b. 抗原修复:将切片浸泡在柠檬酸修复液中,95-100℃加热约 15 min (加热时间可以控制在 10-20 min 内, 最佳的加热时间需根据不同的样品和目的蛋白自行摸索)。柠檬酸修复液使用前需预热到 95-100℃。加热可以使 用普通的水浴锅,也可以使用微波炉加热。如果使用微波炉加热,需注意避免暴沸和过多的水分蒸发。随后大 约在 20-30 min 内冷却至室温。用免疫染色洗涤液洗涤 1-2 次,每次 3-5 min。随后即可进行封闭等后续的免疫 染色步骤。
2. 对于冰冻切片: 用免疫染色洗涤液洗涤切片 5 min。将切片浸泡在柠檬酸修复液中,95-100℃加热约 15 min (加热时间可以 控制在 10-20 min 内,最佳的加热时间需根据不同的样品和目的蛋白自行摸索)。柠檬酸修复液使用前需预热到 95-100℃。加热可以使用普通的水浴锅,也可以使用微波炉加热。如果使用微波炉加热,需注意避免暴沸和过 多的水分蒸发。随后大约在 20-30 min 内冷却至室温。用免疫染色洗涤液洗涤 1-2 次,每次 3-5 min。随后即可 进行封闭等后续的免疫染色步骤。