抗肿瘤坏死因子α小鼠7说明书

实验要点及说明：
1．本方法适用于贴壁细胞培养，而不适用于悬浮细胞培养，悬浮细胞可使用滴片法； 
2．所使用的盖玻片应该为优质玻璃，并经过铬酸洗液处理； 
3．盖玻片非常薄，易碎，取放盖玻片时动作要轻； 
4．如果需要更多生长状态一致的细胞，可以使用较大的培养皿，但不宜过大，以避免培养液的浪费和增加污染机率； 
5．如果细胞贴壁生长能力较差，可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。

我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，购买人肝癌细胞；HB611说明书到货后，由我们实验室扩增、冻存，冻存的产品全部经过QC检测，100%进口来源，100%保证5代以内，活力>95%，无细菌、真菌、支原体污染。 细胞到达客户手中，1个月内出现任何问题，导致细胞在冻存前死亡，我们公司都可以免费再向客户提供一次。

产品名称	抗肿瘤坏死因子α小鼠7说明书
类型	贴壁生长
编号	CS-X4088

资源名称   抗肿瘤坏死因子α小鼠7说明书  
种属:7A8
形态:淋巴母细胞样
培养方法
培养基:RPMI1640(w/oHepes)10%FBS
传代方法:保持细胞密度在1×105～1×106cells/ml之间，每周换液2～3次
生长特性:半贴壁生长
存储条件:基础培养基+8%DMSO+20%FBS
细胞培养的优点：
1.研究的对象是活细胞
在实验过程中，根据要求可始终保持细胞活力，并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况，包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制
pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件，可以根据实际需要进行人为的控制，同时，可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察，这些因素同样可以处于严格控制之下。
3.研究的样本可以达到比较均一性
通过细胞培养一定代数后，所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞，需要时，可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
4.研究内容便于观察、检测和记录
采用各种研究技术：如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。
培养操作步骤 ：
1．用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出，用无菌丝绸布擦拭干净，不要用纱布； 
2．将盖玻片轻轻放入6孔培养板（每孔一片）或培养皿中（每个平皿可放置2-3片）； 
3．在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时； 
4．将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中，使盖玻片完全浸在培养液中； 
5．将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时，将培养板取出，用盖片镊轻轻取出盖玻片，用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。 
注意事项：
产品名称实验进行前，无菌室及无菌操作台（laminarflow）以紫外灯照射30-60分钟灭菌，以70%ethanol擦拭无菌操作抬面，并开启无菌操作台风扇运转10分钟后，才开始实验操作；每次操作只处理一株细胞株，且即使培养基相同亦不共享培养基，以避免失误混淆或细胞间污染。实验完毕后，将实验物品带出工作台，以70%ethanol擦拭无菌操作抬面；
操作间隔应让无菌操作台运转10分钟以上后，再进行下一个细胞株之操作；无菌操作工作区域应保持清洁及宽敞，必要物品，例如试管架、吸管吸取器或吸管盒等可以暂时放置，其它实验用品用完即应移出，以利于气流之流通。实验用品以70%ethanol擦拭后才带入无菌操作台内。实验操作应在抬面之中央无菌区域，勿在边缘之非无菌区域操作；
小心取用无菌之实验物品，避免造成污染。勿碰触吸管尖头部或是容器瓶口，亦不要在打开之容器正上方操作实验。容器打开后，以手夹住瓶盖并握住瓶身，倾斜约45°角取用，尽量勿将瓶盖盖口朝上放置桌面。
工作人员应注意自身之安全，须穿戴实验衣及手套后才进行实验。对于来自人类或是病毒感染之细胞株应特别小心操作，并选择适当等级之无菌操作台（至少ClassⅡ）。操作过程中，应避免引起aerosol之产生，小心毒性药品，例如DMSO及TPA等，并避免尖锐针头之伤害等。
PLB/phospholamban(phospho Ser16+Thr17) 磷化心脏磷蛋白抗体 规格 0.1ml
Amylin(1-37)Diabetes Associated Peptide (DAP), amide, human 糖尿病相关肽(胰岛淀粉样肽)Multi-class antibodies规格： 0.5mg
Anti-Phospho-Raptor (Ser792) /FITC 荧光素标记磷化mTOR相关调控蛋白抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml
Amylin 糖尿病相关肽(胰岛淀粉样肽)Multi-class antibodies规格： 0.5mg
鼠抗人促黄体生成素抗体 Anti-LH 0.1ml
SAHH 英文名称： S腺苷L-同型半胱水解酶抗体 0.2ml
FGF22 英文名称： 成纤维细胞生长因子22抗体 0.2ml
抗肿瘤坏死因子α小鼠7说明书 phospho-IKK beta(Tyr188) 磷化KB抑制蛋白激酶β抗体 规格 0.1ml
TmR2(GDNFR Beta;TRN-R;GFR-alpha-2;NTNR-2) 胶质细胞系源性神经营养因子(多肽)Multi-class antibodies规格： 0.5mg
Anti-TSHR /FITC 荧光素标记促状腺素受体抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml
TNF-Alpha(Tumor Necrosis Factor-Alpha) 人坏死因子-α(多肽抗原)Multi-class antibodies规格： 0.5mg
血管假性血友病因子/血管性血友病因子抗体 Anti-VWF 0.1ml
Phospho-RPS6 (Ser235+Ser236) 英文名称： 磷化S6核糖体蛋白抗体 0.1ml
LPA2 英文名称： 溶血磷脂受体蛋白2抗体 0.2ml