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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
27
- 英文名:
Rabbit anti-Biotin
- 保质期:
详见说明书
- 供应商:
上海研生
- 保存条件:
详见说明书
- 规格:
瓶
1. 对于培养细胞样品
(1) 融解RIPA裂解液,混匀。取适当量的裂解液,在使用前数分钟内加入PMSF (CAT:AP02L014),使PMSF的终浓度为1 mM。
(2) 细胞裂解
对于贴壁细胞:去除培养液,用PBS、生理盐水或无血清培养液洗一遍(如果血清中的蛋白没有干扰,可以不洗)。按照6孔板每孔加入150~250 μL裂解液的比例加入裂解液。用枪吹打数下,使裂解液和细胞充分接触。通常裂解液接触细胞1~2 s后,细胞就会被裂解。
对于悬浮细胞:离心收集细胞,按照6孔板每孔细胞加入150~250 μL裂解液的比例加入裂解液,混匀,充分裂解细胞。充分裂解后应没有明显的细胞沉淀。如果细胞量较多,需分装成50~100万细胞/管,然后再裂解。具体RIPA裂解液的使用量参照表2。
(3) 充分裂解后,10000~14000 rpm离心3~5 min,取上清,即可进行后续的PAGE、Western和免疫沉淀等操作。
2. 对于组织样品
(1) 把组织剪切成细小的碎片;
(2) 融解RIPA裂解液,混匀。取适当量的裂解液,在使用前数分钟内加入PMSF,使PMSF的最终浓度为1 mM;
(3) 按照每20 mg组织加入150-250 μL裂解液的比例加入裂解液。如果裂解不充分可以适当添加更多的裂解液,如果需要高浓度的蛋白样品,可以适当减少裂解液的用量,具体RIPA裂解液的使用量参照表2。
(4) 用玻璃匀浆器匀浆,直至充分裂解。
(5) 充分裂解后,10000~14000rpm离心3~5 min,取上清,即可进行后续的PAGE、Western和免疫沉淀等操作。
产品名称:兔抗生物素规格
英文名称: Rabbit anti-Biotin
储存条件: -20°C
纯度: 1mg/0.2ml
单位: 瓶
其它:
备注:产品信息可能会有优化升级。请以实际标签信息为准。
参数规格:
| 产品名称 | 兔抗生物素规格 |
| 英文名称 | Rabbit anti-Biotin |
| 货号 | YS-D4379 |
注意事项:
1、本试剂为强烈型裂解液,可以提取核蛋白,但在提取核蛋白的同时,也会将基因组一并释放出来,造成细胞裂解液粘稠,此时可以直接加入蛋白上样缓冲液,煮沸再离心,离心后直接上样电泳;若想测定浓度,可入加少量SDS(1%),煮沸后离心测浓度。本系列蛋白提取试剂所提取的蛋白由于含有去污剂,所以不适合使用Bradford蛋白浓度测定试剂盒,请选择BCA法或者Lowry法检测蛋白浓度。
2、如果需要检测和基因组结合特别紧密的蛋白,则可以通过超声处理打碎打散粘稠状物,随后离心取上清用于后续实验。
下列是兔抗生物素规格的相关产品:
Homo sapiens (Human)化钾KCN培养基
蔗糖铁ANG-1 ELISA Kit
Homo sapiens (Human)培养基
2-溴-3-羟基苯醛ES-Ab ELISA Kit
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1,3,5-三(
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文献和实验磁珠,并可接受订制服务。三、Dynabeads的使用方法Dynabeads可加入到不同种类的悬浮液中以结合靶物质(如细胞、核酸、细菌或其他生物分子),形成一种Dynabeads·靶物质混合物,在通过磁分离器(如Dynal MPC)后可以将该混合物从悬液中移去。四、Dynal MPC 磁分离器的优点1、操作简便2、磁性强久3、适合多种体积(50μl~50ml)4、分离迅速目录号产品说明规格价格(RMB)120.01Dynal MPC-1 for 5ml - 50ml tubes1 unit
系统。即可将不同部位或相同部位的两种抗原显示出来。该方法用于石蜡切片时应考虑所选择的两个抗体的修复方法应该一致或一个抗体的修复对另一个抗体的染色结果没有影响。 SP法双重染色步骤 1~6步骤与SABC法相同,但无需使用生物素阻断剂: 7.切片加入A特异性抗体(如兔抗A抗体),4=C过夜孵育后,PBS冲洗3次,每次5分钟 8.滴加生物素化二抗(如抗兔二抗),室温孵育切片10分钟,继而PBS冲洗3次,每次5分钟; 9.滴加链霉菌抗生物素蛋白―碱性
ml 细胞裂解液加 950 ml RODI 水稀释到 1L,混匀。注意:使用前添加 1 mM PMSF。3. 蓝色上样缓冲液(SDS 上样缓冲液):(#7722)。 配制新鲜的 3 X 还原性 SDS 上样缓冲液,在 3X SDS 上样缓冲液中加入十分之一的 30X 的还原剂(1.25M)。4. 蛋白 A 或 G 琼脂糖微球(用于未标记的一抗):(处理后可以在 4 °C 保存 2 星期)。按照产品说明处理。蛋白 A 用于兔 IgG 抗体的沉淀,蛋白 G 用于小鼠 IgG 抗体的沉淀
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