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- 2025年07月11日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
23
- 英文名：
详见说明书
- 保质期：
-20℃
- 供应商：
上海研生
- 保存条件：
详见说明书
- 规格：
瓶
储存条件:-20℃，避光，有效期:至少1年
单位:盒
胞浆蛋白提取试剂盒用于哺乳动物组织和细胞中提取胞质蛋白，试剂盒中的裂解液含有蛋白酶抑制剂和磷酸酶抑制剂，作用较为温和，可获得蛋白，可用于免疫印迹实验等基础研究实验，由于含有上述的酶抑制剂，不能用于研究蛋白激酶和磷酸激酶的研究。本品仅用于科研。
操作方法:
1、组织总蛋白的提取
在1ml的冷裂解液中各加入10ul的磷酸酶抑制剂、蛋白酶抑制剂和PMSF；混匀，放置在冰上备用；
称取0.1g的新鲜组织，放置于玻璃匀浆器的入口缓冲处，用眼科剪将组织块尽可能的剪碎，然后加入0.5-1ml的新配置的裂解液，研磨直至没有明显的组织块，这个过程注意冰上操作；
将组织匀浆液移入1.5ml的EP管中，4 oC 12000g离心30min；
吸取上清至新的管中；
进行蛋白定量或者变性进行蛋白实验。
（提取好的蛋白建议保存于-80 oC，即用即取，避免反复冻融，避免长时间储存。)
2、细胞总蛋白的提取
裂解液的用量：107个细胞需要裂解液1ml；
贴壁细胞：弃去培养基，用冷的PBS洗两次，弃去PBS，然后加入计算好的细胞裂解液；在冰上用细胞刮刀进行刮离细胞，
将刮离的细胞裂解液移入EP管中，颠倒裂解20-30min
悬浮细胞：4 oC 400g离心收集细胞，用冷的PBS洗两次细胞，同样按细胞数加入裂解液，
涡旋10s，放置冰上裂解10min，重复3-4次；
裂解完毕之后，将细胞裂解液4 oC 12000g离心30min；
将上清移入新的EP管中；
进行蛋白定量或者变性进行蛋白实验。
（提取好的蛋白建议保存于-80 oC，即用即取，避免反复冻融，避免长时间储存。)
实验操作步骤：
胞浆蛋白提取试剂盒图片是用于测定细胞增殖或毒性实验中活细胞数目的一种高灵敏度，无放射性的比色检测法。CCK法应用非常广泛，如药物筛选、细胞增殖测定、细胞毒性测定、肿瘤药敏试验以及生物因子的活性检测等。下面以engreen的CCK8试剂盒为例，简要说明细胞增殖-毒性检测的操作步骤
方法/步骤
在96孔板中配制100μl的细胞悬液。将培养板在培养箱预培养 24 小时 (在 37℃，5% CO2 的条件下)。
向培养板加入 10μl 不同浓度的待测物质。
将培养板在培养箱孵育一段适当的时间 (例如: 6,12, 24 或 48 小时)。
向每孔加入 10μl CCK8 溶液（engreen） (注意不要在孔中生成气泡，它们会影响 OD 值的读数)。
5. 将培养板在培养箱内孵育 1-4 小时。
用酶标仪测定在 450 nm 处的吸光度。
如果暂时不测定OD值，打算以后测定的话，可以向每孔中加10μl0.1 M HCl溶液或者1%wSDS 溶液，并遮盖培养板避光保存在室温条件下。在24小时内吸光度不会发生变化 。
细胞周期检测的原理：
PI法是经典的周期检测方法。PI为插入性核酸荧光染料，能选择性的嵌入核酸DNA和RNA双链螺旋的碱基之间与之结合，其结合的量与DNA的含量成正比例关系，用流式细胞仪进行分析，就可以得到细胞周期各个阶段的DNA分布状态，从而计算出各个期的百分含量。PI染色后，假设G0/G1期细胞的荧光强度为1，那么含有双份基因组DNA的G2/M期细胞的荧光强度的理论值为2，正在进行DNA复制的S期细胞的荧光强度为1-2之间。
常用的细胞染色方法有:
1.简单染色法,常用碱性染料如美蓝等进行简单染色;
2.革兰氏染色法,主要包括结晶紫初染、碘液媒染、乙醇(或)脱色以及番红复染四个过程;
3.瑞氏染色法,瑞氏染料溶剂主要是由伊红美蓝组成;
4.吉姆萨染色法,吉姆萨染色原理与结果和瑞特染色法基本相同;
5.细胞免疫荧光染色法,免疫荧光染色的主要原理是利用抗原抗体之间的特异性结合。
蛋白提取/定量
蛋白提取频道,提供蛋白提取实验用蛋白提取试剂盒，蛋白裂解液，蛋白浓度测定试剂盒等蛋白质实验用试剂及耗材。其中蛋白提取系列包括：植物蛋白提取试剂盒，细胞组织蛋白提取试剂盒，胞膜/细胞核蛋白提取试剂盒，全蛋白提取试剂盒等。
操作说明：
一，微孔酶标仪法
1. 完全溶解蛋白标准品，取10ml，加240ulPBS稀释至250ml ，使终浓度为0.2mg/ml。待测蛋白样品在什么溶液中，标准品也宜用什么溶液稀释。但是为了简便起见，也可以用0.9%NaCl或PBS稀释标准品。
2. 5×G250染色液使用前请颠倒3-5次混匀，取1ml 5×G250染色液，加入4ml双蒸水，混匀成1×G250染色液，此1×G250染色液可在4℃保存一周。
