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25
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详见说明书
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详见说明书
- 保质期:
一年
- 供应商:
上海一研
- 保存条件:
4°C保存
- 规格:
100T/盒
产品名称 Calcitonin receptor mRNA原位杂交试剂盒
规格:100T/盒
特异性: 人、大鼠、小鼠
标记方式: 3’—尾段标记
保存条件: 4°C保存一年
试剂盒内容:
1.Calcitonin receptor寡核苷酸探针杂交液 2ml;
2.预杂交液 2ml;
3.胃蛋白酶(×10;Pepsin) 2ml;
4.封闭液 5ml;
5.生物素化鼠抗 5ml;
6.SABC-POD 5ml;
7.生物素化过氧化物酶 5ml。
试剂盒组份:
5×Equilibration Buffer————750μl
FITC-12-dUTP Labeling Mix———100 μl
Recombinant TdT Enzyme—————20 μl
Proteinase K (2 mg/ml)————40 μl
DNase I (1 U/μl)———————5μl
10×DNase I Buffer——————100 μl
产品具有以下优点:
1、原装进口抗体----高效、灵敏、特异
2、规范包被操作----吸附均匀,吸附性好,空白值低,孔底透明度高
3、先进的优化方案----重复性高,可靠性强
4、购买本公司的Calcitonin receptor mRNA原位杂交试剂盒免费代测
5、技术服务要求:专业,规范,高效
6、适用于体液、组织匀浆液、细胞培养上清液、尿液等多种类型的样本
7、可检测动物类型丰富:人、猴、大鼠、小鼠、豚鼠、黄金地鼠、兔、猪、犬、牛、绵羊、山羊、鹅、鸡、虾、河蟹、鲈鱼、斑马鱼等
8、可检测指标齐全:炎症因子、血管生成素、动脉粥样硬化因子、趋化因子、生长因子基质金属蛋白酶、脂肪因子等等
9、经济、实惠、可靠,完善、稳定的实验体系,优秀的科研队伍,先进的实验设备、准确可靠的实验结果,是您可靠的合作伙伴。
下列产品是公司正在热销的产品:
Anti-LIM2 Polyclonal Antibody英文名称: Anti-HSD11B2 Polyclonal Antibody宿主: Rabbit分子式:C6H14O6性状:Powder纯度:98.5%
Anti-LIMK2 Polyclonal Antibody英文名称: Anti-PRLR Polyclonal Antibody宿主: Rabbit分子式:C11H20O10性状:Powder纯度:98.0%
Anti-LIMS1 Polyclonal Antibody英文名称: Anti-OCT2 Polyclonal Antibody宿主: Rabbit分子式:C14H20O6性状:Oil纯度:%
Anti-LIMS1 Polyclonal Antibody宿主: Rabbit英文名称: Anti-PDIA3 Polyclonal Antibody分子式:C17H12O6性状:Yellow powder纯度:98.5%
Anti-LIN28B Polyclonal Antibody英文名称: Anti-ChRM2 Polyclonal Antibody宿主: Rabbit分子式:C12H19Cl3O8性状:Powder纯度:99.0%
Anti-LIN37 Polyclonal Antibody宿主: Rabbit英文名称: Anti-MMP2 Polyclonal Antibody分子式:C26H26O12性状:Powder纯度:97.5%
Anti-LIPF Polyclonal Antibody英文名称: Anti-Resistin Polyclonal Antibody宿主: Rabbit分子式:C17H20O9性状:Powder纯度:98.0%
Anti-LIPG Polyclonal Antibody英文名称: Anti-Acvrl1 Polyclonal Antibody宿主: Rabbit分子式:C34H42O19性状:Powder纯度:98.0%
Anti-LITAF Polyclonal Antibody英文名称: Anti-DVL1 Polyclonal Antibody宿主: Rabbit分子式:C12H20O7性状:Oil纯度:98.0%
Anti-LKB1 Polyclonal Antibody英文名称: Anti-VEGF-C Polyclonal Antibody宿主: Rabbit分子式:C8H14O2S2性状:Powder纯度:98.5%
Anti-LLGL1 Polyclonal Antibody宿主: Rabbit英文名称: Anti-OXTR Polyclonal Antibody分子式:C12H20O7性状:Powder纯度:%
Anti-LLGL2 Polyclonal Antibody宿主: Rabbit英文名称: Anti-KRT17 Polyclonal Antibody分子式:C33H64O2性状:Powder纯度:%
Anti-LLGL2 Polyclonal Antibody英文名称: Anti-NME1 Polyclonal Antibody宿主: Rabbit分子式:C34H32O10性状:Yellow powder纯度:96.5%
Anti-LMNA Monoclonal Antibody英文名称: Anti-MMP12 Polyclonal Antibody宿主: Rabbit分子式:C6H12O5性状:Powder纯度:%
Anti-LMNA Monoclonal Antibody英文名称: Anti-CDH3 Polyclonal Antibody宿主: Rabbit分子式:C4H6O4性状:Powder纯度:%
Anti-LMNA Polyclonal Antibody英文名称: Anti-IRS1 Polyclonal Antibody宿主: Rabbit分子式:C14H24O8性状:Powder纯度:98.0%
Anti-LMNA Polyclonal Antibody英文名称: Anti-IRF6 Polyclonal Antibody宿主: Rabbit分子式:C6H10O4性状:Cryst.纯度:97.0%
