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江西江蓝纯生物试剂有限公司
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187
- 适应物种：
人/植物/小鼠/大鼠/动物
目前，我公司的可溶性环氧化物水解酶试剂盒采用的原理为：可见区的显色反应和紫外区的某一物质变化量。某物质与显色剂反应后，形成区别于自身的颜色反应，在某一波长下，吸光度的强弱与物质的含量呈正比关系。
其显色反应的示意图如下：
保证试剂盒测定温度一致的措施通常如下：
1. 优先选用带温控装置的仪器，如高档分光光度计或者酶标仪，可以直接设定需要的温度，但要注意预热。
2. 打开房间的空调，根据天气情况设定制冷或者加温，并且待室温稳定后再开始测定。
3. 提前一小时冰箱中取出试剂，放到室温中。还可以利用水浴锅保温反应体系中体积的试剂，通常是缓冲液。这样，即使不是指定测定温度，但是可以保证不同样品基本在几乎同样的温度下测定。
4. 如果当地温差变化大，一定要注意调整室温。
注意：可溶性环氧化物水解酶试剂盒 待中保温的试剂应该先放到水浴锅中，然后加温到指定温度，这样可以保证试剂盒温度与水浴锅温度一致；或者待保温试剂要在已经达到指定温度的水浴锅中保温超过半小时以上。
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文献和实验脏蛋白提取得到蛋白质图谱[1]： 图 1：从小鼠脾脏和肝脏中使用不同方法提取总蛋白的蛋白图谱 条带 1 为柱式法提取的蛋白样品，条带 2 为 RIPA 可溶组分（RIPA 裂解后的上清），条带 3 为 RIPA 不可溶性组分（丢弃的沉淀部分）。实验发现 RIPA 的不可溶组分蛋白质图谱与可溶性组分图谱相似，但是不完全相同。 丢弃的不可溶组分中仍然可检测到许多蛋白条带，覆盖了整个蛋白质图谱分子量范围，不同样品的不可溶组分图谱也各不相同。丢失的蛋白会引起蛋白图谱发生变化，改变不同种类蛋白的比例，且具有
多篇 SCI 发现用 RIPA 提蛋白存在问题，我们该如何应对？
相互作用）及其他成分。虽然 RIPA 裂解液经过不断改良使用，但是 RIPA 提取蛋白通常会产生两个不同的部分：即 RIPA 可溶组分和 RIPA 不可溶组分。 一般来说，只有 RIPA 可溶组分被用于下游实验，而 RIPA 不可溶组分被丢弃。这样提取的蛋白在使用中会存在哪些问题呢？先来看些文献数据：研究发现，不同的蛋白在 RIPA 裂解液中溶解性不同，例如 F9 中的纤维连接蛋白不溶于 RIPA 裂解液 [2] 。而小鼠额叶样品中在 RIPA 可溶组分和非可溶性组分中含有相同量的 Septin
2）。 图2 硝基苯和偶氮苯的还原反应 肝微粒体中含有多种水解酶，如酯酶、酰胺酶、糖苷酶等，可分别催化酯类、酰胺类、糖苷类化合物的水解（见图3），以降低或消除其生物活性。 图3 乙酰水杨酸的水解反应 02 Ⅰ相代谢稳定性实验原理 肝药酶CYP即细胞色素P450氧化酶（CYP450），属于单加氧酶（momooxygenase），也称肝微粒体混合功能氧化酶，多位于内质网和线粒体内壁上，参与药物、致癌物、类固醇激素和脂肪酸等多种内、外源性物质代谢。肝药酶CYP氧化还原酶（POR）是所有肝
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