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- 库存:
29
- 英文名:
Goat anti-Mouse IgG
- 保质期:
详见说明书
- 供应商:
上海研生
- 保存条件:
详见说明书
- 规格:
瓶
英文名称: Goat anti-Mouse IgG
储存条件: -20℃
纯度: 10mg/ml
外观(性状): 各种纯化抗体均为液体提供
单位: 瓶
其它:
采用硫酸铵盐析与DEAE-离子交换纤维素层析,或批次吸附纯化,制成高纯度(﹥95%)和高活性的纯化IgG抗体。各种纯化抗体均为液体提供,可根据用户要求,配成不同浓度,用前最好-20℃存放,可根据使用方法采用不同浓度稀释。通常不同使用目的可分别用下列缓冲液稀释,注意完全化冻,充分混匀。用前最好低温高速离心去除冷聚合球蛋白及变性蛋白后,重新定量。
金标记:用pH9.0硼酸缓冲液稀释,1~2mg/ml标记。
HRP标记:用0.01mol/LpH9.0、CB或用包被液CB稀释,6~8mg/ml标记
荧光标记:用0.5mol/LpH9.5、CB(碳酸盐缓冲液)稀释,10~20mg/ml标记。
生物素记抗体:用0.1mol/LNaHCO3稀释,1~2mg/ml标记。其它方法,如免疫扩散可用0.01mol/LpH7.2PBS稀释,ELISA包被10~20μg/ml4℃过夜或37℃2h。
备注:产品信息可能会有优化升级。请以实际标签信息为准。
实验操作步骤:
羊抗小鼠IgG(纯化)价格是用于测定细胞增殖或毒性实验中活细胞数目的一种高灵敏度,无放射性的比色检测法。CCK法应用非常广泛,如药物筛选、细胞增殖测定、细胞毒性测定、肿瘤药敏试验以及生物因子的活性检测等。下面以engreen的CCK8试剂盒为例,简要说明细胞增殖-毒性检测的操作步骤
方法/步骤
在96孔板中配制100μl的细胞悬液。将培养板在培养箱预培养 24 小时 (在 37℃,5% CO2 的条件下)。
向培养板加入 10μl 不同浓度的待测物质。
将培养板在培养箱孵育一段适当的时间 (例如: 6,12, 24 或 48 小时)。
向每孔加入 10μl CCK8 溶液(engreen) (注意不要在孔中生成气泡,它们会影响 OD 值的读数)。
5. 将培养板在培养箱内孵育 1-4 小时。
用酶标仪测定在 450 nm 处的吸光度。
如果暂时不测定OD值,打算以后测定的话,可以向每孔中加10μl0.1 M HCl溶液或者1%wSDS 溶液,并遮盖培养板避光保存在室温条件下。在24小时内吸光度不会发生变化 。
细胞周期检测的原理:
PI法是经典的周期检测方法。PI为插入性核酸荧光染料,能选择性的嵌入核酸DNA和RNA双链螺旋的碱基之间与之结合,其结合的量与DNA的含量成正比例关系,用流式细胞仪进行分析,就可以得到细胞周期各个阶段的DNA分布状态,从而计算出各个期的百分含量。PI染色后,假设G0/G1期细胞的荧光强度为1,那么含有双份基因组DNA的G2/M期细胞的荧光强度的理论值为2,正在进行DNA复制的S期细胞的荧光强度为1-2之间。
常用的细胞染色方法有:
1.简单染色法,常用碱性染料如美蓝等进行简单染色;
2.革兰氏染色法,主要包括结晶紫初染、碘液媒染、乙醇(或)脱色以及番红复染四个过程;
3.瑞氏染色法,瑞氏染料溶剂主要是由伊红美蓝组成;
4.吉姆萨染色法,吉姆萨染色原理与结果和瑞特染色法基本相同;
5.细胞免疫荧光染色法,免疫荧光染色的主要原理是利用抗原抗体之间的特异性结合。
蛋白提取/定量
蛋白提取频道,提供蛋白提取实验用蛋白提取试剂盒,蛋白裂解液,蛋白浓度测定试剂盒等蛋白质实验用试剂及耗材。其中蛋白提取系列包括:植物蛋白提取试剂盒,细胞组织蛋白提取试剂盒,胞膜/细胞核蛋白提取试剂盒,全蛋白提取试剂盒等。
操作说明:
一,微孔酶标仪法
1. 完全溶解蛋白标准品,取10ml,加240ulPBS稀释至250ml ,使终浓度为0.2mg/ml。待测蛋白样品在什么溶液中,标准品也宜用什么溶液稀释。但是为了简便起见,也可以用0.9%NaCl或PBS稀释标准品。
2. 5×G250染色液使用前请颠倒3-5次混匀,取1ml 5×G250染色液,加入4ml双蒸水,混匀成1×G250染色液,此1×G250染色液可在4℃保存一周。
3. 将标准品按0, 2,4,6,8,12,16,20微升分别加到96孔板中,加PBS稀释液补足到20微升。
4. 将样品作适当稀释(zui好多做几个梯度,如作2倍、4倍、8倍稀释),加20微升到96孔板的样品孔中。由于移液器在取小量时的误差,标准线前面的点可能不很准确,所以尽可能的让样品点落在标准线1/2后。
5. 各孔加入200微升稀释后的1×G250染色液,室温放置3-5分钟。
6. 用酶标仪测定A595,或560-610nm之间的其它波长的吸光度。
7. 根据标准曲线计算出样品中的蛋白浓度。
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