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ATF-2 mRNA原位杂交试
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25
详见说明书
一年
上海一研
4°C保存
100T/盒
试剂盒组份:5×Equilibration Buffer————750μlFITC-12-dUTP Labeling Mix———100 μlRecombinant TdT Enzyme—————20 μlProteinase K (2 mg/ml)————40 μlDNase I (1 U/μl)———————5μl10×DNase I Buffer——————100 μl参数规格:产品名称 ATF-2 mRNA原位杂交试剂盒规格:100T/盒特异性: 人、大鼠、小鼠标记方式: 3’—尾段标记保存条件: 4°C保存一年试剂盒内容: 1.ATF-2寡核苷酸探针杂交液 2ml;2.预杂交液 2ml;3.胃蛋白酶(×10;Pepsin) 2ml;4.封闭液 5ml;5.生物素化鼠抗 5ml;6.SABC-POD 5ml;7.生物素化过氧化物酶 5ml。操作程序:注意:最重要的是及时固定,并在固定液中加入0.1%的DEPC处理,以抑制RNA酶对mRNA的分解作用。此外,过度固定对原位杂交有明显的不利影响。1.玻片的处理:一般采用多聚赖氨酸或APES。切片厚度10-20μm。2.细胞在多聚赖氨酸处理的盖玻片上进行培养,条件为37℃和5%的CO2,所用培养基为Dulbecco基础培养基。细胞长好后0.1M PBS(PH7.4)洗2分钟×3次。3.培养细胞和冰冻切片均可用下述方法固定:固定液为4%/0.1 M PBS(PH7.2-7.6),含有1/1000 DEPC。室温固定 20--30分钟。蒸馏水充分洗涤,干燥后-20℃冰冻可保存2周以上。4.30%H2O2 1份+纯甲醇50份混合,室温处理30分钟。蒸馏水洗涤3次。5.暴露mRNA核酸片段:切片上滴加3%柠檬酸新鲜稀释的胃蛋白酶(1ml 3% 柠檬酸加2滴浓缩型胃蛋白酶,混匀),37℃或室温消化5—120秒钟。有时也可以不消化。原位杂交用 PBS洗3次×5分钟。蒸馏水洗1次。6.后固定:胃蛋白酶消化后才需要。固定液为1%/0.1 M PBS(PH7.2-7.6),含有1/1000 DEPC。室温固定 10分钟。蒸馏水洗涤3次。7.预杂交:湿盒的准备——干的杂交盒底部加20%甘油20ml以保持湿度。按每张切片20μι加预杂交液。恒温箱38-42℃2—4小时。吸取多余液体,不洗。8.杂交——按每张切片20μι杂交液,加在切片上。将原位杂交专用盖玻片的保护膜揭开后,盖在切片上。恒温箱38-42℃杂交过夜(根据杂交情况可以调节)。9.杂交后洗涤:揭掉盖玻片,37℃左右水温的2×SSC洗涤5分钟×2次;37℃0.5×SSC洗涤15分钟×1次; 37℃0.2×SSC洗涤15分钟×1次(如果有非特异性染色,重复0.2×SSC洗涤15分钟×1-2次)。10.滴加封闭液:37℃30分钟。甩去多余液体,不洗11.滴加生物素化鼠抗37℃ 60分钟或室温120分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。12.滴加SABC:37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×3次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。13.滴加生物素化过氧化物酶:37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。14.DAB显色:使用DAB显色试剂盒—1ml蒸馏水加显色剂A,B,C各一滴,混匀,加至标本上。一般显色20-30分钟。若无背景出现则可继续显色。也可自配DAB显色剂后显色。充分水洗。15.必要时苏木素复染,充分水洗。16.酒精脱水,二甲苯透明,封片。产品具有以下优点:1、原装进口抗体----高效、灵敏、特异2、规范包被操作----吸附均匀,吸附性好,空白值低,孔底透明度高3、先进的优化方案----重复性高,可靠性强4、购买本公司的ATF-2 mRNA原位杂交试剂盒免费代测5、技术服务要求:专业,规范,高效6、适用于体液、组织匀浆液、细胞培养上清液、尿液等多种类型的样本7、可检测动物类型丰富:人、猴、大鼠、小鼠、豚鼠、黄金地鼠、兔、猪、犬、牛、绵羊、山羊、鹅、鸡、虾、河蟹、鲈鱼、斑马鱼等8、可检测指标齐全:炎症因子、血管生成素、动脉粥样硬化因子、趋化因子、生长因子基质金属蛋白酶、脂肪因子等等9、经济、实惠、可靠,完善、稳定的实验体系,优秀的科研队伍,先进的实验设备、准确可靠的实验结果,是您可靠的合作伙伴。