HRP标记亲和素说明书

参数规格：

产品名称	HRP标记亲和素说明书
英文名称	Avidin/HRP
货号	YS-D4281

产品名称：HRP标记亲和素说明书
英文名称: Avidin/HRP
储存条件: -20℃保存至少一年，避免反复冻融。2-8℃可保存3-6个月。
单位: 瓶
其它:
产品简介：
公司公司研制的HRP标记亲和素是采用进口亲和素和高活性过氧化物酶HRP，用改良过的钠氧化法制成复合物，可广泛用于免疫病理、酶联免疫测定、基因探针及其他学科的放大检测系统。本产品每毫升含有1.5-2mg的Avidin和HRP，3mgBSA。
工作效价：ELISA法：1：500～1000
组织化学：1：30～100
免疫印迹：1：200～500。
斑点免疫：1：200～500。
具体效价以产品标签为准，最佳使用条件需根据所检测样本的抗原及一抗效价优化而定。
备注：产品信息可能会有优化升级。请以实际标签信息为准。

使用方法：
1. 对于培养细胞样品
(1) 融解RIPA裂解液，混匀。取适当量的裂解液，在使用前数分钟内加入PMSF (CAT:AP02L014)，使PMSF的终浓度为1 mM。
(2) 细胞裂解
对于贴壁细胞：去除培养液，用PBS、生理盐水或无血清培养液洗一遍(如果血清中的蛋白没有干扰，可以不洗)。按照6孔板每孔加入150~250 μL裂解液的比例加入裂解液。用枪吹打数下，使裂解液和细胞充分接触。通常裂解液接触细胞1~2 s后，细胞就会被裂解。
对于悬浮细胞：离心收集细胞，按照6孔板每孔细胞加入150~250 μL裂解液的比例加入裂解液，混匀，充分裂解细胞。充分裂解后应没有明显的细胞沉淀。如果细胞量较多，需分装成50~100万细胞/管，然后再裂解。具体RIPA裂解液的使用量参照表2。
(3) 充分裂解后，10000~14000 rpm离心3~5 min，取上清，即可进行后续的PAGE、Western和免疫沉淀等操作。
2. 对于组织样品
(1) 把组织剪切成细小的碎片；
(2) 融解RIPA裂解液，混匀。取适当量的裂解液，在使用前数分钟内加入PMSF，使PMSF的最终浓度为1 mM；
(3) 按照每20 mg组织加入150-250 μL裂解液的比例加入裂解液。如果裂解不充分可以适当添加更多的裂解液，如果需要高浓度的蛋白样品，可以适当减少裂解液的用量，具体RIPA裂解液的使用量参照表2。
(4) 用玻璃匀浆器匀浆，直至充分裂解。
(5) 充分裂解后，10000~14000rpm离心3~5 min，取上清，即可进行后续的PAGE、Western和免疫沉淀等操作。
注意事项：
1、本试剂为强烈型裂解液，可以提取核蛋白，但在提取核蛋白的同时，也会将基因组一并释放出来，造成细胞裂解液粘稠，此时可以直接加入蛋白上样缓冲液，煮沸再离心，离心后直接上样电泳;若想测定浓度，可入加少量SDS(1%)，煮沸后离心测浓度。本系列蛋白提取试剂所提取的蛋白由于含有去污剂，所以不适合使用Bradford蛋白浓度测定试剂盒，请选择BCA法或者Lowry法检测蛋白浓度。
2、如果需要检测和基因组结合特别紧密的蛋白，则可以通过超声处理打碎打散粘稠状物，随后离心取上清用于后续实验。
下列是HRP标记亲和素说明书的相关产品：
前列腺酸性磷酸酶抗原(人)
P选择素抗原
溶酶体膜糖蛋白抗原
一种肿瘤抑制基因抗原（C端）
微白蛋白/细小清蛋白抗原
酪酪肽多肽（1-36）
Rad51抗原
Rap1A抗原
维酸受体-β抗原
Ras相关区域家族1A抗原
HRP标记亲和素说明书RecQ解旋酶样蛋白5抗体RECQL5
RecQ解旋酶样蛋白5抗体RECQL5
单链结合蛋白70抗体RPA70
视网膜S抗原抗体Retinal S antigen
受体活性修饰蛋白2抗体RAMP2
受体活性修饰蛋白3抗体RAMP3
Ras蛋白特异鸟嘌呤核苷酸释放因子1抗体Rasgrp1
RAS相关蛋白癌基因Rab35抗体RAB35
磷酸化Rho GTP酶激活蛋白GAP抗体phospho-RACGAP1(Ser387)
轴突导向受体蛋白2抗体Robo2