小鼠短链脂肪酸ELISA试剂盒,小鼠(SCFA）ELISAk

　　小鼠短链脂肪酸(SCFA)ELISA试剂盒

　　货号：BS-9306

　　规格：96T/48T

　　适用样本：小鼠血清、粪便、肠道内容物、细胞培养上清等

　　一、检测原理

　　采用竞争性ELISA法，利用特异性抗体结合样本中的SCFA(乙酸、丁酸等)，通过酶标二抗显色，吸光度(OD值)与SCFA浓度呈负相关，标准曲线计算含量。

　　二、试剂盒组成

　　组分96T用量保存条件

　　预包被酶标板1块2-8℃干燥

　　SCFA标准品(6浓度)各0.5mL-20℃

　　生物素标记抗体1瓶-20℃

　　HRP标记链霉亲和素1瓶-20℃(避光)

　　显色底物TMB1瓶4℃(避光)

　　终止液1瓶室温

　　洗涤缓冲液(20X)1瓶室温

　　三、样本处理

　　血清/血浆：离心取上清，直接检测或-20℃保存。

　　粪便/肠道内容物：称重后按1:10(w/v)加入PBS均质，离心(10,000g, 10min)取上清。

　　细胞上清：离心去除颗粒物，-80℃长期保存。

　　注意：避免反复冻融，检测前恢复至室温。

　　四、操作步骤

　　标准品稀释：按说明书梯度稀释(0-100 μg/mL)。

　　加样：标准品/样本各50μL + 生物素抗体50μL，37℃孵育45min。

　　洗涤：甩干孔内液体，加洗涤液300μL/孔，洗3次。

　　酶结合物：加HRP-链霉亲和素100μL，37℃30min。

　　显色：加TMB 90μL，37℃避光15min。

　　终止：加终止液50μL，450nm测OD值(参考波长630nm)。

　　五、结果计算

　　以标准品浓度为横坐标，OD值为纵坐标，绘制标准曲线(推荐四参数拟合)。

　　根据样本OD值，从曲线计算SCFA浓度。

　　六、注意事项

　　不同SCFA(乙酸、丁酸)需分别检测，避免交叉反应。

　　显色时间严格控制，避免过度反应。

　　若样本浓度过高，需用稀释液调整至线性范围内。

　　七、性能参数

　　灵敏度：<1 μg/mL

　　检测范围：5-100 μg/mL

　　批内变异：CV < 8%

　　回收率：85%-115%

　　八、常见问题

　　Q1：粪便样本检测值异常低?

　　→ 可能均质不充分，建议超声辅助提取。

　　Q2：标准曲线R²<0.99

　　→ 检查稀释误差或孵育温度波动。

　　(实际说明书需根据试剂盒品牌具体参数调整，建议结合实验视频教程操作。)

　　注：以上资料仅供参考，具体请产品说明请咨询技术老师或品牌供应商。

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