下列产品是公司正在热销的产品:Anti-EMP-1 Polyclonal Antibody英文名称: Anti-TGM1 Polyclonal Antibody宿主: Rabbit分子式:C30H46O3性状:Powder纯度:98.0%Anti-EMX1 Polyclonal Antibody英文名称: Anti-KMT2E Polyclonal Antibody宿主: Rabbit分子式:C35H52O6性状:Powder纯度:98.0%Anti-EN1 Polyclonal Antibody英文名称: Anti-ADSS Polyclonal Antibody宿主: Rabbit分子式:C38H56O14性状:Oil纯度:%Anti-ENC1 Polyclonal Antibody英文名称: Anti-LAIR1 Polyclonal Antibody宿主: Rabbit分子式:C35H52O6性状:Powder纯度:98.0%Anti-ENDOG Polyclonal Antibody英文名称: Anti-DLK1 Polyclonal Antibody宿主: Rabbit分子式:C30H42O8性状:Powder纯度:98.0%Anti-ENDOG Polyclonal Antibody英文名称: Anti-MASP1 Polyclonal Antibody宿主: Rabbit分子式:C30H50O性状:Powder纯度:98.5%Anti-Endostatin Polyclonal Antibody英文名称: Anti-NOG Polyclonal Antibody宿主: Rabbit分子式:C32H46O9性状:Powder纯度:97.0%Anti-ENG Polyclonal Antibody英文名称: Anti-CLEC4A Polyclonal Antibody宿主: Rabbit分子式:C40H56O15性状:Powder纯度:98.0%Anti-ENO1 Polyclonal Antibody英文名称: Anti-UBIAD1 Polyclonal Antibody宿主: Rabbit分子式:C28H40O7性状:Powder纯度:98.0%Anti-ENO1 Polyclonal Antibody英文名称: Anti-CX3CL1 Polyclonal Antibody宿主: Rabbit分子式:C30H48O性状:Powder纯度:98.5%Anti-ENO1 Polyclonal Antibody英文名称: Anti-SIGLEC7 Polyclonal Antibody宿主: Rabbit分子式:C36H58O11性状:Powder纯度:95.0%Anti-ENO2 Monoclonal Antibody英文名称: Anti-GP1BA Polyclonal Antibody宿主: Rabbit分子式:C28H42O6性状:Powder纯度:98.0%Anti-ENO2 Monoclonal Antibody英文名称: Anti-HSD17B1 Polyclonal Antibody宿主: Rabbit分子式:C31H42O7性状:Powder纯度:95.0%Anti-ENO2 Monoclonal Antibody英文名称: Anti-DTX3L Polyclonal Antibody宿主: Rabbit分子式:C30H46O5性状:Powder纯度:97.5%Anti-ENO2 Polyclonal Antibody英文名称: Anti-PIAS3 Polyclonal Antibody宿主: Rabbit分子式:C29H38O8性状:Powder纯度:96.5%Anti-ENO2 Polyclonal Antibody英文名称: Anti-CLPX Polyclonal Antibody宿主: Rabbit分子式:C30H40O8性状:Powder纯度:96.0%Anti-ENO3 Polyclonal Antibody英文名称: Anti-PECAM1 Polyclonal Antibody宿主: Rabbit分子式:C32H50O8性状:Powder纯度:98.0%Anti-ENO3 Polyclonal Antibody英文名称: Anti-HSD3B2 Polyclonal Antibody宿主: Rabbit分子式:C30H50O性状:Powder纯度:98.0%Anti-ENO4 Polyclonal Antibody英文名称: Anti-STX12 Polyclonal Antibody宿主: Rabbit分子式:C30H50O性状:Powder纯度:98.0%Anti-ENOX2 Polyclonal Antibody英文名称: Anti-PCCA Polyclonal Antibody宿主: Rabbit分子式:C26H30O9性状:Powder纯度:96.5%ATF-2 mRNA原位杂交试剂盒Kaempferol 3,7,4'-trimethyl ether特异性: 人、小鼠MIF mRNA原位杂交试剂盒Boeravinone E特异性: 人、大鼠、小鼠MIP-1α mRNA原位杂交试剂盒3'-Methoxydaidzein特异性: 大鼠、小鼠MIP-1β mRNA原位杂交试剂盒Padmatin特异性: 人MFGE8 mRNA原位杂交试剂盒Baohuoside II特异性: 人、大鼠、小鼠MGMT mRNA原位杂交试剂盒Blumeatin特异性: 人、大鼠、小鼠MKP-2/DUSP2 mRNA原位杂交试剂盒Ombuin特异性: 人、大鼠、小鼠MKP-1/DUSP1 mRNA原位杂交试剂盒
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