彗星法DNA损伤试剂盒 DNA Damage Assay k

DNA 在自由基（如·OH）的攻击下容易发生损伤，即脱氧戊糖遭到破环，磷酸二脂键的断裂，碱基的破环或脱落，便可进一步产生单链断裂或双链断裂。将细胞固定于低熔点琼脂糖中，取少量细胞涂在载玻片上，用碱高盐溶液破坏细胞膜，再用碱溶液使 DNA 分子解旋。将载玻片置于电泳液中，在电场的作用下，DNA 分子向阳极移动。如果 DNA 损伤严重，碎片多，则电泳速度快。未受损伤的 DNA 大分子则由于细胞膜的阻隔，滞留在原处。用 PI 染色或银染，可观察到 DNA 受损的细胞形同彗星现象，作定性分析。也可用相关的软件作定量分析。

自备试剂和仪器
低速离心机、水平电泳仪、荧光显微镜、37℃和 45℃恒温水浴箱、载玻片、盖玻片、平皿、微量移液器、1.5ml Microube、0.4mmol/LTris-HCl（pH7.5）缓冲液、PBS