SDS-PAGE彩色预混胶（12%分离胶）

垂直电泳槽的使用

实验材料 •BSA（1 mg/ml），0.05 g的BSA(Sigma-Aldrich Ltd.)溶于50ml ddH2O中，每Eppendorf管约加入1ml溶液，并在-20℃下冷冻。 •预染色marker (Bio-Rad) •ProMarker(Wealtec) •两套玻璃板与校正卡，厚玻璃板与U形玻璃板，0.75 mm厚胶条和一个0.75 mm 10齿梳（Wealtec） •浓度为12％的SDS-PAGE分离胶（0.75 mm）;2.31 ml ddH

干货：小分子量蛋白（11KD）WB实验艰辛历程及经验总结

泳吧。4、在我用SDS-PAGE胶进行电泳过程中，一直以来都是按照说明书配制压缩胶和分离胶的，并且在说明书中，以配置2块胶为例，分离胶说明书中是让配置10ml，压缩胶是3ml。我一直以为是对应关系，在这次大悟之后我发现分离和压缩完全不是一对一对应关系，人家只是给了你配置这么多体积胶的配方而已，虽然在一个纵列上，但是绝不是对应关系（我确实才觉悟，高手轻鄙视哈）。5、接上一条经验，所以我在配胶过程中，下层分离胶配制了10ml，但是实际上每块玻板里面只加了大概3.5ml吧，也就是整个玻板高度的60-70%的样子。然后压缩

如何做出一手漂亮的 WB 结果？| 实验

对将目的蛋白清晰从分子量大小类似蛋白中清晰分离出来很重要，常见 SDS-PAGE 分离胶浓度为 8% 和 12.5% 两类，分子量大小不同靶蛋白应选择合适浓度分离胶。*选择脂质合成限速酶基因（ACC1，265kD）和甘油三酯酯酶（ATGL，55kD）用于探讨分离胶浓度分离效果，下文中除去探讨条件外其余条件皆一致。1.对分子量较大的蛋白质（>200kDa）2．对分子量较小的蛋白质(（二）转膜条件*转膜时间、电压和转膜缓冲液甲醇比例等对结果影响较大，因此根据研究的靶蛋白特点选择合适转膜条件至关