的试剂盒来说,针对不同的细胞类型,应该调整您的细胞数,做相应的优化,才能得到更好的结果。
操作说明
以下操作可用作通用指导建议。考虑不同细胞类型与培养条件的差异性,有必要根据实际情况优化您的操作步骤。
1. 96 孔细胞培养板每孔100μL 培养基饲养细胞,控制细胞数目在40~10000 个/贴壁细胞,2000~500000 个/悬浮细胞。设置空培养基做对照。
2. 加入10μL AlamaBlue 溶液至培养基中,37 度孵育:24 小时(比色法读数);56 小时(荧光读数)。
3. 检测570nm 和600nm 的吸光度,或者用荧光微孔板读数530nm 激发,590nm 发射波读数。
4. 如果采用比色法检测,选择OD570OD600 检测,如果检测荧光信号,请在校正OD 值后,先设置标准曲线,选择合适您实验的细胞最佳浓度。
细胞培养的优点:
1.研究的对象是活细胞
在实验过程中,根据要求可始终保持细胞活力,并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况,包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制
pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件,可以根据实际需要进行人为的控制,同时,可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察,这些因素同样可以处于严格控制之下。
3.研究的样本可以达到比较均一性
通过细胞培养一定代数后,所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞,需要时,可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
4.研究内容便于观察、检测和记录
采用各种研究技术:如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。
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细胞生物学研究有以下几个方面。
细胞生物学的研究内容十分广泛,主要包括。
①细胞核、染色体以及基因表达的研究。
②生物膜与细胞器的研究。
③细胞骨架体系的研究。
④细胞增殖及其调控。
⑤细胞分化及其调控。
⑥细胞的衰老与编程性死亡(凋亡)。
⑦细胞的起源与进化。
⑧细胞工程。
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文献和实验简介 细胞增殖/细胞毒性测定是涉及培养细胞的研究中最常用的测试之一。 其是检查用于治疗的药物浓度的基本初步测试,也是确定各种研究领域(如肿瘤学和细胞死亡)药物疗效和安全性的非常重要的测试。 传统上,WST-8 或 ATP 检测(使用代谢活性作为指标)和 BrdU 或胸腺嘧啶核苷检测(使用 DNA 合成水平作为指标)已用于细胞生长特性的定量评估。 尽管这些检测由于其简易性和吞吐量而对我们有益,但这些检测都是间接评估方法,因此结果可能与实际细胞数无关。 在许多情况下,这些检测是终点评估,有时会
一、实验原理 细胞活力检测试剂盒(CCK-8) 可用于简便而准确的细胞增殖和毒性分析。 其基本原理为:该试剂中含有WST-8【化学名:2-(2-甲氧基-4-硝基苯基)-3-(4-硝基苯基)-5-(2,4-二磺酸苯)-2H-四唑单钠盐】,在电子载体1-甲氧基-5-甲基吩嗪鎓硫酸二甲酯(1-Methoxy PMS)的作用下被细胞中的脱氢酶还原为具有高度水溶性的黄色甲瓒产物(Formazan dye)。生成的甲瓒物的数量与活细胞的数量成正比。因此可利用这一特性直接进行细胞增殖和毒性分析。CCK-8法
CCK 试剂盒,为 MTT 法的替代方法,是一种基于 WST(水溶性四唑盐,化学名:2 -(2 - 甲氧基 - 4 - 硝苯基)- 3 -(4 - 硝苯基)- 5 -(2,4 - 二磺基苯)- 2H - 四唑单钠盐)的广泛应用于细胞增殖和细胞毒性的快速高灵敏度检测试剂盒。CCK 法与其它检测方法之间的比较
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