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- 2025年07月12日
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- 详细信息
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- 技术资料
- 库存：
26
- 英文名：
Goat anti-Human IgG/HRP
- 保质期：
详见说明书
- 供应商：
上海研生
- 保存条件：
详见说明书
- 规格：
瓶
| 产品名称 | 羊抗人IgG-HRP规格 |
| 英文名称 | Goat anti-Human IgG/HRP |
| 货号 | YS-D4255 |
英文名称: Goat anti-Human IgG/HRP
储存条件: -20°C
其它:
酶标记抗体，是一类广泛用于免疫学、分子生物学及临床医学的各个分支学科中的特异、敏感和安全的免疫化学制剂。目前较为常用的是将辣根过氧化物酶(HRP)，经过钠氧化而标记在抗体IgG分子上，而制成HRP—抗体结合物。公司向用户提供的各类酶标物，均根据本公司建立的改良过氧化法标记而成。每种成品已加入一定浓度的BSA作为稳定剂。产品的工作浓度根据方法不同而别，用前最好-20℃冻存，避免反复化冻。
应用范围：
抗原决定族的抗原性分析鉴定，各种抗原、抗体的定量、定性及定位分析测定等。
工作中易产生的问题：
1.包被抗体或抗原不适，易产生阳性值较小，或产生变异，即跳管现象。
2.用抗血清不纯化，或纯化程度太低的抗体包被，则阳性值较小，或没有阳性梯度。
3.封闭不好或标记物过浓可产生对照较高。
主要性能：
每支0.1ml液体，内含有HRP约200μg/支，IgG约含400μg/支，BSA300μg/支，－20℃保存，稳定一年。4℃保存约3～6个月，1:10稀释，4℃可30天左右。稀释液为：pH7.4PBST。
工作效价：
直接ELISA法：1:500~1:1000，用TMB作底物(OD450nm)P/N＝2.5～3.0为阳性。
免疫印迹法：1:200～400，免疫组化：1:20～40，斑点免疫1:200~400。
备注：产品信息可能会有优化升级。请以实际标签信息为准。
使用方法：
1. 对于培养细胞样品
(1) 融解RIPA裂解液，混匀。取适当量的裂解液，在使用前数分钟内加入PMSF (CAT:AP02L014)，使PMSF的终浓度为1 mM。
(2) 细胞裂解
对于贴壁细胞：去除培养液，用PBS、生理盐水或无血清培养液洗一遍(如果血清中的蛋白没有干扰，可以不洗)。按照6孔板每孔加入150~250 μL裂解液的比例加入裂解液。用枪吹打数下，使裂解液和细胞充分接触。通常裂解液接触细胞1~2 s后，细胞就会被裂解。
对于悬浮细胞：离心收集细胞，按照6孔板每孔细胞加入150~250 μL裂解液的比例加入裂解液，混匀，充分裂解细胞。充分裂解后应没有明显的细胞沉淀。如果细胞量较多，需分装成50~100万细胞/管，然后再裂解。具体RIPA裂解液的使用量参照表2。
(3) 充分裂解后，10000~14000 rpm离心3~5 min，取上清，即可进行后续的PAGE、Western和免疫沉淀等操作。
2. 对于组织样品
(1) 把组织剪切成细小的碎片；
(2) 融解RIPA裂解液，混匀。取适当量的裂解液，在使用前数分钟内加入PMSF，使PMSF的最终浓度为1 mM；
(3) 按照每20 mg组织加入150-250 μL裂解液的比例加入裂解液。如果裂解不充分可以适当添加更多的裂解液，如果需要高浓度的蛋白样品，可以适当减少裂解液的用量，具体RIPA裂解液的使用量参照表2。
(4) 用玻璃匀浆器匀浆，直至充分裂解。
(5) 充分裂解后，10000~14000rpm离心3~5 min，取上清，即可进行后续的PAGE、Western和免疫沉淀等操作。
注意事项：
1、本试剂为强烈型裂解液，可以提取核蛋白，但在提取核蛋白的同时，也会将基因组一并释放出来，造成细胞裂解液粘稠，此时可以直接加入蛋白上样缓冲液，煮沸再离心，离心后直接上样电泳;若想测定浓度，可入加少量SDS(1%)，煮沸后离心测浓度。本系列蛋白提取试剂所提取的蛋白由于含有去污剂，所以不适合使用Bradford蛋白浓度测定试剂盒，请选择BCA法或者Lowry法检测蛋白浓度。
2、如果需要检测和基因组结合特别紧密的蛋白，则可以通过超声处理打碎打散粘稠状物，随后离心取上清用于后续实验。
下列是羊抗人IgG-HRP规格的相关产品：
人类血红蛋白α1抗原
乙型肝炎病毒X蛋白(HBxAg)抗原
乙型肝炎病毒X蛋白(HBxAg)抗原
肝炎病毒X蛋白(HBxAg)C端抗原
人α亚基人绒毛膜促性腺激素多肽抗原
膀胱肿瘤抗原
c-erbB-2受体抗体(N端)
c-erbB-2受体抗原(N端)
肝细胞生长因子抗原
人类疱疹病毒8抗原
羊抗人IgG-HRP规格环指蛋白133抗体RNF133
垂体瘤细胞凋亡抗体RHBDD3
环指蛋白122抗体RNF122
RAS相关GTP结合蛋白C抗体RRAGC
环指蛋白36抗体RNF36
受体相互作用蛋白激酶1抗体RIP1
环指蛋白7抗体RNF7
核糖体蛋白S3抗体RPS3
原癌基因R-Ras抗体RRAS
磷酸化指状蛋白RET抗体Phospho-Ret (Tyr905)
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文献和实验Mol/L PBS 含0.05% Tween 203. 封闭液： 3%BSA（用洗涤液配制）4. 酶标抗体的稀释：用封闭液稀释5. OPD底物Buffer：Na2HPO4.12H2O 1.84g柠檬酸 0.51gDDW 100ml6. 显色液（现配现用）：底物Buffer 10mlOPD 2mg30% H2O2 2ml7. 终止液 2Mol/L H2SO48. 重组人TFAR19, HRP标记的羊抗人IgG9. ELISA板, Tip, 移液器，ELISAReader（OD490nm），洗板机操作
－20℃备用。⑦阴性对照血清，进行ELISA测定，取其平均OD值作对照。⑧酶标羊抗人IgG结合物（SAHIgG―HRP）的制备：按过碘酸盐改良法，略加改进标记制成酶标抗体。即HRP8.0ml，22℃较搅20min。加乙二醇6滴，继续搅拌5min，对pH4.2，0.001mol/L醋酸盐缓冲液（用2molHC1调pH）透析过夜，中间换水4次，加羊抗人IgG（上海生物制品研究所产品）14mg，逐滴加pH，1.0mol碳酸盐缓冲液，使pH升到9.0～9.5，室温较搅2h，加硼氢化钠（4mg/ml
1988年8～10月胃镜检查病人共38人，抽静脉血2ml，分离血清贮存－20℃备用。⑦阴性对照血清，进行ELISA测定，取其平均OD值作对照。⑧酶标羊抗人IgG结合物（SAHIgG—HRP）的制备：按过碘酸盐改良法，略加改进标记制成酶标抗体。即HRP8.0ml，22℃较搅20min.加乙二醇6滴，继续搅拌5min，对pH4.2，0.001mol/L醋酸盐缓冲液（用2molHC1调pH）透析过夜，中间换水4次.加羊抗人IgG（上海生物制品研究所产品）14mg，逐滴加pH，1.0mol碳酸盐缓冲液，使pH
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