3. 将标准品按0, 2,4,6,8,12,16,20微升分别加到96孔板中，加PBS稀释液补足到20微升。
4. 将样品作适当稀释（zui好多做几个梯度，如作2倍、4倍、8倍稀释），加20微升到96孔板的样品孔中。由于移液器在取小量时的误差，标准线前面的点可能不很准确，所以尽可能的让样品点落在标准线1/2后。
5. 各孔加入200微升稀释后的1×G250染色液，室温放置3-5分钟。
6. 用酶标仪测定A595，或560-610nm之间的其它波长的吸光度。
7. 根据标准曲线计算出样品中的蛋白浓度。
以下是公司正在热销的产品：
HOXA4离子转运相关蛋白SLC7A9抗体CLIA Kit for Bone Morphogenetic Protein 4 (BMP4)
HOXA3磷酸化核突触蛋白α抗体CLIA Kit for Bcl2/Adenovirus E1B 19kDa Interacting Protein 3 (BNIP3)
HAS2磷酸化核突触蛋白α抗体CLIA Kit for Tumor Protein, Translationally Controlled 1 (TPT1)
BR，分子量4万98%100gαSecretaseCLIA Kit for Troponin T Type 2, Cardiac (TNNT2)
BR，分子量2万98%500gαDFCLIA Kit for Glucosidase Beta, Acid (GbA)
BR，分子量2万98%10gAFUCLIA Kit for Fatty Acid Synthase (FASN)
BR，分子量2万98%100gIDUACLIA Kit for Interleukin 20 (IL20)
BR，分子量1.1万98%10gα1AGPCLIA Kit for Haptoglobin Related Protein (HPR)
BR，分子量1.1万98%100gWISP1CLIA Kit for Aggrecan (AGC)
BR，分子量1万98%500gUSP21CLIA Kit for Versican (VS)
胞浆蛋白提取试剂盒图片PhosphoCEBP beta (Ser105)染色质组装因子1P55抗体
人参皂苷Rh1英文名称Ginsenoside Rh1规格:20mg/支
PhosphoCEBP beta (Thr235)RNA聚合酶1和转录释放因子抗体
人参皂苷Rh3英文名称Ginsenoside Rh3规格:20mg/支
PhosphoCD18 (Ser756 + Thr758 + Thr759)磷脂酰丝氨酸脱羧酶PISD抗体
人参皂苷Ro英文名称Ginsenoside-Ro规格:20mg/支
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文献和实验以下操作按照天根产品 DP433 血液总 RNA 提取试剂盒的说明书进行，所有反应现象仅适用于该产品及本文所标明的样本量。如使用其它操作流程或产品，样本量不同可能现象与本文有所差异。实验准备：1. 新鲜血液样品（ 200 μl ）2. 无水乙醇，β-巯基乙醇3. 一次性无菌注射器（DNase I配置），移液器及配套RNase-Free无菌枪头（200 μl ，1ml） 1.5 ml，2.0ml 离心管（RNase-free）4. 通风橱 涡旋振荡器 金属浴 台式低温离心机本文版权归天根生化科技
以下操作按照天根产品 DP432 植物总 RNA 提取试剂盒的说明书进行，所有反应现象仅适用于该产品及本文所标明的样本量。如使用其它操作流程或产品，样本量不同可能现象与本文有所差异。实验准备：1. 植物样品（10-20 mg），研钵，液氮2. 无水乙醇，β-巯基乙醇3. 一次性无菌注射器（DNase I配置），移液器及配套RNase-Free无菌枪头（200 μl ，1ml） 1.5 ml，2.0ml 离心管（RNase-free）4. 通风橱 涡旋振荡器 金属浴 台式低温离心机本文版权归天
RNAsimple 总 RNA 提取试剂盒操作指南（DP419） ——植物
以下操作按照天根产品 DP419 RNAsimple 总 RNA 提取试剂盒的说明书进行，所有反应现象仅适用于该产品及本文所标明的样本量。如使用其它操作流程或产品，样本量不同可能现象与本文有所差异。实验准备：1. 植物叶片 研钵 液氮2. 无水乙醇 氯仿3. 移液器及配套 RNase-free 无菌枪头（200 μl ，1ml），1.5 ml，2.0ml 离心管（RNase-free）4. 涡旋振荡器，台式低温离心机实验准备-试剂盒准备：第一次使用前应在去蛋白液 RD、漂洗液 RW 中
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