Anti-LMNB1 Monoclonal Antibody英文名称: Anti-HIST1H1C Polyclonal Antibody宿主: Rabbit分子式:C14H19NO8性状:Powder纯度:%
Anti-LMNB1 Polyclonal Antibody英文名称: Anti-DKK1 Polyclonal Antibody宿主: Rabbit分子式:C16H18O9性状:Powder纯度:98.0%
Anti-LMNB1 Polyclonal Antibody英文名称: Anti-CNGA2 Polyclonal Antibody宿主: Rabbit分子式:C55H90O性状:Oil纯度:%
Calcitonin receptor mRNA原位杂交试剂盒Agatharesinol acetonide特异性: 人、大鼠、小鼠VEGF-B mRNA原位杂交试剂盒
Isomagnolone特异性: 人、大鼠、小鼠VE-Cadherin mRNA原位杂交试剂盒
Isodunnianol特异性: 人、大鼠、小鼠、兔VEGF mRNA原位杂交试剂盒
Dihydrodehydrodiconiferyl alcohol特异性: 大鼠USP18 mRNA原位杂交试剂盒
Simonsinol特异性: 人、大鼠、小鼠VEGF-C mRNA原位杂交试剂盒
Hedyotisol A特异性: 人、大鼠、小鼠VEGF-D mRNA原位杂交试剂盒
Massonianoside B特异性: 人VHL mRNA原位杂交试剂盒
操作程序:
注意:最重要的是及时固定,并在固定液中加入0.1%的DEPC处理,以抑制RNA酶对mRNA的分解作用。此外,过度固定对原位杂交有明显的不利影响。
1.玻片的处理:一般采用多聚赖氨酸或APES。切片厚度10-20μm。
2.细胞在多聚赖氨酸处理的盖玻片上进行培养,条件为37℃和5%的CO2,所用培养基为Dulbecco基础培养基。细胞长好后0.1M PBS(PH7.4)洗2分钟×3次。
3.培养细胞和冰冻切片均可用下述方法固定:固定液为4%/0.1 M PBS(PH7.2-7.6),含有1/1000 DEPC。室温固定 20--30分钟。蒸馏水充分洗涤,干燥后-20℃冰冻可保存2周以上。
4.30%H2O2 1份+纯甲醇50份混合,室温处理30分钟。蒸馏水洗涤3次。
5.暴露mRNA核酸片段:切片上滴加3%柠檬酸新鲜稀释的胃蛋白酶(1ml 3% 柠檬酸加2滴浓缩型胃蛋白酶,混匀),37℃或室温消化5—120秒钟。有时也可以不消化。原位杂交用 PBS洗3次×5分钟。蒸馏水洗1次。
6.后固定:胃蛋白酶消化后才需要。固定液为1%/0.1 M PBS(PH7.2-7.6),含有1/1000 DEPC。室温固定 10分钟。蒸馏水洗涤3次。
7.预杂交:湿盒的准备——干的杂交盒底部加20%甘油20ml以保持湿度。按每张切片20μι加预杂交液。恒温箱38-42℃2—4小时。吸取多余液体,不洗。
8.杂交——按每张切片20μι杂交液,加在切片上。将原位杂交专用盖玻片的保护膜揭开后,盖在切片上。恒温箱38-42℃杂交过夜(根据杂交情况可以调节)。
9.杂交后洗涤:揭掉盖玻片,37℃左右水温的2×SSC洗涤5分钟×2次;37℃0.5×SSC洗涤15分钟×1次; 37℃0.2×SSC洗涤15分钟×1次(如果有非特异性染色,重复0.2×SSC洗涤15分钟×1-2次)。
10.滴加封闭液:37℃30分钟。甩去多余液体,不洗
11.滴加生物素化鼠抗37℃ 60分钟或室温120分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
12.滴加SABC:37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×3次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
13.滴加生物素化过氧化物酶:37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。
14.DAB显色:使用DAB显色试剂盒—1ml蒸馏水加显色剂A,B,C各一滴,混匀,加至标本上。一般显色20-30分钟。若无背景出现则可继续显色。也可自配DAB显色剂后显色。充分水洗。
15.必要时苏木素复染,充分水洗。
16.酒精脱水,二甲苯透明,封片。
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文献和实验Characterization of CGRP Receptor Binding
Chatterjee, T.K. and Fisher, R.A. 1991. Multiple affinity forms of the calcitonin gene‐related peptide receptor in rat cerebellum. Mol. Pharmacol. 39:798‐804. Choksi, T
性和扩增长度 为了说明GeneRacer™试剂盒获取全长5’末端的能力,我们扩增了带有已知转录起始位点的基因的5’末端。使用总RNA,遵循GeneRacer™步骤,我们扩增了一个长转录本(9kb)和一个浓度为0.01%,即30拷贝/细胞的稀有mRNA(见图2 )。 图二 稀有转录本和长转录本的扩增结果 3.5μg Hela总RNA经GeneRacer™步骤处理,利用GeneRacer™的Oligo dT引物和SuperScriptⅡ™得到cDNA,然后使用GeneRacer™ 5’引物和基因
Generating Human Osteoclasts In Vitro from Bone Marrow and Peripheral Blood
Osteoclasts derive from macrophage colony-stimulating factor (M-CSF)-dependent hemopoietic precursors that develop into cells that express the αv β3 subunit of the vitronectin receptor (VNR) and the calcitonin receptor (CTR
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