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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
50
- 英文名:
APS
- 保质期:
1年
- 供应商:
上海信裕生物科技有限公司
- 保存条件:
常温
- 规格:
25g;100g;500g
(Ammonium persulfate, APS),常规生化试剂,作为一种强氧化剂,广泛用于聚合物化学研究。APS常用于聚凝胶的制备,其作用机理在于水溶液中,叔胺基如N,N,N,N-四甲基(TMEM)或3-二甲氨基丙晴(DMAPN)催化APS形成氧自由基。此自由基致使和N,N-亚甲基双胺聚合形成可用于筛分大分子的凝胶基质。APS通过光引发的交联化学反应可用于研究蛋白-蛋白相互作用。
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文献和实验,蛋白分子量小就要制高浓度的胶,分子量大的蛋白就制低浓度的胶,制不同厚度的胶所需的浓缩胶和分离胶体积也不一样。5%浓缩胶:30%Acr-Bis 1ml、A溶液1.5ml、无菌水3.5 ml、APS 75ul、TEMED 10ul。12.5%分离胶:30%Acr-Bis 5 ml、B溶液3 ml、无菌水3.9 ml、APS 150ul、TEMED 10ul。 加样、电泳过稍许时间等胶凝固后把蛋白marker和所需的鉴定的蛋白经处理后加到加样孔中,倒入电泳缓冲液接通电源开始跑胶。 染色、脱色
2O,2.8 ml浓度为30%的Acrylamide/Bis(29:1)(Bio-Rad),1.75 ml的1.5M Tris-CL,pH 8.8(Sigma-Aldrich Ltd.),70 μl浓度为10%的SDS(Bio-Rad),70 μl 10 %APS(Bio-Rad),2.8μl TEMED(Bio-Rad) •5%SDS-PAGE浓缩胶(0.75 mm); 1.7 ml ddH 2 O,0.415 ml 浓度为30%的Acrylamide/Bis(29:1)(Bio-Rad),0.315
1 h 甚至更长仍未聚合,应检查配制的操作有无错误。由于 TEMED 催化 APS 释放相关化学基团,再由 APS 释放的基团催化 Acr/Bis 聚合,所以如果 APS 不新鲜的话加再多的 TEMED 效果也不佳,这就是为什么推荐 APS 每周新鲜配置的原因。 4. 按说明书配积层胶,加入 TEMED 后立即摇匀即可灌胶。将剩余空间灌满浓缩胶然后将梳子插入浓缩胶中。灌胶时也要使胶沿玻璃板流下以免胶中有气泡产生。插梳子时要使梳子保持水平。由于胶凝固时体积会收缩减小,从而使加样孔的上样
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