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生物素化羊抗人IgG图片

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      Goat anti-Human IgG/Biotin

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      上海研生

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    产品名称:生物素化羊抗人IgG图片
    英文名称: Goat anti-Human IgG/Biotin

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    单位: 支
    其它:
      备注:产品信息可能会有优化升级。请以实际标签信息为准。
    产品细节图片1
    实验操作步骤:
    生物素化羊抗人IgG图片是用于测定细胞增殖或毒性实验中活细胞数目的一种高灵敏度,无放射性的比色检测法。CCK法应用非常广泛,如药物筛选、细胞增殖测定、细胞毒性测定、肿瘤药敏试验以及生物因子的活性检测等。下面以engreen的CCK8试剂盒为例,简要说明细胞增殖-毒性检测的操作步骤
    方法/步骤
    96孔板中配制100μl的细胞悬液。将培养板在培养箱预培养 24 小时 (在 37℃,5% CO2 的条件下)。
    向培养板加入 10μl 不同浓度的待测物质。
    将培养板在培养箱孵育一段适当的时间 (例如: 6,12, 24 或 48 小时)。
    向每孔加入 10μl CCK8 溶液(engreen) (注意不要在孔中生成气泡,它们会影响 OD 值的读数)。
    5. 将培养板在培养箱内孵育 1-4 小时。
    用酶标仪测定在 450 nm 处的吸光度。
    如果暂时不测定OD值,打算以后测定的话,可以向每孔中加10μl0.1 M HCl溶液或者1%wSDS 溶液,并遮盖培养板避光保存在室温条件下。在24小时内吸光度不会发生变化 。
    细胞周期检测的原理:
    PI法是经典的周期检测方法。PI为插入性核酸荧光染料,能选择性的嵌入核酸DNA和RNA双链螺旋的碱基之间与之结合,其结合的量与DNA的含量成正比例关系,用流式细胞仪进行分析,就可以得到细胞周期各个阶段的DNA分布状态,从而计算出各个期的百分含量。PI染色后,假设G0/G1期细胞的荧光强度为1,那么含有双份基因组DNA的G2/M期细胞的荧光强度的理论值为2,正在进行DNA复制的S期细胞的荧光强度为1-2之间。
    常用的细胞染色方法有:
    1.简单染色法,常用碱性染料如美蓝等进行简单染色;
    2.革兰氏染色法,主要包括结晶紫初染、碘液媒染、乙醇(或)脱色以及番红复染四个过程;
    3.瑞氏染色法,瑞氏染料溶剂主要是由伊红美蓝组成;
    4.吉姆萨染色法,吉姆萨染色原理与结果和瑞特染色法基本相同;
    5.细胞免疫荧光染色法,免疫荧光染色的主要原理是利用抗原抗体之间的特异性结合。
    蛋白提取/定量
    蛋白提取频道,提供蛋白提取实验用蛋白提取试剂盒,蛋白裂解液,蛋白浓度测定试剂盒等蛋白质实验用试剂及耗材。其中蛋白提取系列包括:植物蛋白提取试剂盒,细胞组织蛋白提取试剂盒,胞膜/细胞核蛋白提取试剂盒,全蛋白提取试剂盒等。

    产品细节图片2
    操作说明:
    一,微孔酶标仪法
    1.        完全溶解蛋白标准品,取10ml,加240ulPBS稀释至250ml ,使终浓度为0.2mg/ml。待测蛋白样品在什么溶液中,标准品也宜用什么溶液稀释。但是为了简便起见,也可以用0.9%NaCl或PBS稀释标准品。
    2.        5×G250染色液使用前请颠倒3-5次混匀,取1ml  5×G250染色液,加入4ml双蒸水,混匀成1×G250染色液,此1×G250染色液可在4℃保存一周。
    3.        将标准品按0, 2,4,6,8,12,16,20微升分别加到96孔板中,加PBS稀释液补足到20微升。
    4.        将样品作适当稀释(zui好多做几个梯度,如作2倍、4倍、8倍稀释),加20微升到96孔板的样品孔中。由于移液器在取小量时的误差,标准线前面的点可能不很准确,所以尽可能的让样品点落在标准线1/2后。
    5.        各孔加入200微升稀释后的1×G250染色液,室温放置3-5分钟。
    6.        用酶标仪测定A595,或560-610nm之间的其它波长的吸光度。
    7.        根据标准曲线计算出样品中的蛋白浓度。
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