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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
50
- 英文名:
彗星法DNA损伤试剂盒 DNA Damage Assay kit
- 供应商:
上海信裕生物科技有限公司
- 规格:
20T
DNA 在自由基(如·OH)的攻击下容易发生损伤,即脱氧戊糖遭到破环,磷酸二脂键的断裂,碱基的破环或脱落,便可进一步产生单链断裂或双链断裂。将细胞固定于低熔点琼脂糖中,取少量细胞涂在载玻片上,用碱高盐溶液破坏细胞膜,再用碱溶液使 DNA 分子解旋。将载玻片置于电泳液中,在电场的作用下,DNA 分子向阳极移动。如果 DNA 损伤严重,碎片多,则电泳速度快。未受损伤的 DNA 大分子则由于细胞膜的阻隔,滞留在原处。用 PI 染色或银染,可观察到 DNA 受损的细胞形同彗星现象,作定性分析。也可用相关的软件作定量分析。
自备试剂和仪器
低速离心机、水平电泳仪、荧光显微镜、37℃和 45℃恒温水浴箱、载玻片、盖玻片、平皿、微量移液器、1.5ml Microube、0.4mmol/LTris-HCl(pH7.5)缓冲液、PBS
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文献和实验,就会产生嘌呤 -4NQO附加体。用紫外线照射则会产生嘧啶二聚体,丝裂霉素 C在状内作用,由于它的媒介,在二条链的鸟嘌呤和鸟嘌呤间形成桥。( 2) DNA链损伤( strand damage)主要为一条链断裂和二条链断裂。如糖的变化,小的损伤对 DNA的复制可完全没有影响,但稍为大一点的变化连连发生,则容易引起变化往往最终导致一条链断裂(例如用 X线照射使水分解产生 OH游离基, OH游离基作用糖,很快就导致一条链断裂)。上述的脱嘌呤也常常导致一条链断裂。当然,磷酸酯键的化学变化也时常导致一条链断裂
Sperm DNA Damage Measured by Comet Assay
Measurement of sperm DNA damage is a useful tool in the evaluation of male infertility, as the sperm nucleus lacks protection against oxidative stress and is vulnerable to oxidation-mediated DNA damage. The Comet assay or single-cell gel
Measurement of DNA Damage Using the Comet Assay
Nitric oxide (NO) has the potential to damage DNA directly, and also to react with O2 to form the nitrosating species N2 O3 or to react with O2 − to form the powerful oxidizing agent peroxynitrite (see Chapter 20 , this volume). The DNA
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